藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)系列儀器培訓(xùn)教程20110810

1、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)系列儀器使用技術(shù)教程,吉林大學(xué)國(guó)家級(jí)生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心王德利20110816,藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的和任務(wù),藥理學(xué)是生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)的橋梁學(xué)科之一，具有很強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)依賴(lài)性。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)不僅是藥理學(xué)教學(xué)的補(bǔ)充，而且是培養(yǎng)學(xué)生思維、鍛煉學(xué)生技能的實(shí)踐性課程。目的是通過(guò)實(shí)驗(yàn)使同學(xué)們所學(xué)的基本理論和基本知識(shí)得到進(jìn)一步驗(yàn)證和理解，培養(yǎng)同學(xué)們嚴(yán)肅的科學(xué)態(tài)度和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)。任務(wù)是通過(guò)實(shí)驗(yàn)課使同學(xué)們掌握研究藥理學(xué)的基本實(shí)驗(yàn)技能和實(shí)驗(yàn)

2、方法，為今后從事科學(xué)研究工作打下良好的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備的使用技能是藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)必不可少的，極其重要的環(huán)節(jié)。下面就介紹幾種常用的藥理實(shí)驗(yàn)儀器：,1. FT-200型動(dòng)物跑步機(jī)設(shè)備名稱(chēng)：動(dòng)物跑步機(jī)規(guī)格型號(hào)：FT-200型生產(chǎn)廠(chǎng)家：成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品簡(jiǎn)介：FT-200動(dòng)物跑步機(jī)配備有動(dòng)物跑道，通過(guò) 后端一個(gè)刺激裝置來(lái)強(qiáng)迫動(dòng)物持續(xù)奔跑，儀器自動(dòng)記錄動(dòng)物所受電擊次數(shù)和跑道上的奔跑總時(shí)間?？捎糜谄趯?shí)驗(yàn)

3、、運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)實(shí)驗(yàn)、中樞神經(jīng)抑制實(shí)驗(yàn)、骨骼肌松弛實(shí)驗(yàn)研究，觀(guān)察藥物對(duì)受試動(dòng)物運(yùn)動(dòng)及協(xié)調(diào)能力的影響，也可用于大、小鼠抗疲勞實(shí)驗(yàn)，評(píng)測(cè)藥物對(duì)動(dòng)物體能的影響。,,操作規(guī)程（1）實(shí)驗(yàn)前一周，在喂食30分鐘后，先進(jìn)行跑步機(jī)適應(yīng)訓(xùn)練；（2）將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（大鼠或小鼠）放入跑步帶上，蓋上玻璃蓋；打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)；設(shè)定好“定時(shí)時(shí)間”、“轉(zhuǎn)速”和“大/小鼠”的工作模式及調(diào)節(jié)刺激電流旋鈕，按下“啟/停”按鈕，系統(tǒng)自動(dòng)開(kāi)始記錄；（3）末次給藥后30、60分鐘，將

4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放在跑步機(jī)上，設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù)，按“啟/停”按鈕進(jìn)行動(dòng)物體能測(cè)試。 提示：可采用逐漸增加速度與坡度的方法使動(dòng)物奔跑直至力竭(exhaustion)，參數(shù)設(shè)置可參考下表(Bedford et al., 1979) 所列。若鼠落入電擊區(qū)，而經(jīng)過(guò)多次電擊仍無(wú)法起身往前跑即判定已經(jīng)力竭，記錄開(kāi)始跑步至力竭的跑步時(shí)間。,（4）當(dāng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在跑步帶一頭落下時(shí)，液晶顯示器上對(duì)應(yīng)的該通道將停止計(jì)時(shí)，同時(shí)動(dòng)物落帶次數(shù)加1。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物會(huì)因受電擊后離開(kāi)刺激

5、源，繼續(xù)在跑步帶上活動(dòng)，此時(shí)通道計(jì)時(shí)繼續(xù)累加。實(shí)驗(yàn)用時(shí)到達(dá)設(shè)定時(shí)間后，實(shí)驗(yàn)停止。,注意事項(xiàng)（1）成年標(biāo)準(zhǔn)體重的大小鼠為宜，大鼠體重200g左右，小鼠體重20g左右；（2）在通風(fēng)、安靜、相對(duì)昏暗的環(huán)境下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。（3）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體能較好者電擊次數(shù)相對(duì)較少，而奔跑時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)。,2.MT-200型Morris水迷宮視頻跟蹤分析系統(tǒng),設(shè)備名稱(chēng)：Morris水迷宮視頻跟蹤分析系統(tǒng) 規(guī)格型號(hào)：MT-200型 生產(chǎn)廠(chǎng)家：成都泰

