魚安定ms-222和丁香酚對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果研究【畢業(yè)論文】

1、<p>　　本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))</p><p>　題 目：魚安定MS-222和丁香酚對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果研究</p><p>　學(xué) 院：</p><p>　學(xué)生姓名：</p><p>　專 業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖</p><p>　班 級(jí)：</p><p>　指導(dǎo)教師

2、：</p><p>　起止日期：</p><p><b>　　目錄</b></p><p><b>　　中文摘要1</b></p><p>　　英文摘要錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　1. 前言錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.

3、 實(shí)驗(yàn)材料與方法錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.1 實(shí)驗(yàn)材料錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.2 實(shí)驗(yàn)條件4</p><p>　　2.3 實(shí)驗(yàn)方法4</p><p>　　3. 結(jié)果與分析6</p><p>　　3.1 不同濃度的麻醉劑藥液對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果6</p>

4、<p>　　3.2 麻醉劑對(duì)日本黃姑魚呼吸頻率的影響7</p><p>　　3.3 不同藥浴時(shí)間對(duì)日本黃姑魚復(fù)蘇的影響8</p><p>　　3.4 空氣中的暴露時(shí)間對(duì)深度麻醉日本黃姑魚復(fù)蘇的影響錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　4. 討論錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　4.1 麻醉劑濃度與麻醉、復(fù)蘇時(shí)間的關(guān)系

5、錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　4.2 麻醉劑濃度對(duì)日本黃姑魚呼吸頻率的影響錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　4.3 麻醉劑的麻醉效果與安全性錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　4.4 麻醉劑在標(biāo)志放流中的實(shí)用性錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　小結(jié)錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>

6、<b>　　致謝13</b></p><p>　　參考文獻(xiàn)錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　魚安定MS-222和丁香酚對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果研究</p><p>　　[摘要] 研究了MS-222和丁香酚2種麻醉劑對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果，探討了2種麻醉劑應(yīng)用于日本黃姑魚（Nibea japonica）標(biāo)志放流和長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)目尚行?。麻醉?/p>

7、驗(yàn)結(jié)果表明：水溫25~27℃下，丁香酚的有效麻醉濃度為20~40mg/L，最佳麻醉濃度為20~30 mg/L，MS-222的有效麻醉濃度為40~60mg/L，最佳麻醉濃度為45~55 mg/L；日本黃姑魚的呼吸頻率隨麻醉劑濃度的升高而降低，魚體對(duì)高濃度麻醉劑表現(xiàn)出較強(qiáng)的應(yīng)激反應(yīng)；相同藥浴時(shí)間下，魚體進(jìn)入深度麻醉狀態(tài)，經(jīng)丁香酚麻醉的魚體在空氣中放置的時(shí)間更長(zhǎng)。試驗(yàn)結(jié)果表明，丁香酚更適合用于對(duì)日本黃姑魚的麻醉操作及日本黃姑魚的長(zhǎng)途運(yùn)輸。&l

8、t;/p><p>　　[關(guān)鍵字] MS-222 丁香酚 日本黃姑魚 麻醉 </p><p>　　The study of anaesthetic effect to Nibea japonica about Fish stability MS-222 and eugenol</p><p>　　[Abstract] We make a research ab

9、out the anesthetic effect of MS-222 and eugenol on the Nibea japonica and discusses the feasibility of the two anesthetics used in Nibea japonica marks and the long-distance transportation. Anesthesia test results show t

10、hat under the water temperature between 25 and 27℃, the effective concentration of eugenol is between 20 and 40 mg/L, the best concentration is between 20 and 30 mg/L, while the effective concentration of MS-222 is betwe

11、en 40 and 60 mg/L and the b</p><p>　　[Key words] MS-222 eugenol Nibea japonica anesthesia</p><p>　　魚安定MS-222和丁香酚對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果研究</p><p><b>　　1. 前言</b></p><p

12、>　　麻醉劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中應(yīng)用廣泛，能顯著降低魚的活力，減少損傷，有效提高成活率，常用于苗種運(yùn)輸、親魚采卵、標(biāo)志放流和疫苗免疫等方面[1]。目前，常用的麻醉劑有MS-222、鹽酸苯佐卡因、丁香酚、喹哪啶和液態(tài)二氧化碳等，各種麻醉劑在麻醉效果與使用濃度方面存在差別[2]。</p><p>　　MS-222（間氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸鹽）是一種被FDA批準(zhǔn)的漁用安全麻醉劑，已被廣泛應(yīng)用于魚類、蛙類的稱量、運(yùn)輸、標(biāo)

