作物抗病性鑒定

1、實驗六作物抗病性鑒定作物抗病性鑒定(evaluationofdiseaseresistance)是作物抗病育種的重要基礎(chǔ)，從抗原篩選、后代選擇、直到品種推廣的全過程都離不開抗病性鑒定。狹義的抗病性鑒定是評價寄主品種、品系或種質(zhì)對特定病害抵抗或感染程度，廣義的抗病性鑒定還應(yīng)包括病原物的致病性評價。鑒定方法包括自然鑒定、接種鑒定、田間成株鑒定、室內(nèi)苗期鑒定、離體鑒定及間接鑒定等，在實際工作中則需根據(jù)作物、病害種類，目的要求和設(shè)備條件而定。常

2、用方法如下：1、田間自然鑒定自然發(fā)病條件下的田間鑒定是鑒定抗病性的最基本方法，尤其是在各種病害的常發(fā)區(qū)，進行多年、多點的聯(lián)合鑒定是一種有效方法。它能對育種材料或品種的抗性進行最全面、嚴格的考驗。田間鑒定的方法因作物種類而異，大田作物的田間鑒定一般要進行人工接種，接種方法又因病菌而異。對于稻瘟病等氣傳病害，可分別用涂抹、噴霧及注射等方法進行接種，以使具有抗接觸、抗侵入等抗病機制的品種也得以發(fā)病。2、溫室或田間接種鑒定這種方法是將病原菌孢子

3、或病毒直接接種到溫室或田間植株的葉片、果實或根上，它適合對所有作物進行抗病性鑒定。由于抗病現(xiàn)象是寄主、病原物及環(huán)境條件三者共同作用的結(jié)果，因此，這種鑒定結(jié)果也能真實地反映被鑒定材料的抗病性，可靠性強。接種鑒定的技術(shù)規(guī)程包括育苗、接種體的制備(病菌的分離、保存與抱子誘發(fā))及接種3個環(huán)節(jié)，接種的方法有點滴法、噴霧法、摩擦法及注射法等。3、離體接種鑒定為鑒定以組織、細胞或分子水平的抗病機制為主的病害，可選用離體接種鑒定。具有操作簡便，鑒定結(jié)果

4、可靠等優(yōu)點。可同時分別鑒定同一材料對不同病原菌的抗性。因直接從植株上取下子葉、葉片或果實進行鑒定，不影響幼苗正常生長發(fā)育和開花結(jié)實。鑒定方法不僅因作物、病菌種類而異，而且抗病性分級標準也因作物、病原菌的種類不同而存在很大的差別。以下則針對水稻稻瘟病、小麥條銹病、玉米大斑病等部分主要作物的最重要病害分別學習各種鑒定方法和技術(shù)。I水稻苗瘟抗性的鑒定一、實驗?zāi)康?、熟悉水稻苗期稻瘟病的癥狀特征。2、學習和初步掌握水稻苗瘟抗性鑒定技術(shù)。性。三、

5、材料儀器藥品1供試材料⑴供試水稻育種材料若干以及抗病對照品種和感病對照品種各一個。⑵供試稻瘟病菌菌種從當?shù)厮鸭植紡V、致病力強的主要稻瘟病菌的代表性生理小種若干個。分別進行小種培養(yǎng)繁殖。2儀器用品⑴病菌培養(yǎng)器具高壓滅菌鍋、超凈工作臺、酒精燈、恒溫培養(yǎng)箱、三角瓶（或茄子瓶)、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、搪瓷盆、紗布等。⑵菌液接種和制備器具顯微鏡、載玻片、蓋玻片、搪瓷盤、普通專用噴霧器或醫(yī)用喉頭噴霧器、醫(yī)用皮下注射器、橡膠管和保溫、保濕的遮蔭設(shè)備。3病

6、菌培養(yǎng)基⑴酵母淀粉瓊脂培養(yǎng)基（酵母2g、可溶性淀粉10g、瓊脂15~20g，加水1000ml）。⑵大麥或高粱種子。四、方法步驟（一）人工接種鑒定1菌種制備將供試稻瘟病菌菌種各生理小種分別培養(yǎng)，混合接種。2病原菌培養(yǎng)繁殖培養(yǎng)方法包括一級培養(yǎng)繁殖和二級培養(yǎng)繁殖兩個步驟：⑴一級培養(yǎng)繁殖采用酵母淀粉瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)。方法為：將瓊脂10~15g放入1000ml水中加熱溶化，再加可溶性淀粉（或煎糖）10g，酵母2g，裝入試管，經(jīng)消毒滅菌后，取出制成斜

7、面，接種病原菌，放在26~28℃恒溫箱中培養(yǎng)10d左右即可取用。⑵二級培養(yǎng)繁殖將病原菌轉(zhuǎn)移到大麥（或高粱）粒培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)擴大繁殖，用于接種鑒定。其方法是將大麥粒加水后煮到半熟狀態(tài)或用水浸泡24h，然后倒去多余的水分，裝入三角瓶內(nèi)（或茄子瓶），高壓滅菌，滅菌后立即將麥粒搖散防止結(jié)塊。然后在無菌操作條件下接種病菌，放在26~28℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)4~5d時應(yīng)搖動三角瓶內(nèi)的大麥粒，使菌絲生長均勻。待灰色菌絲長滿大麥粒并開始變黑時，用自來