6、盟科技有限公司 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：大小鼠厭惡處于水中的狀態(tài)，同時(shí)游泳對(duì)于大小鼠來(lái)說(shuō)十分消耗體力，因此在水中它們會(huì)本能的尋找水中的休息場(chǎng)所。尋找休息場(chǎng)所的行為涉及到一個(gè)復(fù)雜的記憶過(guò)程，包括收集與空間定位有關(guān)的視覺(jué)信息，再對(duì)這些信息進(jìn)行處理、整理、記憶、加固、然后再取出，目的是能成功的航行并且找到隱藏在水中的站臺(tái)，最終從水中逃脫。Morris水迷宮（Morris water maze, MWM）實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)迫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（大鼠、小鼠）游泳，學(xué)習(xí)

7、尋找隱藏在水中平臺(tái)的一種實(shí)驗(yàn)，主要用于測(cè)試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)空間位置感和方向感（空間定位）的學(xué)習(xí)記憶能力。,,操作規(guī)程（1）將圓形反應(yīng)水箱與固定支架放置在適當(dāng)位置，將攝象頭固定在圓形水箱垂直上方。在水池中注入清水，然后注入適量新鮮牛奶或奶粉，使水池成為不透明的乳白色。（2）將平臺(tái)置于某一象限中央，且使水面高于平臺(tái)0.5～2cm（根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的大小決定），使動(dòng)物無(wú)法憑視覺(jué)辨別水中平臺(tái)的位置。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（大小鼠）用實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的苦味酸在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

8、的頭部和背部涂抹成較大相連的區(qū)域作為標(biāo)記色。（3）將攝像頭用視頻信號(hào)電纜與計(jì)算機(jī)上的捕捉卡相聯(lián)接。完成加密狗和軟件系統(tǒng)的安裝。啟動(dòng)軟件，進(jìn)入軟件主界面。（4）調(diào)整攝象鏡頭位置和焦距，使視頻顯示范圍剛好覆蓋整個(gè)容器水區(qū)域。以屏幕上的黑色基準(zhǔn)線(xiàn)為準(zhǔn)，移動(dòng)水容器使容器上的標(biāo)記點(diǎn)與準(zhǔn)線(xiàn)相重合。（若屏幕上未出現(xiàn)黑色基準(zhǔn)線(xiàn)則可通過(guò)選擇屏幕右側(cè)的“顯示基準(zhǔn)”顯示）。（5）點(diǎn)擊“新建項(xiàng)目”開(kāi)始新的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目， 點(diǎn)擊“場(chǎng)景設(shè)定”來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景的設(shè)定：

9、按住鼠標(biāo)左鍵在左側(cè)標(biāo)記點(diǎn)按下不放，拖動(dòng)鼠標(biāo)沿著左側(cè)標(biāo)記點(diǎn)到右側(cè)標(biāo)記點(diǎn)放開(kāi)鼠標(biāo)。然后按住鼠標(biāo)左鍵在上側(cè)標(biāo)記點(diǎn)按下不放，拖動(dòng)鼠標(biāo)沿著上側(cè)標(biāo)記點(diǎn)到下側(cè)標(biāo)記點(diǎn)放開(kāi)鼠標(biāo)。則系統(tǒng)自動(dòng)根據(jù)以上標(biāo)記畫(huà)出場(chǎng)景,（6）場(chǎng)景設(shè)置完成后，用戶(hù)可點(diǎn)擊“確定平臺(tái)”按鍵進(jìn)行平臺(tái)位置和大小的設(shè)置。第一次實(shí)驗(yàn)時(shí)實(shí)平臺(tái)和虛平臺(tái)的位置和大小是一致的，以后每次實(shí)驗(yàn)點(diǎn)擊該按鍵時(shí)所確定的為實(shí)平臺(tái)的位置，虛平臺(tái)自動(dòng)設(shè)為第一次實(shí)驗(yàn)時(shí)的設(shè)置，不用再設(shè)定。（7）將有標(biāo)記色的小鼠放在攝像

10、頭下，點(diǎn)擊“目標(biāo)選取”，屏幕上出現(xiàn)了紅色色塊，如果色塊不明顯或與實(shí)際標(biāo)記的部分相差太大說(shuō)明閾值設(shè)置不合適或攝像頭設(shè)置不當(dāng)。可通過(guò)“調(diào)節(jié)閾值”調(diào)節(jié)到出現(xiàn)合適形狀為止（確保屏幕上只有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)記的地方為紅色，這樣實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的追蹤才準(zhǔn)確可靠）。（8）點(diǎn)擊“清除屏幕”按鈕，恢復(fù)到正常顯示狀態(tài)。點(diǎn)擊“保存設(shè)置”按鈕，保存當(dāng)前合適的顏色配置為默認(rèn)值。（9）設(shè)置系統(tǒng)坐標(biāo)參數(shù)，點(diǎn)擊“系統(tǒng)定標(biāo)”，本系統(tǒng)使用的實(shí)驗(yàn)桶已設(shè)定了四個(gè)標(biāo)記點(diǎn)，只需移動(dòng)鼠標(biāo)到相