13、記等過程中，具有較好的麻醉和鎮(zhèn)靜的效果[3]。MS-222的使用方法一般采取藥液浸泡、噴霧和注射等，藥液浸泡是最常用的方法[4]。目前，國(guó)內(nèi)常見利用MS-222麻醉淡水魚的報(bào)道，如施氏鱘、中華鱘、美洲鰣等。而對(duì)海水魚的研究鮮有報(bào)道；國(guó)外學(xué)者已開始對(duì)庸鰈、真鯛等海水魚種進(jìn)行麻醉研究[5]。</p><p>　　丁香酚是一種毒性較小的植物香料，在醫(yī)學(xué)上作為牙科的鎮(zhèn)痛劑被廣泛使用[6]。1972年，日本的遠(yuǎn)藤發(fā)現(xiàn)丁香酚

14、對(duì)魚有強(qiáng)烈的麻醉效果，開始將它作為麻醉劑進(jìn)行了系列研究。近年來，因?yàn)槎∠惴泳哂袑?duì)人體無害，價(jià)廉易得，其液體制劑在淡水和海水中溶解性好等特點(diǎn)，所以它被廣泛應(yīng)用于親魚采卵、活魚運(yùn)輸過程中。</p><p>　　標(biāo)志放流技術(shù)是一種研究魚類資源和魚類洄游的方法。首先在魚體上做標(biāo)志，然后通過重新捕獲所得的標(biāo)志魚，根據(jù)標(biāo)志放流的記錄和重捕記錄，繪制魚類標(biāo)志放流分布圖以及重捕分布圖，用來推測(cè)魚類游動(dòng)的方向、速度、范圍和路線等；

15、若進(jìn)一步結(jié)合魚體年齡資料、長(zhǎng)度和重量，則可研究魚類的生長(zhǎng)和死亡規(guī)律，進(jìn)一步可以用來檢驗(yàn)增殖放流的效果[7-9 ] 。此外，根據(jù)魚類標(biāo)志放流的結(jié)果還可以估算魚類種群數(shù)量的變動(dòng)。我國(guó)對(duì)魚類標(biāo)志技術(shù)的研究相對(duì)于其他國(guó)家來說起步較晚，有關(guān)報(bào)道較少[10] ，因此，開展這方面的工作非常迫切。</p><p>　　我國(guó)標(biāo)志放流研究主要集中于對(duì)蝦和海產(chǎn)魚類的增殖研究，主要使用的是體外掛牌、化學(xué)物質(zhì)標(biāo)志法和剪鰭法。其中體外掛牌和

16、剪鰭法，在試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行標(biāo)志之前，都要進(jìn)行麻醉，以提高標(biāo)志放流的效率。</p><p>　　劉家富等[11]1987年用人工培育的大黃魚幼魚，經(jīng)過丁香酚溶液的浸浴麻醉，采用體外掛牌法進(jìn)行標(biāo)記，在官井洋中進(jìn)行放流，通過對(duì)回捕魚的調(diào)查及其捕撈實(shí)況調(diào)查，結(jié)合在定置網(wǎng)漁獲物中天然大黃魚的數(shù)量及海區(qū)鹽度、溫度調(diào)查，對(duì)標(biāo)志放流魚類早期的生態(tài)習(xí)性進(jìn)行了初步研究。</p><p>　　在我國(guó)開展放流的水產(chǎn)動(dòng)

17、物有：石斑魚[12]、鱘類（ 如中華鱘[13]、蝦蟹類（ 如中國(guó)對(duì)蝦）[14]、鯉科類（如銀鯽）、鯛類（ 如黑鯛[15]）、 鮭鱒魚類（各種大麻哈魚)[16]、鯉魚[17]及大黃魚[18]、海蜇[19]等經(jīng)濟(jì)海產(chǎn)。標(biāo)志放流無疑在漁業(yè)放流增殖與研究中發(fā)揮著重要作用。</p><p>　　日本黃姑魚屬于鱸形目，石首魚科，黃姑魚屬，日本黃姑魚種。因?yàn)槿毡军S姑魚具有生長(zhǎng)快、抗病力強(qiáng)等特點(diǎn)，近幾年在南方已開展規(guī)?；B(yǎng)殖。但

18、養(yǎng)殖苗種主要來源于自然海域，人工育苗技術(shù)尚未突破[21]。對(duì)日本黃姑魚的研究國(guó)內(nèi)報(bào)道較少。日本人工養(yǎng)殖始于60年代,人工孵化研究始于1985年，近幾年對(duì)其苗種生產(chǎn)也進(jìn)行了系統(tǒng)研究[22]。</p><p>　　日本黃姑魚為肉食性魚類，攝食兇猛，游動(dòng)靈活，主要捕食底表層動(dòng)物[23]。日本黃姑魚主要分布于暖海區(qū)，特別是砂泥質(zhì)海區(qū)，魚類產(chǎn)卵期游向近岸的河口附近或淺水區(qū)，水深一般小于20m。日本黃姑魚仔魚期浮游生活于水表

