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1、常用緩沖溶液的配制方法常用緩沖溶液的配制方法1甘氨酸甘氨酸–鹽酸緩沖液(鹽酸緩沖液(0.05molL)X毫升0.2molL甘氨酸Y毫升0.2molLHCI,再加水稀釋至200毫升pHXYpHXY2.02.42.62.85050505044.032.424.216.83.03.23.43.65050505011.48.26.45.0甘氨酸分子量=75.07,0.2molL甘氨酸溶液含15.01克升。2鄰苯二甲酸鄰苯二甲酸–鹽酸緩沖液(鹽酸
2、緩沖液(0.05molL)X毫升0.2molL鄰苯二甲酸氫鉀0.2molLHCl,再加水稀釋到20毫升pH(20℃)XYpH(20℃)XY2.22.42.62.83.0555554.0703.9603.2952.6422.0223.23.43.63.855551.4700.9900.5970.263鄰苯二甲酸氫鉀分子量=204.23,0.2molL鄰苯二甲酸氫溶液含40.85克升3磷酸氫二鈉磷酸氫二鈉–檸檬酸緩沖液檸檬酸緩沖液pH0.2
3、molLNa2HPO4(毫升)0.1molL檸檬酸(毫升)pH0.2molLNa2HPO4(毫升)0.1molL檸檬酸(毫升)2.22.42.62.83.03.23.43.63.84.04.24.44.64.85.00.401.242.183.174.114.945.706.447.107.718.288.829.359.8610.3010.6018.7617.8216.8315.8915.0614.3013.5612.9012.291
4、1.7211.1810.6510.149.705.25.45.65.86.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.010.7211.1511.6012.0912.6313.2213.8514.5515.4516.4717.3918.1718.7319.1519.459.288.858.407.917.376.786.155.454.553.532.611.831.270.850.55Na2HPO4分子量=14.98,
5、0.2molL溶液為28.40克升。Na2HPO42H2O分子量=178.05,0.2molL溶液含35.01克升。C4H2O7H2O分子量=210.14,0.1molL溶液為21.01克升。7磷酸鹽緩沖液磷酸鹽緩沖液(1)磷酸氫二鈉–磷酸二氫鈉緩沖液(0.2)pH0.2molLNa2HPO4(毫升)0.2molLNaH2PO4(毫升)pH0.2molLNa2HPO4(毫升)0.2molLNaH2PO4(毫升)5.85.96.06.16
6、.26.36.46.56.66.76.86.98.010.012.315.018.522.526.531.537.543.549.555.092.090.087.785.081.577.573.568.562.556.551.045.07.07.17.27.37.47.57.67.77.87.98.061.067.072.077.081.084.087.089.591.593.094.739.033.028.023.019.016.01
7、3.010.58.57.05.3Na2HPO42H2O分子量=178.05,0.2molL溶液為85.61克升。Na2HPO412H2O分子量分子量=358.14,0.2molL溶液為溶液為71.628克升。升。NaH2PO42H2O分子量分子量=156.01,0.2molL溶液為溶液為31.202克升。升。磷酸鹽是生物化學(xué)研究中使用最廣泛的一種緩沖劑,由于它們是二級解離,有二個pKa值,所以用它們配制的緩沖液,pH范圍最寬:NaH2P
8、O4:pKa1=2.12,pKa2=7.21;Na2HPO4:pKa1=7.21,pKa2=12.32配酸性緩沖液:用NaH2PO4,pH=1~4,配中性緩沖液:用混合的兩種磷酸鹽,pH=6~8,配堿性緩沖液:用Na2HPO4,pH=10~12。用鉀鹽比鈉鹽好,因為低溫時鈉鹽難溶,鉀鹽易溶,但若配制SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳的緩沖液時,只能用磷酸鈉而不能用磷酸鉀,因為SDS(十二烷基硫酸鈉)會與鉀鹽生成難溶的十二烷基硫酸鉀。磷酸鹽緩沖液的
9、優(yōu)點為:①容易配制成各種濃度的緩沖液;②適用的pH范圍寬;③pH受溫度的影響小;④緩沖液稀釋后pH變化小,如稀釋10倍后pH的變化小于0.1。其缺點為:①易與常見的鈣Ca2離子、鎂Mg2離子以及重金屬離子締合生成沉淀;②會抑制某些生物化學(xué)過程,如對某些酶的催化作用會產(chǎn)生某種程度的抑制作用。(2)磷酸氫二鈉–磷酸二氫鉀緩沖液(115molL)pHmolL15Na2HPO4(毫升)molL15KH2PO4(毫升)pHmolL15Na2HPO
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