11、應(yīng)標(biāo)記點(diǎn)，按住鼠標(biāo)左鍵拖動(dòng)鼠標(biāo)到其對(duì)應(yīng)標(biāo)記點(diǎn)松開(kāi)即可，此時(shí)系統(tǒng)彈出一個(gè)對(duì)話(huà)框，在其中選擇正確的單位即完成本項(xiàng)操作。完成以上步驟后，即可開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。,（10）在軟件主界面右方中部有“實(shí)驗(yàn)設(shè)置”面板，其中有“定位航行實(shí)驗(yàn)”，“空間搜索實(shí)驗(yàn)”，兩種實(shí)驗(yàn)類(lèi)型可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇，系統(tǒng)默認(rèn)為“定位航行實(shí)驗(yàn)”。 ①定位航行實(shí)驗(yàn)觀(guān)察和記錄小鼠尋找并爬上平臺(tái)的路線(xiàn)圖及所需時(shí)間，即記錄其潛伏期和游泳速度，無(wú)設(shè)定時(shí)間限制。 ②空間搜索實(shí)驗(yàn)要求動(dòng)物

12、在設(shè)定時(shí)間內(nèi)能否能夠找到平臺(tái)，用于測(cè)量動(dòng)物對(duì)平臺(tái)空間位置記憶的保持能力。（11）在 “動(dòng)物編號(hào)”選擇框中選擇本次實(shí)驗(yàn)的小鼠編號(hào)，然后放入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（小鼠、大鼠），點(diǎn)擊“開(kāi)始實(shí)驗(yàn)”進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。（12）訓(xùn)練： ①每日將動(dòng)物頭朝池壁按東、南、西、北4個(gè)入水點(diǎn)分別放入水池，將站臺(tái)置于某一象限中央，實(shí)驗(yàn)過(guò)程保持站臺(tái)位置不變。 ②每次實(shí)驗(yàn)以120s為限，系統(tǒng)自動(dòng)記錄動(dòng)物從入水點(diǎn)到達(dá)站臺(tái)所需時(shí)間以及在這段時(shí)間內(nèi)的游泳路程，以所需時(shí)間作為

13、學(xué)習(xí)和記憶成績(jī)，若設(shè)定時(shí)間內(nèi)未找到站臺(tái)，計(jì)算機(jī)停止跟蹤，記錄時(shí)間為120s。 ③訓(xùn)練中若動(dòng)物在120s內(nèi)找到站臺(tái)，讓其在站臺(tái)上停留20s，若動(dòng)物未找到站臺(tái)，將其放在站臺(tái)上使其停留20s。20S后將其從平臺(tái)上拿下，休息一分鐘后再次開(kāi)始訓(xùn)練。一般正常動(dòng)物經(jīng)5～6個(gè)訓(xùn)練日可學(xué)會(huì)以最快最佳的軌跡找到平臺(tái)的正確位置。,（13）測(cè)試：第7日開(kāi)始可將平臺(tái)轉(zhuǎn)移到另一象限，記錄動(dòng)物入水后找到遷移后的平臺(tái)的潛伏期，在原來(lái)平臺(tái)位置所逗留的時(shí)間以及動(dòng)物

14、找到遷徙后的平臺(tái)的路徑。（14）數(shù)據(jù)的導(dǎo)出： ①軌跡的導(dǎo)出當(dāng)一次或多次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，點(diǎn)擊“數(shù)據(jù)查看”切換到實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示窗口，此時(shí)模式為“圖像模式”，窗口中顯示的為實(shí)驗(yàn)的軌跡圖像。窗口正下方有一軌跡選擇框，可用鼠標(biāo)選擇需顯示的軌跡，此時(shí)點(diǎn)擊“導(dǎo)出”按鈕將窗口中的圖像保存為一幅位圖(后綴名為.BMP)?？捎谩爱?huà)筆”或PHOTOSHOP等圖像軟件打開(kāi)進(jìn)行修正和打印等操作。 ②實(shí)驗(yàn)結(jié)果的導(dǎo)出在點(diǎn)擊“數(shù)據(jù)查看”后點(diǎn)擊“數(shù)據(jù)模式”則切換到實(shí)