19、層，主要攝食輪蟲等微小浮游動(dòng)物及其卵粒等；稚幼魚期隨其生活空間改變，主要攝食橈足類、糠蝦、磷蝦等，隨個(gè)體增長(zhǎng)，還可捕食甲殼類(蝦、蟹等)、小魚和其他動(dòng)物，在生殖期，日本黃姑魚攝食量相對(duì)降低[21]。日本黃姑魚1年生全長(zhǎng)可達(dá)47cm以上，2年生可達(dá)68cm，3年生可達(dá)80cm，4年生可達(dá)87cm，相較于美國(guó)紅魚，其生長(zhǎng)快些。日本黃姑魚對(duì)鹽度的變化適應(yīng)性強(qiáng)，適宜生活水溫范圍為6~32 ℃，最適溫度為18~28℃，適宜鹽度范圍為14~34。日

20、本黃姑魚屬石首魚科大型種類，在記錄中最大個(gè)體可達(dá)到體長(zhǎng)1.35m，體重25 kg [22]。</p><p>　　日本黃姑魚具有生長(zhǎng)快、抗病力強(qiáng)等優(yōu)良養(yǎng)殖性狀，經(jīng)濟(jì)效益好，深受廣大養(yǎng)殖戶歡迎，有望成為我國(guó)重要的新養(yǎng)殖品種之一[24]。但其體質(zhì)嬌嫩，性格暴躁，在運(yùn)輸過程中，由于劇烈掙扎，極易導(dǎo)致受傷，其中掉鱗、充血、耳石中半硅管破裂等狀況時(shí)常發(fā)生，造成運(yùn)輸死亡率極高。麻醉劑的合理使用能夠減少在運(yùn)輸過程中魚體受到的各

21、種人為損傷，降低魚體的應(yīng)激反應(yīng)和新陳代謝，魚體能夠在運(yùn)輸過程中保持安靜，達(dá)到提高成活率的目的。而且日本黃姑魚作為增殖放流的對(duì)象之一，魚體麻醉對(duì)標(biāo)志放流的成敗起到關(guān)鍵作用。因此，研究不同麻醉劑對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果，并確定其合適的麻醉劑量具有實(shí)用意義。試驗(yàn)研究了丁香酚和MS-222在對(duì)日本黃姑魚的有效麻醉濃度，有效入麻時(shí)間、復(fù)蘇時(shí)間，呼吸頻率和空氣中暴露時(shí)間對(duì)深度麻醉魚體復(fù)蘇的影響等，以期為日本黃姑魚的保活運(yùn)輸提供技術(shù)支撐，同時(shí)為我國(guó)海水

22、魚成魚的?；钸\(yùn)輸提供參考。</p><p>　　2. 實(shí)驗(yàn)材料與方法</p><p><b>　　2.1 實(shí)驗(yàn)材料</b></p><p>　　本實(shí)驗(yàn)在浙江省海洋水產(chǎn)研究所西軒試驗(yàn)場(chǎng)綜合實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行；日本黃姑魚幼體為自行人工繁育，魚體規(guī)格8.5~11.5cm。選擇體色正常、健壯無傷、攝食正常、大小均勻的幼魚1000尾用于試驗(yàn)。試驗(yàn)藥品為上海齒科材

23、料廠生產(chǎn)的魚安定MS-222、丁香酚(純丁香油)。</p><p><b>　　2.2 實(shí)驗(yàn)條件</b></p><p>　　試驗(yàn)用水為沙濾自然海水，試驗(yàn)水溫25~27℃，pH為7.99，鹽度為28‰；試驗(yàn)所需容器為200L塑料圓桶20只，實(shí)際蓄水150L；5L塑料桶6只；各試驗(yàn)桶受光一致。24h不間斷充氣，由總水管通過分水器至各試驗(yàn)桶。實(shí)驗(yàn)沙濾水再經(jīng)300目以上過濾

24、，每日換水100~150%。試驗(yàn)所用日本黃姑魚投喂日本產(chǎn)“魚寶牌”稚魚2#配合飼料。 </p><p><b>　　2.3 實(shí)驗(yàn)方法</b></p><p>　　試驗(yàn)前暫養(yǎng)于直徑為2.5m的塑料圓桶中，停食1d。試驗(yàn)后放入盛有清水的塑料桶中，繼續(xù)觀察3d。</p><p>　　2.3.1 麻醉程度分期和行為特征</p><p

25、>　　表1 麻醉程度分期和行為特征</p><p>　　試驗(yàn)將日本黃姑魚麻醉程度分為7個(gè)時(shí)期，如表1所示。第Ⅰ期（正常期），呼吸頻率正常（鰓蓋振動(dòng)次數(shù)和振幅恒定）；第Ⅱ期（輕度鎮(zhèn)靜期），觸覺略失，使其平躺，能夠迅速翻身，并恢復(fù)到正常狀態(tài)，呼吸略微加快；第Ⅲ期（深度鎮(zhèn)靜期），觸覺喪失，應(yīng)激反應(yīng)強(qiáng)烈，呼吸加快，有激烈的沖撞行為；第Ⅳ期（輕度麻醉期），平衡略失，側(cè)躺水中，不能翻身，在水中來回蕩動(dòng)；第Ⅴ期（麻醉期

