尿干化學(xué)分析課程

1、第十章尿液分析儀及其臨床應(yīng)用第一節(jié)尿干化學(xué)分析儀（1）分類（2）檢測(cè)原理（3）檢測(cè)參數(shù)（4）臨床應(yīng)用（5）質(zhì)量控制（一）分類（一）分類干化學(xué)試帶操作方便，測(cè)定迅速，利用肉眼觀察試帶中顏色的變化與標(biāo)準(zhǔn)色板進(jìn)行比較，得出相應(yīng)數(shù)值，結(jié)果易受主觀因素影響。尿液分析儀（又稱尿干化學(xué)分析儀）的出現(xiàn)，給臨床實(shí)驗(yàn)室尿液分析帶來(lái)了一個(gè)飛躍。隨著高科技及計(jì)算機(jī)技術(shù)的高度發(fā)展和廣泛應(yīng)用，尿液分析已逐步由原來(lái)的半自動(dòng)分析發(fā)展到全自動(dòng)分析，檢測(cè)項(xiàng)目由原來(lái)的單項(xiàng)分

2、析發(fā)展到多項(xiàng)組合分析，尿液分析由此進(jìn)入了一個(gè)嶄新階段。（二）檢測(cè)原理（二）檢測(cè)原理1.1.尿液分析儀組成：尿液分析儀組成：尿液分析儀通常由機(jī)械系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、電路系統(tǒng)三部分組成。2.2.尿液分析儀試劑帶：尿液分析儀試劑帶：試帶以濾紙為載體，將各種試劑成分浸漬后干燥，作為試劑層，再在表面覆蓋一層纖維膜，作為反射層。尿液浸入試帶后與試劑發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化。多聯(lián)試帶是將多種檢測(cè)項(xiàng)目的試劑塊，按一定間隔、順序固定在同一條帶上的試帶。使用多聯(lián)

3、試帶，浸入一次尿液可同時(shí)測(cè)定多個(gè)項(xiàng)目。多聯(lián)試帶的基本結(jié)構(gòu)采用了多層膜結(jié)構(gòu)：第一層尼龍膜起保護(hù)作用，防止大分子物質(zhì)對(duì)反應(yīng)的污染；第二層絨制層，包括碘酸鹽層和試劑層，碘酸鹽層可破壞VitC等干擾物質(zhì)，試劑層與尿液所測(cè)定物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；第三層是固有試劑的吸水層，可使尿液均勻、快速地浸入，并能抑制尿液流到相鄰反應(yīng)區(qū)；最后一層選取尿液不浸潤(rùn)的塑料片作為支持體。有些試帶無(wú)碘酸鹽層，但相應(yīng)增加了l塊檢測(cè)VitC的試劑塊，以進(jìn)行某些項(xiàng)目的校正。不同型

4、號(hào)的尿液分析儀使用其配套的專用試帶，且測(cè)試項(xiàng)目試劑塊的排列順序是不相同的。通常情況下，試帶上的試劑塊要比測(cè)試項(xiàng)目多一個(gè)空白塊，有的甚至多參考?jí)K又稱固定塊?？瞻讐K的目的是為了消除尿液本身的顏色在試劑塊上分布不均等所產(chǎn)生的測(cè)試誤差，以提高測(cè)試準(zhǔn)確性；固定塊的目的是在測(cè)試過(guò)程中，使每次測(cè)定試劑塊的位置準(zhǔn)確，減低由此而引起的誤差。習(xí)題：尿試帶結(jié)構(gòu)中哪層具體結(jié)構(gòu)可以破壞尿液中維生素（）A.尼龍膜B.碘酸鹽層C.吸水層D.塑料底層E.絨制層『正確答

5、案』B3.3.尿液分析儀檢測(cè)原理：尿液分析儀檢測(cè)原理：尿液中相應(yīng)的化學(xué)成分使尿多聯(lián)試帶上各種含特殊試劑的膜塊發(fā)生顏色變化，顏色深淺與尿液中相應(yīng)物質(zhì)的濃度成正比；將多聯(lián)試帶置于尿液分析儀比色進(jìn)樣槽，各膜塊依次受到儀器光源照射并產(chǎn)生不同的反射光，儀器接收不同強(qiáng)度的光信號(hào)后將其轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電訊號(hào)，再經(jīng)微處理器由下列公式計(jì)算出各測(cè)試項(xiàng)目的反射率，然后與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較后校正為測(cè)定值，最后以定性或半定量方式自動(dòng)打印出結(jié)果。試劑塊顏色的深淺對(duì)光的吸收、