15、驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)顯示窗口，此時(shí)窗口中顯示的為本項(xiàng)目中所有實(shí)驗(yàn)的結(jié)果數(shù)據(jù)信息。點(diǎn)擊“導(dǎo)出”則可將這些信息保存為一個(gè)EXCEL文件（擴(kuò)展名為.CSV）。這個(gè)文件可用EXCEL打開(kāi)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)打印。,注意事項(xiàng)（1）在訓(xùn)練時(shí)，動(dòng)物需要利用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的固有環(huán)境和設(shè)施的空間定位作為參照物來(lái)綜合判斷安全位置或途徑，所以實(shí)驗(yàn)時(shí)，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的一切設(shè)備的位置（包括儀器、工作臺(tái)、門(mén)窗、燈具、椅子等）以及實(shí)驗(yàn)者的位置都需保持相對(duì)固定，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。（2）動(dòng)物上平臺(tái)后

16、，讓其環(huán)顧四周20秒時(shí)間，讓其辨別記憶空間線(xiàn)索。（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后注意動(dòng)物的除濕保暖。,3.PL-200型熱刺痛儀設(shè)備名稱(chēng)：熱刺痛儀規(guī)格型號(hào)：PL-200型生產(chǎn)廠(chǎng)家：成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品簡(jiǎn)介：利用一定強(qiáng)度的溫?zé)岽碳?dòng)物軀體某一部分，從而產(chǎn)生疼痛反應(yīng)，以刺激開(kāi)始至出現(xiàn)反應(yīng)的潛伏期作為測(cè)痛指標(biāo)評(píng)價(jià)藥物疼痛能力，適用于篩選作用較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛藥物。PL-200熱刺痛儀采用高聚光燈產(chǎn)生可變強(qiáng)度的輻射光束，經(jīng)過(guò)紅外濾光鏡聚焦照射大小鼠后肢

17、足底中心處皮膚，以大小鼠迅速抬起后肢作為疼痛反應(yīng)指標(biāo)，給藥前、后痛閾值的變化來(lái)測(cè)定藥物的效應(yīng)。,,操作規(guī)程（1）預(yù)熱：打開(kāi)主機(jī)電源，按“開(kāi)始”鍵點(diǎn)亮刺激光源，預(yù)熱３０秒，按下“設(shè)置”按鈕設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù)，例如組別、實(shí)驗(yàn)停止時(shí)間，光照強(qiáng)度等。（2）選擇體重200g左右的大鼠或體重20g左右的小鼠，分別放入實(shí)驗(yàn)平臺(tái)上的鼠盒內(nèi)，待動(dòng)物適應(yīng)保持安靜后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。（3）移動(dòng)平臺(tái)下方的熱輻射刺激筒至大小鼠后足部位，使光源發(fā)射中心正對(duì)動(dòng)物足底，按下

18、刺激筒上的開(kāi)始按鈕，儀器開(kāi)始計(jì)時(shí)，并發(fā)射出紅外光刺激動(dòng)物后足部位，動(dòng)物受刺激抬起或移動(dòng)后足，儀器自動(dòng)感應(yīng)此動(dòng)作立即停止計(jì)時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束。（4）自照射開(kāi)始至迅速抬起后肢的潛伏期時(shí)間（s）作為該鼠的痛閾值。一般連測(cè)2次，取其平均值作為基礎(chǔ)痛閾（對(duì)照潛伏期）。,注意事項(xiàng)（1）須在動(dòng)物安靜狀態(tài)下開(kāi)始實(shí)驗(yàn)，大鼠安靜時(shí)間一般為２min，小鼠一般要５～１０min。（2）實(shí)驗(yàn)時(shí)注意對(duì)準(zhǔn)動(dòng)物后足底部中心區(qū)域；（3）照射強(qiáng)度的調(diào)節(jié)使得實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)該一

19、般為１０秒為宜；（4）不要在短時(shí)間內(nèi)重復(fù)照射同一只動(dòng)物的同一部位；（5）設(shè)定恰當(dāng)?shù)恼丈渫Ｖ箷r(shí)間，到設(shè)定時(shí)間后儀器自動(dòng)停止照射可防止對(duì)痛覺(jué)不敏感動(dòng)物足底造成損傷。,4.PV-200型足趾容積測(cè)量?jī)x 設(shè)備名稱(chēng)：足趾容積測(cè)量?jī)x規(guī)格型號(hào)：PV-200型生產(chǎn)廠(chǎng)家：成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品簡(jiǎn)介：用一定劑量的致炎劑，注入大小鼠后肢足趾或踝部皮下，造成足趾和關(guān)節(jié)腫脹，通過(guò)測(cè)量鼠類(lèi)足趾致炎腫脹后消腫過(guò)程中的體積改變以及比較給藥組和對(duì)照組足趾