26、），平衡喪失，魚體完全翻倒，呼吸變慢但有規(guī)律，在水中來回蕩動(dòng)，鰓蓋振動(dòng)變緩；第Ⅵ期（深度麻醉期），魚體靜止，呼吸不連續(xù)，偶爾出現(xiàn)咧鰓現(xiàn)象，應(yīng)立即轉(zhuǎn)入清水中復(fù)蘇；第VII期（延髓麻醉期），呼吸停止，魚體死亡。</p><p>　　2.3.2 復(fù)蘇過程分期和行為特征</p><p>　　表2 復(fù)蘇過程分期和行為特征</p><p>　　試驗(yàn)將復(fù)蘇過程分為4個(gè)時(shí)期，如表

27、2所示。第Ⅰ期，魚體完全翻倒，呼吸恢復(fù)，鰓蓋開始振動(dòng)，魚體靜止，魚鰭開始晃動(dòng)；第Ⅱ期，身體部分平衡及運(yùn)動(dòng)恢復(fù)，但不能翻身；第Ⅲ期，身體完全平衡，觸覺恢復(fù)；第Ⅳ期，呼吸頻率恢復(fù)正常，其他行為也完全正常。</p><p>　　2.3.3 麻醉劑有效濃度的測(cè)定</p><p>　　參考Marking等[25]對(duì)麻醉有效濃度的界定，本實(shí)驗(yàn)有效濃度定義為：魚體在麻醉劑溶液中，3 min之內(nèi)達(dá)到4級(jí)

28、麻醉狀態(tài)，5 min之內(nèi)蘇醒恢復(fù)，并且成活率為100%時(shí)的濃度。</p><p>　　實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)10個(gè)MS-222質(zhì)量濃度梯度，分別為30、35、40、45、50、55、60、70、80、90mg/L，8個(gè)丁香酚質(zhì)量濃度，分別為2.5、5、10、20、30、40、50、60mg/L，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝蠓胖?0 min，每個(gè)梯度設(shè)計(jì)5尾實(shí)驗(yàn)魚。當(dāng)魚體麻醉程度達(dá)到4期時(shí)，記錄入麻時(shí)間，然后立即從麻醉劑中移出，放入清潔海水中

29、復(fù)蘇，記錄復(fù)蘇時(shí)間和成活率。</p><p>　　2.3.4 麻醉劑對(duì)呼吸頻率影響的測(cè)定</p><p>　　呼吸頻率為單位時(shí)間內(nèi)鰓蓋的張合次數(shù)。由于在高濃度的麻醉劑溶液中魚體的入麻時(shí)間較短，各期的呼吸頻率不易計(jì)數(shù)，但在低濃度麻醉劑溶液中魚體達(dá)到最終麻醉狀態(tài)時(shí)，呼吸頻率波動(dòng)幅度小，而且麻醉狀態(tài)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，可以穩(wěn)定測(cè)定。故實(shí)驗(yàn)測(cè)定的是在低濃度麻醉劑下魚體達(dá)到最終麻醉狀態(tài)時(shí)的呼吸頻率。將魚放

30、入清潔海水中，穩(wěn)定10min 后，計(jì)數(shù)呼吸頻率作為魚體的初始呼吸頻率，然后轉(zhuǎn)入麻醉劑溶液中，測(cè)定最終麻醉狀態(tài)下魚體的呼吸頻率。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)8個(gè)MS-222質(zhì)量濃度梯度（30、40、45、50、55、60、70、80mg/L），和8個(gè)丁香酚濃度梯度（2.5、5、10、20、30、40、50、60 mg/L），每個(gè)濃度試驗(yàn)用魚5尾，每尾重復(fù)測(cè)定5次，計(jì)算平均值作為魚在該麻醉狀態(tài)下的呼吸頻率。</p><p>　　2.3.

31、5 不同藥浴時(shí)間對(duì)魚體復(fù)蘇的影響</p><p>　　在有效濃度范圍內(nèi)，每種麻醉劑取3個(gè)濃度梯度，MS-222：40、50、60mg/L，丁香酚：20、30、40mg/L，在不同濃度下藥浴不同時(shí)間，記錄復(fù)蘇時(shí)間和成活率。</p><p>　　2.3.6 空氣中暴露時(shí)間對(duì)深度麻醉魚體復(fù)蘇影響的測(cè)定</p><p>　　將魚體（5尾）分別放入40、50、60mg/L

32、的MS-222溶液和20、30、40mg/L的丁香酚溶液中麻醉5 min，然后從麻醉液中移出，用濕毛巾包裹魚體中后部，分別在空氣中暴露0 min，3 min，6 min，9 min，12 min，15 min，18 min，21 min或0min，2min，4min，6min，8min，10min，12min，14min后進(jìn)行復(fù)蘇，測(cè)定復(fù)蘇時(shí)間，每個(gè)暴露實(shí)驗(yàn)組用魚5尾。</p><p><b>　　3.

