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1、微孔濾膜過濾除菌微孔濾膜過濾除菌關(guān)鍵詞:硝酸化學(xué)試劑氯化鈉菌種試劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)北京標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)網(wǎng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?1)了解過濾除菌的原理。(2)掌握微孔濾膜過濾除菌的方法。二、基本原理盡管有報(bào)道稱原核細(xì)菌小至納米(109m)級(jí),大可達(dá)01~03mm甚至075mm(非洲納米比亞球菌),一些真核微生物如蘑菇、木耳等擔(dān)子菌也非常大。但絕大部分微生物都是微米級(jí)(106mm),常用的微孔濾膜可以把絕大部分細(xì)菌分離開來。過濾除菌是根據(jù)微生物的大小,如原核微
2、生物的尺寸為1~10μm(球菌05~2μm,桿菌長(zhǎng)1~8μm、寬05~1μm,螺旋菌長(zhǎng)5~50μm、寬05~5μm),真核微生物的尺寸為10~100μm(粗略地說,真核微生物和原核微生物大小存在10:1的遞減規(guī)律),選擇孔徑不同的濾膜,通過機(jī)械作用濾去液體或氣體中微生物的方法(圖1—2)。有關(guān)裝置至少應(yīng)滿足GB/Tu41589《實(shí)驗(yàn)室燒結(jié)(多孔)過濾器孔徑、分級(jí)和牌號(hào)》等的要求。四、操作步驟1大量液體過濾除菌將022μm孔徑的濾膜裝入清
3、洗干凈的砂芯過濾裝置中,旋緊或稍真空抽濾,壓平(如用一次性預(yù)滅菌的帶膜針式濾頭則無此步驟),包裝滅菌(01MPa、1215℃滅菌20min)后待用。2針孔過濾器將滅菌濾器的入口在無菌條件下以無菌操作方式連接于裝有待濾溶液(2%葡萄糖溶液)的注射器上,將針頭與出口處連接并插入帶橡皮塞的無菌容器中(圖1一3)。3壓濾將注射器中的待濾溶液加壓緩緩擠入過濾到無菌試管中,濾畢將針頭拔出。注意:壓濾時(shí),用力要適中,不可太猛、太快,以免細(xì)菌被擠壓通過
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