20、或踝關(guān)節(jié)腫脹抑制率來(lái)評(píng)價(jià)抗炎藥物療效。本儀器亦可用于抗炎類(lèi)藥物的藥理研究以及藥物產(chǎn)生致炎副作用的檢測(cè)。,,操作規(guī)程（1）預(yù)熱接通儀器相關(guān)設(shè)備連線(xiàn)，打開(kāi)開(kāi)關(guān)進(jìn)行預(yù)熱儀器5分鐘；（2）實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)將測(cè)量燒杯裝滿(mǎn)130ml左右清水，并放在工作面上，蓋上保護(hù)蓋。（3）設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù)，根據(jù)液晶屏提示踩下腳踏開(kāi)關(guān)或按下清零鍵，完成清零操作。（4）用記號(hào)筆在大小鼠后肢踝關(guān)節(jié)周?chē)魃嫌浱?hào)，測(cè)量時(shí)拉直放入量杯，使記號(hào)線(xiàn)與與量杯水位線(xiàn)相平，穩(wěn)定后等儀

21、器發(fā)出“滴滴”提示音后，踩下腳踏開(kāi)關(guān)或按測(cè)量按鈕得出結(jié)果。,注意事項(xiàng)（1）用體重120~150g的健康大鼠或18~25g的健康小鼠對(duì)致炎劑最敏感，腫脹度高，差異性小。（2）動(dòng)物后足碰到量杯中的涼水會(huì)縮足影響實(shí)驗(yàn)，采用溫水可便于測(cè)量操作。（3）測(cè)量時(shí)量杯的上方應(yīng)蓋上保護(hù)蓋，同時(shí)避免風(fēng)扇等直接吹壓量杯，導(dǎo)致無(wú)法測(cè)量；（4）測(cè)量時(shí)動(dòng)物足趾注意不要碰觸量杯杯壁，以免測(cè)量不準(zhǔn)。（5）由同一人觀(guān)察，多次測(cè)量取平均值為宜。,5.RB-20

22、0型智能熱板儀 設(shè)備名稱(chēng)：智能熱板儀規(guī)格型號(hào)：RB-200型生產(chǎn)廠(chǎng)家：成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品簡(jiǎn)介：利用一定強(qiáng)度的溫?zé)岽碳?dòng)物軀體某一部分，從而產(chǎn)生疼痛反應(yīng)，以刺激開(kāi)始至出現(xiàn)反應(yīng)的時(shí)間為潛伏期作為測(cè)痛指標(biāo)評(píng)價(jià)藥物抗疼痛能力，適用于篩選作用較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛藥物。熱刺激強(qiáng)度在45～55℃，在這一范圍內(nèi)動(dòng)物可產(chǎn)生明顯的痛反應(yīng)，又不致造成皮膚灼傷，此為熱刺激法。RB-200熱板儀就是利用上述原理，將大小鼠放到預(yù)先加熱到55°C左右

23、的金屬板上，以舔后足作為疼痛反應(yīng)指標(biāo)，測(cè)定潛伏期，觀(guān)察給藥前、后痛閾值的變化。,,操作規(guī)程（1）開(kāi)啟電源設(shè)置日期、溫度等參數(shù)，系統(tǒng)默認(rèn)溫度為55℃，可以通過(guò)“”調(diào)節(jié)目標(biāo)溫度。（2）在熱板實(shí)際溫度沒(méi)有達(dá)到目標(biāo)溫度之前，系統(tǒng)處于加熱狀態(tài)，這時(shí)不能做實(shí)驗(yàn)，實(shí)際溫度達(dá)到目標(biāo)設(shè)定溫度后，系統(tǒng)“恒溫指示燈”點(diǎn)亮，表示可以正常實(shí)驗(yàn)了。（3）將待測(cè)動(dòng)物放在預(yù)熱好的金屬板上，在放入動(dòng)物的同時(shí)，踩下腳踏開(kāi)關(guān)或按下“啟/?！卑粹o，系統(tǒng)自動(dòng)開(kāi)始計(jì)時(shí)，等

24、觀(guān)察到動(dòng)物添后足后，再次踩下腳踏開(kāi)關(guān)或按下“啟/停”按鈕，計(jì)時(shí)結(jié)束，所得時(shí)間即為潛伏期。（4）同只動(dòng)物兩次實(shí)驗(yàn)間隔≥5min，測(cè)2~3次取其均值計(jì)算潛伏期。,注意事項(xiàng)（1）實(shí)驗(yàn)前應(yīng)篩選動(dòng)物，一般將反應(yīng)潛伏期小于5s或大于30s的動(dòng)物篩除。（2）雄性鼠可能因?yàn)殛幠蚁陆刀艽碳ぃ时緦?shí)驗(yàn)宜用雌性鼠。（3）室溫對(duì)實(shí)驗(yàn)有影響，過(guò)低動(dòng)物反應(yīng)遲鈍，過(guò)高則敏感，易引起跳躍。室溫13~18℃范圍內(nèi)動(dòng)物波動(dòng)較小。（4）不同個(gè)體對(duì)熱板刺激反應(yīng)有