33、 結(jié)果與分析</b></p><p>　　3.1 不同濃度的麻醉劑藥液對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果</p><p>　　不同濃度的丁香酚藥液對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果如表3所示。</p><p>　　表3 不同濃度的丁香酚藥液對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果</p><p>　　隨著丁香酚濃度的升高，日本黃姑魚麻醉所需時(shí)間不斷縮短，兩者呈負(fù)相關(guān)。在

34、2.5mg/L時(shí)麻醉所需時(shí)間長(zhǎng)達(dá)20min，濃度升高至60mg/L，麻醉僅需11s，但其復(fù)蘇時(shí)成活率僅為60%，因此丁香酚對(duì)日本黃姑魚的有效麻醉濃度為5~40mg/L。試驗(yàn)表明，2.5~5mg/L這一階段降幅最大，在2.5mg/L范圍內(nèi)，麻醉時(shí)間縮短了10倍以上。而從5mg/L到60mg/L這一階段，降幅相對(duì)較少。</p><p>　　圖1 丁香酚對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果</p><p>

35、　　日本黃姑魚復(fù)蘇所需時(shí)間與丁香酚藥液濃度呈正相關(guān)。濃度越大，復(fù)蘇所需時(shí)間越長(zhǎng)。濃度在5mg/L時(shí)復(fù)蘇僅需70s，而當(dāng)濃度達(dá)到60mg/L時(shí)，則復(fù)蘇時(shí)間長(zhǎng)達(dá)138s，且復(fù)蘇率由40mg/L時(shí)的100%降至60%，表現(xiàn)為麻醉過度，部分魚進(jìn)入死亡狀態(tài)。</p><p>　　不同濃度的MS-222藥液對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果如表4所示。</p><p>　　表4 不同濃度的MS-222藥液對(duì)日本

36、黃姑魚的麻醉效果</p><p>　　隨著MS-222藥液濃度的升高，日本黃姑魚麻醉所需時(shí)間不斷縮短，兩者呈負(fù)相關(guān)。在30mg/L時(shí)日本黃姑魚達(dá)到麻醉狀態(tài)需要20min以上，而當(dāng)濃度達(dá)到80mg/L時(shí)，麻醉僅需19s，但其復(fù)蘇成活率僅為60%，因此有效濃度為40~60mg/L。試驗(yàn)表明，30~35mg/L這一階段降幅最大，在5mg/L的濃度范圍內(nèi)，麻醉時(shí)間縮短了5倍以上。而從35mg/L到80mg/L這一階段，降

37、幅相對(duì)較小。</p><p>　　圖2 MS-222對(duì)日本黃姑魚的麻醉效果</p><p>　　復(fù)蘇所需時(shí)間與MS-222藥液濃度呈正相關(guān)。MS-222藥液濃度越大，日本黃姑魚復(fù)蘇所需時(shí)間越長(zhǎng)。濃度在35mg/L時(shí)復(fù)蘇僅需82s，而當(dāng)濃度達(dá)到80mg/L時(shí)，則復(fù)蘇時(shí)間長(zhǎng)達(dá)147s，且復(fù)蘇率由60mg/L時(shí)的100%降至60%，由于該麻醉劑會(huì)引起試驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)損傷，高濃度下呈現(xiàn)較強(qiáng)的毒性。&

38、lt;/p><p>　　3.2 麻醉劑對(duì)日本黃姑魚呼吸頻率的影響</p><p>　　圖3 日本黃姑魚在丁香酚不同濃度中各個(gè)時(shí)間段呼吸頻率的變化</p><p>　　日本黃姑魚在不同丁香酚濃度的麻醉液中呼吸頻率的變化規(guī)律見圖3。在低濃度2.5、5mg/L下，呼吸頻率先上升后下降；其他濃度下，整個(gè)麻醉過程的呼吸頻率均呈下降趨勢(shì)，且相同時(shí)間內(nèi)，隨著麻醉濃度的增加，呼吸頻率

39、逐漸下降。特別是在有效麻醉濃度20~40mg/L時(shí)，隨著濃度的升高，呼吸頻率下降的速率增大。在高濃度情況下，短時(shí)間內(nèi)日本黃姑魚的呼吸頻率變化較快。</p><p>　　圖4 日本黃姑魚在MS-222不同濃度中各個(gè)時(shí)間段呼吸頻率的變化</p><p>　　日本黃姑魚在不同MS-222濃度的麻醉液中呼吸頻率的變化規(guī)律見圖4。在低濃度30、40 mg/L下，呼吸頻率先上升后下降；其他濃度下，整