6、反射是不一樣的。顏色越深，吸收光量值越大，反射光量值越小，反射率越?。环粗?，顏色越淺，吸收光量值越小，反射光量值越大，反射率也越大。換言之，特定試劑塊顏色的深淺與尿樣中特定化學(xué)成分濃度成正比。（三）檢測(cè)參數(shù)（三）檢測(cè)參數(shù)從最初的單一測(cè)試到現(xiàn)今的多項(xiàng)測(cè)試，尿分析儀檢測(cè)參數(shù)隨尿試帶的發(fā)展而發(fā)展。尿試帶常依測(cè)試參數(shù)分為兩類：①用于初診患者及健康體檢使用的8～11項(xiàng)篩檢組合試帶。8項(xiàng)檢測(cè)項(xiàng)目包括酸堿度（pH）、蛋白（PRO）、葡萄糖（GLU）、

7、酮體（KET）、膽紅素（BIL）、尿膽原（URO）、紅細(xì)胞或血紅蛋白或隱血（ERY或HB）和亞硝酸鹽（NIT）；9項(xiàng)檢測(cè)項(xiàng)目在8項(xiàng)基礎(chǔ)上增加了尿白細(xì)胞（LEU，WBC）；10項(xiàng)檢測(cè)項(xiàng)目又在9項(xiàng)的基礎(chǔ)上增加了尿比密（SG）；11項(xiàng)則又增加了VitC。②用于已確診疾病的療效觀察，如尿糖、尿蛋白等單項(xiàng)試帶和各種組合型試帶。pH6.2～7.0。當(dāng)尿液pH≥7.0時(shí)，造成結(jié)果偏低，應(yīng)在干化學(xué)測(cè)定結(jié)果的基礎(chǔ)上增加0.005，作為由于堿性尿損失的補(bǔ)償

8、。②干化學(xué)尿比密測(cè)定結(jié)果表達(dá)值的變化范圍在1.000～1.030，間隔值較大（0.005），不能反映較小的比密變化。對(duì)于比密范圍在1.000～1.004的新生兒尿液，也不宜使用此法。③尿液中蛋白或糖濃度增加將使比密結(jié)果增加；尿素大于10gL或pH小于6.5時(shí)，致比密結(jié)果減低。3.3.尿糖尿糖尿糖檢測(cè)主要用于內(nèi)分泌性疾病如糖尿病及相關(guān)疾病的診斷與治療監(jiān)測(cè)等。（1）干化學(xué)尿糖檢測(cè)原理是基于葡萄糖氧化酶的酶促反應(yīng)，只與葡萄糖反應(yīng)，特異性強(qiáng)，用

9、干化學(xué)法測(cè)定結(jié)果為陰性的標(biāo)本，如用班氏法則可能呈現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果。同時(shí)，干化學(xué)法較之于班氏法有更高的靈敏度，為2～5mmolL。當(dāng)葡萄糖含量為1.67～2.78mmolL時(shí)，用干化學(xué)法即可出現(xiàn)弱陽(yáng)性，而班氏法在8.33mmolL，時(shí)才會(huì)呈現(xiàn)弱陽(yáng)性。（2）尿液在低葡萄糖濃度（14mmolL）時(shí)，VitC使干化學(xué)法產(chǎn)生假陰性反應(yīng)，而使班氏法產(chǎn)生假陽(yáng)性。（3）尿液被過(guò)氧化物、次氯酸鹽、強(qiáng)氧化性清潔劑污染可使尿糖呈現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；尿液中含有L多巴、大量

