普魯蘭多糖的分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定

1、普魯蘭多糖的分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定作者：曹海石添加日期：2011082023:21:02瀏覽：270次普魯蘭多糖是由茁芽短梗霉(Aureobasidiumpullulans)分泌的胞外多糖[1]它具有無毒害、粘結(jié)性強(qiáng)和成膜性好等優(yōu)良特性可作為食品、醫(yī)藥方面的粘合劑和包裝材料.此外也廣泛應(yīng)用于水果蔬菜保鮮、種子保護(hù)、化妝品和卷煙生產(chǎn)等方面是一種新型的多功能生物產(chǎn)品有較好的應(yīng)用前景[23].目前普魯蘭多糖的應(yīng)用國(guó)外已申請(qǐng)了多項(xiàng)專利我們實(shí)驗(yàn)室經(jīng)紫

2、外誘變篩選出一株高產(chǎn)普魯蘭多糖的菌株(AureobasidiumpullulansJB518)[4]對(duì)其產(chǎn)生的多糖進(jìn)行了分離純化該純化方法簡(jiǎn)便、回收率高.同時(shí)通過薄層層析、紅外光譜及核磁共振等方法對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定證實(shí)了它的基本結(jié)構(gòu)單位為麥芽三糖每個(gè)麥芽三糖之間由A(1→6)糖苷鍵相連這為該變異菌株的應(yīng)用提供了理論依據(jù).DEAE2纖維素為Whatman產(chǎn)品SephadexG2100為Pharmacia產(chǎn)品普魯蘭多糖(Pullulan)標(biāo)

3、準(zhǔn)品、麥芽三糖和普魯蘭酶(EC.3.2.1.41)為Sigma產(chǎn)品其它化學(xué)試劑均為國(guó)德國(guó)Bruker1FS66V真空型紅外光譜儀.美國(guó)Varian公司Unity400NMR儀.次溶劑DMSO2d6參考標(biāo)準(zhǔn):DDMSO=39160樣品質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)12%控溫誤差0.1℃.薄層層析(TLC)采用硅膠板法[7].在10g硅膠G260干粉中加入0102mol?L的乙酸鈉溶液25mL攪拌均勻平鋪在玻璃板上自然晾干后于120℃加熱活化30min制成硅

4、膠板.1.5剛果紅實(shí)驗(yàn)Fig.1CurveelutedonDEAEcellulosecolumnbywaterFig.2CurveelutedonDEAEcellulosecolumnbyNa2B4O7solution參照文獻(xiàn)[8]方法.剛果紅溶液濃度為215105mol?L普魯蘭多糖溶液質(zhì)量濃度為10mg?mL.將NaOH依次配成不同濃度(012～110mol?L)將普魯蘭多糖溶液和剛果紅溶液混合(體積比1∶1)然后加入與混合液等體積