25、不同表現(xiàn)，多數(shù)舔足，故常采用舔足為痛反應(yīng)指標(biāo)，有些動(dòng)物反應(yīng)易跳躍而不舔足，還有的老鼠只在熱板上快速走動(dòng)而不出現(xiàn)舔足反應(yīng).舔足反應(yīng)為一保護(hù)反應(yīng)，而跳躍為逃避反應(yīng)。故實(shí)驗(yàn)中只宜取其一為指標(biāo)，將其他反應(yīng)鼠剔除。（5）為防止足部燙傷，若痛閾值超過(guò)60s，即停止測(cè)試而按60s計(jì)。,6.SW-200型光熱尾痛儀 設(shè)備名稱(chēng)：光熱尾痛儀規(guī)格型號(hào)：SW-200型生產(chǎn)廠(chǎng)家：成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品簡(jiǎn)介：用小型聚光燈產(chǎn)生一定強(qiáng)度的紅外光束，通過(guò)透

26、鏡聚焦照射大鼠或小鼠的尾巴來(lái)致痛，從而產(chǎn)生疼痛反應(yīng)，以刺激開(kāi)始至出現(xiàn)甩尾反應(yīng)的時(shí)間作為潛伏期測(cè)痛指標(biāo)，以給藥前、后痛閾值的變化來(lái)測(cè)定藥物的效應(yīng)，評(píng)價(jià)藥物疼痛能力，適用于篩選作用較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛藥物。,,操作規(guī)程（1）打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，按下設(shè)置鍵系統(tǒng)進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)置界面，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)定日期、光照強(qiáng)度、照射停止時(shí)間等實(shí)驗(yàn)參數(shù)項(xiàng)；（2）將準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)的老鼠裝入合適的固定筒內(nèi)；尾部暴露于外，實(shí)驗(yàn)前先用75%乙醇擦凈鼠尾，墨汁涂于尾部的下1/3處作為光刺激

27、點(diǎn)的標(biāo)志，實(shí)驗(yàn)時(shí)使光刺激點(diǎn)標(biāo)志正對(duì)光照輻射處，稍待動(dòng)物安靜后即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；（3）動(dòng)物處于安靜狀態(tài)時(shí)，將鼠尾光刺激點(diǎn)標(biāo)志移至正對(duì)光照輻射處。按下“開(kāi)始”鍵開(kāi)始實(shí)驗(yàn)，此時(shí)輻射燈被點(diǎn)亮，透過(guò)紅外玻璃發(fā)熱，實(shí)驗(yàn)計(jì)時(shí)開(kāi)始；當(dāng)鼠尾被光熱刺痛時(shí)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物會(huì)迅速甩動(dòng)尾巴，儀器自動(dòng)偵測(cè)到該動(dòng)作，實(shí)驗(yàn)計(jì)時(shí)自動(dòng)停止，記錄保存于系統(tǒng)中。,注意事項(xiàng)（1）大鼠體重200g左右，小鼠體重20g左右，裝入特制的固定筒內(nèi)；（2）一般選擇5s左右引起甩尾的動(dòng)物供實(shí)

28、驗(yàn)用，少于3s或大于10s，表示動(dòng)物反應(yīng)過(guò)于靈敏或遲鈍，舍棄不用；（3）室溫的影響：由于鼠尾表面積很大，易于散熱，改變室溫可使尾溫發(fā)生相應(yīng)變化，隨著室溫的升高，甩尾閾值降低。實(shí)驗(yàn)時(shí)，最好將室溫維持在20℃左右，并且每日同一時(shí)間進(jìn)行。（4）測(cè)痛部位，通常選用鼠尾下1/3處，但反復(fù)連續(xù)測(cè)定時(shí)，應(yīng)將測(cè)痛部位稍加移動(dòng)，防止局部燙傷影響測(cè)定效果，注意排除明顯的動(dòng)物自主甩尾行為。（5）避免動(dòng)物在固定筒內(nèi)自由旋轉(zhuǎn)，鼠尾照射位置改變會(huì)得出較大差異