10、水楊酸鹽、氟化鈉、VitC超過(guò)500mgL、尿酮體超過(guò)0.4gL或尿比密過(guò)高，則將使尿糖呈現(xiàn)假陰性結(jié)果。4.4.蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)尿蛋白檢測(cè)主要用于腎臟疾病及其他相關(guān)疾病的診斷、治療、預(yù)后等。（1）尿液的pH：由于蛋白測(cè)定采用指示劑的蛋白質(zhì)誤差原理，因此，尿液的pH是影響測(cè)試結(jié)果的重要因素之一。當(dāng)患者服用奎寧、奎寧丁、嘧啶等藥物，或尿液中含有聚乙烯、吡咯酮、洗必泰、磷酸鹽、季銨鹽消毒劑等時(shí)，引起尿液呈強(qiáng)堿性（pH≥9.0），超過(guò)了試帶的緩沖能

11、力，使干化學(xué)法出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；當(dāng)尿液pH≤3.0時(shí)，會(huì)引起干化學(xué)法出現(xiàn)假陰性結(jié)果。（2）靈敏度：主要對(duì)清蛋白敏感（70～l00mgL），而對(duì)球蛋白、粘蛋白、本周蛋白不敏感，對(duì)球蛋白的靈敏度僅為清蛋白的1100～150。因此，對(duì)于腎病患者，特別是在疾病發(fā)展過(guò)程中需要系統(tǒng)觀察尿蛋白含量的病例，最好使用對(duì)白、球蛋白靈敏度一致的磺柳酸法。（3）藥物干擾：多種藥物可使尿蛋白干化學(xué)法檢查結(jié)果呈假陽(yáng)性或假陰性，如青霉素族藥物。結(jié)果表明：滴注青霉素25

12、0萬(wàn)U、2h，320萬(wàn)U、3h，480萬(wàn)U、5h，可能對(duì)干化學(xué)法產(chǎn)生假陰性。（4）其他：標(biāo)本含生殖系統(tǒng)分泌物或較多細(xì)胞成分時(shí)，可引起假陽(yáng)性。5.5.酮體酮體尿酮體檢查主要用于糖代謝障礙和脂肪不完全氧化的疾病或狀態(tài)的診斷及其他相關(guān)疾病的診斷和治療。干化學(xué)法尿酮體檢測(cè)采用亞硝基鐵氰化鈉法。①本法對(duì)酮體各組成成分的靈敏度不一：乙酰乙酸為50～100mgL，丙酮400～700mgL，與β羥丁酸不發(fā)生反應(yīng)。由于不同病因引起的酮癥，其酮體成分不一，

13、同一患者在不同病程，酮體成分亦會(huì)發(fā)生變化，因此干化學(xué)檢測(cè)所得結(jié)果可能與實(shí)際總的酮體量有所差異。②尿酮體中丙酮和乙酰乙酸都具有揮發(fā)性，因此測(cè)定時(shí)應(yīng)使用新鮮尿液標(biāo)本。6.6.膽紅素與尿膽原膽紅素與尿膽原尿膽紅素、尿膽原檢測(cè)主要用于消化系統(tǒng)肝臟、膽道疾病及其他相關(guān)疾病的診斷、治療，尤其對(duì)于黃疸的鑒別有特殊意義。①為避免膽紅素在陽(yáng)光照射下氧化為膽綠素、尿膽原氧化為尿膽素，檢測(cè)時(shí)應(yīng)使用新鮮尿液標(biāo)本。②當(dāng)患者接受大劑量氯丙嗪治療、或尿液中含有高濃度

14、的VitC（＞500mgL）、亞硝酸鹽、或含有鹽酸苯偶氮吡啶代謝產(chǎn)物時(shí)，可使膽紅素檢測(cè)呈現(xiàn)假陰性；尿液中含有酚噻嗪類或吩嗪類藥物時(shí)，可使膽紅素呈現(xiàn)假陽(yáng)性。③尿液中一些內(nèi)源性物質(zhì)如膽色素原、吲哚、膽紅素等和一些藥物如酚噻嗪類、VitK、磺胺藥等，因顏色干擾，尿膽原檢測(cè)時(shí)呈現(xiàn)假陽(yáng)性；而亞硝酸鹽、重氮藥物、對(duì)氨基水楊酸則在尿膽原檢測(cè)時(shí)呈現(xiàn)假陰性。④正常人尿膽原排出量以下午2～4時(shí)達(dá)最高峰；為提高陽(yáng)性檢出率，可預(yù)先給患者服用碳酸氫鈉以堿化尿液。