生物實驗室操作規(guī)范安全手冊

1、實驗室操作規(guī)范本規(guī)程中列出了最基本的實驗室操作和程序，他們是微生物學操作技術規(guī)范的基礎。在規(guī)劃實驗室和國家級實驗室項目時，可以根據(jù)這些規(guī)程來制訂實驗室安全操作的書面程序。每個實驗室都應該采用“安全手冊”或“操作手冊”，其中定義了已知的和潛在的危害，并規(guī)定了特殊的操作程序來避免或盡量減小這種危害。規(guī)范的微生物學操作技術是實驗室安全的基礎，而專門的實驗設備僅僅是一種補充，絕不能替代正確的操作規(guī)范。下面列出了一些最重要的概念。進入規(guī)定進入規(guī)定

2、1、在處理危險度2級或更高危險度級別的微生物時，在實驗室門上應標有國際通用的生物危害警告標志（圖1）。2、只有經(jīng)批準的人員方可進入實驗室工作區(qū)域。3、實驗室的門應保持關閉。4、兒童不應被批準或允許進入實驗室工作區(qū)域。5、進入動物房應當經(jīng)過特別批準。6、與實驗室工作無關的動物不得帶入實驗室。人員防護1、在實驗室工作時，任何時候都必須穿著連體衣、隔離服或工作服。2、在進行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物

3、的操作時，應戴上合適的手套。手套用完后，應先消毒再摘除，隨后必須洗手。3、在處理完感染性實驗材料和動物后，以及在離開實驗室工作區(qū)域前，都必須洗手。4、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害，必須戴安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護設備。5、嚴禁穿著實驗室防護服離開實驗室，（如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間）。6、不得在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。7、禁止在實驗室工作區(qū)域進食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼

4、鏡。8、禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。9、在實驗室內(nèi)用過的防護服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。操作規(guī)范1、嚴禁用口吸移液管。2、嚴禁將實驗材料置于口內(nèi)。嚴禁舔標簽。3、所有的技術操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來進行。4、應限制使用皮下注射針頭和注射器。除了進行腸道外注射或抽取實驗動物體液，皮下注射針頭和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。5、出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時，必須向?qū)嶒炇抑鞴軋蟾?。實?/p>

5、室應保存這些事件或事故的書面報告。6、必須制訂關于如何處理溢出物的書面操作程序，并予以遵守執(zhí)行。7、污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學或物理學方法）。根據(jù)所處理的微生物因子的危險度評估結果，可能需要準備污水處理系統(tǒng)。8、需要帶出實驗室的手寫文件必須保證在實驗室內(nèi)沒有受到污染。避免感染性物質(zhì)的擴散1、為了避免被接種物灑落，微生物接種環(huán)的直徑應為2～3mm并完全封閉，柄的長度應小于6cm以減小抖動。2、使用封閉式微型電

6、加熱器消毒接種環(huán)，能夠避免在本生燈的明火上加熱所引起的感染性物質(zhì)爆濺。最好使用不需要再進行消毒的一次性接種環(huán)。3、干燥痰液標本時要注意避免生成氣溶膠。4、準備高壓滅菌和／或?qū)⒈惶幚淼膹U棄標本和培養(yǎng)物應當放置在防漏的容器內(nèi)（如實驗室廢棄物袋）。在丟棄到廢棄物盛器中以前，頂部要固定好（如采用高壓滅菌膠帶）。5、在每一階段工作結束后，必須采用適當?shù)南緞┣宄ぷ鲄^(qū)的污染。詳細資料見參考文獻12。生物安全柜的使用1、應參考國家標準和相關文獻，對

7、所有可能的使用者都介紹生物安全柜的使用方法和局限性（參見第10章）。應當發(fā)給工作人員書面的規(guī)章、安全手冊或操作手冊。特別需要明確的是，當出現(xiàn)溢出﹑破損或不良操作時，安全柜就不再能保護操作者。2、生物安全柜運行正常時才能使用。3、生物安全柜在使用中不能打開玻璃觀察擋板。4、安全柜內(nèi)應盡量少放置器材或標本，不能影響后部壓力排風系統(tǒng)的氣流循環(huán)。5、安全柜內(nèi)不能使用本生燈，否則燃燒產(chǎn)生的熱量會干擾氣流并可能損壞過濾器。允許使用微型電加熱器，但最

8、好使用一次性無菌接種環(huán)。6、所有工作必須在工作臺面的中后部進行，并能夠通過玻璃觀察擋板看到。7、盡量減少操作者身后的人員活動。8、操作者不應反復移出和伸進手臂以免干擾氣流。9、不要使實驗記錄本﹑移液管以及其他物品阻擋空氣格柵，因為這將干擾氣體流動，引起物品的潛在污染和操作者的暴露。10、工作完成后以及每天下班前，應使用適當?shù)南緞ι锇踩竦谋砻孢M行擦拭。11、在安全柜內(nèi)的工作開始前和結束后，安全柜的風機應至少運行5min。12、在生

9、物安全柜內(nèi)操作時，不能進行文字工作。避免感染性物質(zhì)的食入以及與皮膚和眼睛的接觸1、微生物操作中釋放的較大粒子和液滴（直徑大于5μm）會迅速沉降到工作臺面和操作者的手上。實驗室人員在操作時應戴一次性手套，并避免觸摸口、眼及面部。2、不能在實驗室內(nèi)飲食和儲存食品。3、在實驗室里時，嘴里不應有東西——鋼筆、鉛筆、口香糖。4、不應在實驗室化妝。5、在所有可能產(chǎn)生潛在感染性物質(zhì)噴濺的操作過程中，操作人員應將面部、口和眼遮住或采取其他防護措施。避免