29、的結(jié)果。,7.ZB-200型疲勞轉(zhuǎn)棒儀設(shè)備名稱(chēng)：疲勞轉(zhuǎn)棒儀規(guī)格型號(hào)：ZB-200型生產(chǎn)廠(chǎng)家：成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品簡(jiǎn)介：動(dòng)物在旋轉(zhuǎn)的棒上為保持身體平衡不致跌下，需要向轉(zhuǎn)動(dòng)棒的反方向移動(dòng)，并保持四肢肌肉協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)，否則將從棒上落下。有中樞抑制作用和肌肉松弛作用的藥物，可縮短動(dòng)物從棒上落下的時(shí)間，此法反映動(dòng)物的被動(dòng)活動(dòng)。,,操作規(guī)程（1）將6只小鼠分別放在轉(zhuǎn)棒的6個(gè)通道上，設(shè)置好 “日期”、“轉(zhuǎn)速”、“TRAIN”（訓(xùn)練模式）

30、；（2）轉(zhuǎn)速設(shè)置為16r/min，按下“啟/?！卑粹o，儀器開(kāi)始計(jì)時(shí)，并勻加速運(yùn)動(dòng)到設(shè)置到的轉(zhuǎn)速后作勻速轉(zhuǎn)動(dòng)，選擇能在棒上3min而不落下的動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，此時(shí)為篩選適應(yīng)過(guò)程，不記錄數(shù)據(jù)；（3）將已訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組，設(shè)置好“轉(zhuǎn)速”、“定時(shí)時(shí)間”、“TEST0”（順時(shí)針）或“TEST”（逆時(shí)針），按下“啟/?！卑粹o，把小鼠放在旋轉(zhuǎn)棒上的同時(shí)遮擋一下本通道落棒感應(yīng)器，系統(tǒng)發(fā)出提示音，觸發(fā)計(jì)時(shí)，當(dāng)任意通道的小鼠落棒時(shí)，對(duì)應(yīng)的液晶顯示器上的通

31、道將停止計(jì)時(shí)。（4）統(tǒng)計(jì)落棒的百分率，并比較對(duì)照組和給藥組的差異；,注意事項(xiàng)（1）成年標(biāo)準(zhǔn)體重的小鼠為宜，小鼠體重20g左右；（2）在通風(fēng)、安靜、相對(duì)昏暗的環(huán)境下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。（3）可做疲勞實(shí)驗(yàn)、骨骼肌松馳實(shí)驗(yàn)、中樞神經(jīng)抑制實(shí)驗(yàn)以及其它需用運(yùn)動(dòng)方式檢測(cè)藥物作用的實(shí)驗(yàn)，如毒性對(duì)運(yùn)動(dòng)能力的影響，體內(nèi)某種物質(zhì)缺乏對(duì)運(yùn)動(dòng)能力的影響，心腦血管藥物對(duì)運(yùn)動(dòng)能力的影響等等。,8.ZZ-6型小鼠自主活動(dòng)儀 設(shè)備名稱(chēng)：小鼠自主活動(dòng)儀規(guī)格型號(hào)：

32、ZZ-6型生產(chǎn)廠(chǎng)家：成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品簡(jiǎn)介：中樞鎮(zhèn)靜安定作用的研究，主要以行為測(cè)量為主，行為測(cè)定是在整體動(dòng)物自由活動(dòng)或清醒狀態(tài)下進(jìn)行的。自主活動(dòng)多用大、小鼠測(cè)定，它們的自主活動(dòng)可分為兩種類(lèi)型：一是移動(dòng)活動(dòng)（前進(jìn)、后退、旋轉(zhuǎn)）；二是原地活動(dòng)（站立、潔身、嗅）等，自主活動(dòng)反映動(dòng)物的中樞興奮、抑制狀態(tài)，探究水平和情緒狀態(tài)。,,操作規(guī)程1)實(shí)驗(yàn)前應(yīng)選取健康活潑的小鼠分組，每一劑量組需10~20只，同時(shí)設(shè)立正常對(duì)照；2)連上電源，

33、注意接地，打開(kāi)自主活動(dòng)測(cè)試儀電源開(kāi)關(guān)；設(shè)置參數(shù)：包括日期和設(shè)定實(shí)驗(yàn)測(cè)試時(shí)間，定時(shí)時(shí)間一般為5min~10min；3)可同時(shí)將6只小鼠放入反應(yīng)箱每格一只，蓋好上蓋，待動(dòng)物先適應(yīng)3min；4)按啟動(dòng)鍵，測(cè)量開(kāi)始，反應(yīng)箱中小鼠有活動(dòng)或站立時(shí)，將實(shí)時(shí)顯示數(shù)據(jù)的變化,小鼠站立時(shí)將不改變活動(dòng)次數(shù)，到達(dá)設(shè)定時(shí)間時(shí)，測(cè)量結(jié)束。5)打開(kāi)電腦，打開(kāi)小鼠自主活動(dòng)儀軟件。點(diǎn)擊數(shù)據(jù)采集控制按鈕，設(shè)置采集時(shí)間，一般為5min，5min后電腦會(huì)自動(dòng)下一次采集，