40、個(gè)麻醉過程的呼吸頻率均呈下降趨勢(shì)，且相同時(shí)間內(nèi)，隨著麻醉濃度的增加，呼吸頻率逐漸下降。在有效濃度范圍內(nèi)，隨著麻醉時(shí)間的增加，呼吸頻率變化逐漸縮小。在高濃度80mg/L下，日本黃姑魚在短時(shí)間內(nèi)呼吸加快，之后呼吸停止，魚體死亡。</p><p>　　3.3 不同藥浴時(shí)間對(duì)日本黃姑魚復(fù)蘇的影響</p><p>　　丁香酚不同藥浴時(shí)間對(duì)日本黃姑魚復(fù)蘇時(shí)間的影響見表5。</p><

41、;p>　　表5 丁香酚不同藥浴時(shí)間對(duì)日本黃姑魚復(fù)蘇時(shí)間的影響</p><p>　　不同丁香酚藥浴時(shí)間下，日本黃姑魚的復(fù)蘇時(shí)間和復(fù)蘇率存在顯著差異。20mg/L下藥浴25min，30mg/L藥浴15min，復(fù)蘇率均可達(dá)到100%；但40mg/L藥浴8min，魚種死亡率可達(dá)到20%，藥浴18min，死亡率達(dá)60%。隨著丁香酚濃度的增加，藥浴時(shí)間的增加，復(fù)蘇所需的時(shí)間也增加。20mg/L和30mg/L、30mg

42、/L和40mg/L兩組濃度下復(fù)蘇時(shí)間無顯著差（p>0.05），20mg/L和40mg/L之間復(fù)蘇時(shí)間有顯著差異（p<0.05）。</p><p>　　MS-222不同藥浴時(shí)間對(duì)日本黃姑魚復(fù)蘇時(shí)間的影響見表6。</p><p>　　表6 MS-222不同藥浴時(shí)間對(duì)日本黃姑魚復(fù)蘇時(shí)間的影響</p><p>　　不同的MS-222藥浴時(shí)間下，日本黃姑魚的復(fù)蘇

43、時(shí)間和復(fù)蘇率也存在顯著差異。40mg/L下藥浴12min，50mg/L下藥浴8min,復(fù)蘇率均可達(dá)到100%；但60mg/L下藥浴6min，魚種死亡率達(dá)20%，藥浴15min，死亡率達(dá)80%。日本黃姑魚復(fù)蘇所需時(shí)間和MS-222濃度和藥浴時(shí)間均呈正相關(guān)。藥浴時(shí)間超過20min，日本黃姑魚全部死亡。每?jī)山M濃度之間的復(fù)蘇時(shí)間均無顯著差異（p>0.05）。</p><p>　　3.4 空氣中的暴露時(shí)間對(duì)深度麻醉日

44、本黃姑魚復(fù)蘇的影響</p><p>　　在空氣中暴露一段時(shí)間后對(duì)經(jīng)丁香酚深度麻醉的日本黃姑魚復(fù)蘇的影響如表7所示。</p><p>　　表7 空氣暴露時(shí)間對(duì)丁香酚深度麻醉日本黃姑魚復(fù)蘇的影響</p><p>　　被丁香酚深度麻醉的日本黃姑魚在空氣中放置時(shí)間越長(zhǎng)，復(fù)蘇所需時(shí)間越長(zhǎng)；深度麻醉的魚體在空氣中放置相同的時(shí)間，丁香酚濃度越高，魚體復(fù)蘇所需時(shí)間越長(zhǎng)。被丁香酚深

45、度麻醉的日本黃姑魚在空氣中暴露9min，一直保持深度麻醉狀態(tài)，入水后65~195s內(nèi)能復(fù)蘇，復(fù)蘇率達(dá)100%。超過18min，日本黃姑魚，全部死亡。每組濃度之間的復(fù)蘇時(shí)間均無顯著差異（p>0.05）。</p><p>　　在空氣中暴露一段時(shí)間后對(duì)經(jīng)MS-222深度麻醉的日本黃姑魚復(fù)蘇的影響如表8所示。</p><p>　　表8 空氣中暴露時(shí)間對(duì)MS-222深度麻醉日本黃姑魚復(fù)蘇的影

46、響</p><p>　　被MS-222深度麻醉的日本黃姑魚在空氣中放置的時(shí)間與魚體復(fù)蘇的時(shí)間呈正相關(guān)關(guān)系，放置時(shí)間越長(zhǎng)，復(fù)蘇所需時(shí)間越長(zhǎng)；深度麻醉的魚體在空氣中放置相同的時(shí)間，MS-222濃度越高，魚體復(fù)蘇所需時(shí)間越長(zhǎng)，此結(jié)論與丁香酚相似。被MS-222深度麻醉的日本黃姑魚在空氣中暴露6min，一直保持深度麻醉狀態(tài)，入水后113~158s內(nèi)能復(fù)蘇，復(fù)蘇率達(dá)100%。超過18min，日本黃姑魚全部死亡。每組濃度之間

47、的復(fù)蘇時(shí)間均無顯著差異（p>0.05）。</p><p><b>　　4. 討論</b></p><p>　　4.1 麻醉劑濃度與麻醉、復(fù)蘇時(shí)間的關(guān)系</p><p>　　日本黃姑魚和大黃魚同屬石首魚科，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)丁香酚麻醉日本黃姑魚的有效濃度高于大黃魚，分析原因可能與該兩個(gè)魚種的生物學(xué)特性的差異有關(guān)。日本黃姑魚具有生長(zhǎng)快，抗病力強(qiáng)等

48、特點(diǎn)，在麻醉前期會(huì)產(chǎn)生較強(qiáng)的應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致丁香酚對(duì)日本黃姑魚的有效麻醉濃度高于大黃魚。同時(shí)，人為因素的影響也可能導(dǎo)致這種差異。在實(shí)驗(yàn)過程中，將復(fù)蘇魚體放置清水中，先復(fù)蘇的魚體會(huì)影響未復(fù)蘇的，以至于結(jié)果不精確，在條件允許的情況下，盡可能把麻醉之后的魚體分開復(fù)蘇，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。在麻醉劑MS-222濃度較低時(shí)，會(huì)出現(xiàn)一開始魚體進(jìn)入麻醉期，一會(huì)后魚體又開始靈活擺動(dòng)尾巴，以致最終達(dá)不到麻醉期，推測(cè)與低濃度入麻時(shí)間較長(zhǎng)使魚體長(zhǎng)時(shí)間處于應(yīng)激

49、狀態(tài)，應(yīng)激反應(yīng)較大有關(guān)。關(guān)于日本黃姑魚復(fù)蘇時(shí)間差異的內(nèi)在機(jī)理，還需做進(jìn)一步的探究。</p><p>　　在水溫25~27℃時(shí)，濃度高于40mg/L的各組MS-222溶液和濃度高于20mg/L的各組丁香酚溶液均可對(duì)日本黃姑魚產(chǎn)生有效的麻醉效果，濃度越高，日本黃姑魚進(jìn)入麻醉狀態(tài)所需的時(shí)間越短，兩種麻醉劑的麻醉時(shí)間和復(fù)蘇時(shí)間均無顯著差異（p>0.05）。本實(shí)驗(yàn)有效濃度定義為：魚體在麻醉劑溶液中，3 min之內(nèi)達(dá)到

50、4級(jí)麻醉狀態(tài)，5 min之內(nèi)蘇醒恢復(fù)，并且成活率為100%時(shí)的濃度。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知丁香酚麻醉日本黃姑魚的有效濃度為20~40mg/L，與丁香酚麻醉大黃魚（有效麻醉濃度5~20mg/L）[26]、鯉魚（有效麻醉濃度20~40mg/L）[27]相似，鑒于日本黃姑魚能夠承受的藥浴時(shí)間和在空氣中放置時(shí)間的長(zhǎng)短，丁香酚麻醉日本黃姑魚的最佳濃度為20~30mg/L；MS-222麻醉日本黃姑魚的有效濃度為40~60 mg/L，與MS-222麻醉金魚（

51、有效麻醉濃度65 mg/L以上）[28]、牙鲆（有效麻醉濃度60 mg/L）[29]相似，與半滑舌鰨（有效麻醉濃度120~210mg/L）[30]相差較大，濃度為90mg/L時(shí)，魚體麻醉后不能蘇醒，這主要是因?yàn)镸S-222進(jìn)入魚體后大部分聚集在其肝臟、脾</p><p>　　4.2 麻醉劑濃度對(duì)日本黃姑魚呼吸頻率的影響</p><p>　　呼吸頻率是反應(yīng)魚體麻醉深度的一個(gè)重要指標(biāo)[31]，

52、MS-222溶液是通過魚體鰓絲及體表吸收后進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，然后作用于中樞神經(jīng)，使得魚體活動(dòng)能力和反射能力受到抑制，具體表現(xiàn)為排泄系統(tǒng)功能、呼吸頻率、行動(dòng)活力等下降。若鰓蓋呼吸次數(shù)加快，說明魚體心跳加快，麻醉劑經(jīng)鰓部滲透的速率也愈快，故發(fā)生作用的時(shí)間短，恢復(fù)也快[32]。在有效麻醉濃度50~60mg/L時(shí)，隨著濃度的升高，呼吸頻率下降的速率增大，可見，在此濃度范圍內(nèi)，呼吸頻率下降是一個(gè)循序漸進(jìn)的過程，產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)較??；而在麻醉濃度為7

53、0~80mg/L時(shí)，呼吸頻率在短時(shí)間內(nèi)直線下降，說明魚體在短時(shí)間內(nèi)受到較大的刺激。一般情況下，隨著麻醉程度的加深，呼吸頻率減慢。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在低麻醉液濃度30、40 mg/L時(shí)，前120s，魚體處于應(yīng)激期，即淺度麻醉前期，呼吸頻率有一個(gè)上升過程，而后才下降，這與MS-222麻醉半滑舌鰨時(shí)，魚體只有處在深度麻醉階段呼吸頻率才急劇下降，而在其他淺度麻醉階段呼吸頻率略微加快一致。本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，麻醉劑濃度越高，呼吸頻率下降速度越快?？梢姡粑l