34、若要終止數(shù)據(jù)采集，可以按數(shù)據(jù)采集控制按鈕，點(diǎn)擊停止實(shí)驗(yàn)即可。6)數(shù)據(jù)可以輸出為spss，點(diǎn)擊導(dǎo)出spss按鈕，默認(rèn)為c盤(pán)，導(dǎo)出的數(shù)據(jù)可以用excle軟件進(jìn)一步處理。,注意事項(xiàng)（1）動(dòng)物選擇應(yīng)注意種屬、性別、體重、健康狀況的選擇保持條件一致；（2）應(yīng)選擇健康活潑的小鼠，健康狀況不佳的動(dòng)物活動(dòng)偏少，不利于對(duì)鎮(zhèn)靜作用的觀(guān)察；（3）觀(guān)察動(dòng)物活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求相對(duì)安靜；室內(nèi)恒溫、恒濕，實(shí)驗(yàn)者盡可能少走動(dòng)，以免驚擾動(dòng)物，影響對(duì)行為活動(dòng)的觀(guān)

35、察。（4）晝夜節(jié)律：生命體的生理、生化和行為都有晝夜節(jié)律變化，一般來(lái)說(shuō)大鼠和小鼠的活動(dòng)在10：00以前和16：00以后要比12：00左右要多，故同一實(shí)驗(yàn)應(yīng)在1日內(nèi)相對(duì)固定時(shí)間內(nèi)進(jìn)行。（5）如果藥物行為效應(yīng)受集體性激素的影響比較大，可盡量用雄性動(dòng)物做實(shí)驗(yàn)。（6）捉拿小鼠宜輕，放入活動(dòng)箱內(nèi)先適應(yīng)3min后再正式測(cè)定。（7）給藥后根據(jù)藥物作用的快慢和維持時(shí)間，調(diào)整觀(guān)察記錄時(shí)間。,藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課要求,為保證實(shí)驗(yàn)課的正常秩序，培養(yǎng)學(xué)生良好的

36、實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，養(yǎng)成嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目蒲衅焚|(zhì)，提高學(xué)生的綜合素質(zhì)，根據(jù)中心制定實(shí)驗(yàn)習(xí)慣評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)特要求如下：      1、必須接受實(shí)驗(yàn)室安全、節(jié)約、環(huán)保教育或?qū)嶒?yàn)安全等考試不合格者，禁止上實(shí)驗(yàn)課。     2、實(shí)驗(yàn)課不允許遲到、早退者。     3、更不許無(wú)故缺席實(shí)驗(yàn)。  &#

37、160;  4、必須穿實(shí)驗(yàn)服做實(shí)驗(yàn)。      5、認(rèn)真書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)記錄者和實(shí)驗(yàn)報(bào)告。      6、實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，使用的玻璃儀器必須沖洗干凈。      7、決不允許向水池扔有堵塞下水道的廢物。    &#

38、160; 8、使用儀器設(shè)備未按要求操作造成儀器損壞者，根據(jù)損壞的實(shí)際情況扣習(xí)慣分，并按儀器損壞賠償制度給予相應(yīng)處理。,9、使用煤氣燈、酒精燈、電爐等要注意避免造成實(shí)驗(yàn)臺(tái)面燙傷或使用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等溶液腐蝕實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。      10、使用儀器后必須認(rèn)真詳細(xì)填寫(xiě)儀器使用記錄。      11、積極參加實(shí)驗(yàn)室布置的

39、大掃除或值日生工作，整理好實(shí)驗(yàn)所使用的儀器和實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。      12、實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，按操作要求移取公用試劑，以免造成試劑污染而影響自己和別人實(shí)驗(yàn)結(jié)果。      13、沒(méi)有經(jīng)過(guò)教師允許，不得擅自開(kāi)抽屜、柜子等。      14、實(shí)驗(yàn)課中禁止接聽(tīng)手機(jī)、

40、手機(jī)設(shè)為振動(dòng)或關(guān)機(jī)。      15、對(duì)實(shí)驗(yàn)中心布置的實(shí)踐教學(xué)活動(dòng)要積極參加。      16、嚴(yán)禁找人冒名頂替代做實(shí)驗(yàn)。     17、不許串改實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、結(jié)果或抄襲實(shí)驗(yàn)報(bào)告。     18、擾亂課堂秩序者，根據(jù)情節(jié)，扣實(shí)驗(yàn)習(xí)慣分。