54、率也受麻醉液的種類與濃度的影響。丁香酚濃度對(duì)日本黃姑魚呼吸頻率的影響與</p><p>　　4.3 麻醉劑的麻醉效果與安全性</p><p>　　丁香酚具有性質(zhì)穩(wěn)定，毒性低，對(duì)人體健康無影響等特點(diǎn)，與MS-222相比，丁香酚毒性更小。李思發(fā)等[6]認(rèn)為麻醉劑進(jìn)入魚體后首先抑制腦的皮質(zhì)(觸覺喪失期)，再作用于基底神經(jīng)節(jié)與小腦(興奮期)，最后作用于脊髓(麻醉期)。但過長(zhǎng)的接觸可深及髓質(zhì)，使呼吸

55、與血管舒縮中樞麻痹，最終導(dǎo)致死亡。相較丁香酚，MS-222價(jià)格更昂貴，而且使用后不會(huì)從魚體中完全消失[33]。魚體殘留物中含有間氨基苯酸、甲烷、乙醇、磺酸鹽及其化合物，因?yàn)轸~可能被食用，所以我們需要考慮其殘毒。而丁香酚作為一種天然的植物香料，不必?fù)?dān)心它對(duì)人類和環(huán)境造成危害。因此，從人類健康與食品安全出發(fā)，丁香酚具有更大的應(yīng)用前景。</p><p>　　4.4 麻醉劑在標(biāo)志放流中的實(shí)用性</p>&l

56、t;p>　　丁香酚常用于親魚產(chǎn)卵、標(biāo)記放流等操作中。從表5可以看出，20 mg/L濃度下藥浴5 min 后在空氣中放置15min，30mg/L、40mg/L濃度下藥浴5min后在空氣中放置9min, 魚種能在2 min 內(nèi)復(fù)蘇完好, 復(fù)蘇率達(dá)100% 。根據(jù)以上結(jié)果,我們認(rèn)為在短時(shí)間離水操作中，丁香酚可作為一種較實(shí)惠的麻醉劑推廣使用。</p><p>　　MS-222作為商品用麻醉劑，人們?cè)谑褂脮r(shí)經(jīng)?？紤]其

57、有效麻醉濃度而忽略了對(duì)麻醉時(shí)間的控制，試驗(yàn)表明：麻醉時(shí)間對(duì)日本黃姑魚的復(fù)蘇率有較大的影響，且個(gè)體之間也存在差異，即使是在有效麻醉濃度（50 mg/L）下，麻醉時(shí)間超過20min時(shí)，其復(fù)蘇率為0。相比于丁香酚，MS-222經(jīng)過5min的藥浴后，在空氣中放置的時(shí)間較短，從而可知，MS-222需要操作技術(shù)更加快速，有必要提高實(shí)驗(yàn)操作的效率。</p><p><b>　　小結(jié) </b></p

58、><p>　　日本黃姑魚在實(shí)際麻醉操作中宜選用丁香酚作為麻醉劑。在水溫25~27℃的條件下，丁香酚對(duì)日本黃姑魚的最佳麻醉濃度為20~30 mg/L，在此濃度下，日本黃姑魚經(jīng)過較長(zhǎng)時(shí)間的藥浴作用，仍可在短時(shí)間內(nèi)復(fù)蘇，在空氣中能夠放置的時(shí)間較長(zhǎng)，適合于日本黃姑魚的長(zhǎng)途運(yùn)輸。</p><p>　　綜上所述，兩種麻醉劑的麻醉效果均受到魚的種類、規(guī)格、藥物的濃度、麻醉時(shí)間等的影響。本實(shí)驗(yàn)僅采用日本黃姑魚

59、魚種比較了丁香酚和MS-222的麻醉效果，而對(duì)溫度、魚的種類及規(guī)格等影響因子未作研究，我們將在今后的試驗(yàn)中對(duì)此繼續(xù)深入研究。</p><p><b>　　致謝</b></p><p>　　最后，在這里感謝我的導(dǎo)師王老師及梁老師和徐老師，他們?cè)谡撐牡膶?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及寫作過程中給予了我悉心的指導(dǎo)。同時(shí)也感謝在論文實(shí)驗(yàn)和寫作過程中給我提供熱忱幫助的各位老師和同學(xué)。</p&g

60、t;<p><b>　　[參考文獻(xiàn)]</b></p><p>　　[1]陳守義. 魚類麻醉劑在活魚運(yùn)輸中的應(yīng)用[J]. 水產(chǎn)科學(xué), 1992, (10): 22-23.</p><p>　　[2]魏鎖成. 用于魚類的麻醉劑及麻醉管理[J]. 西北民族大學(xué)學(xué)報(bào), 2005, 26 (55): 43-45.</p><p>　　[3]

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