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文檔簡介
1、本文首先研究了啤酒中谷胱甘肽(GSH)含量與啤酒抗氧化性能之間的關系。并以此為依據(jù),利用紫外和硫酸二乙酯對啤酒酵母S5進行誘變,篩選GSH生成量提高的突變株,并對突變株的發(fā)酵性能和抗氧化性能進行初步研究。以提高啤酒抗氧化性能為目的,又對酵母硫代謝轉錄調控基因(MET4)在實驗室酵母YS58和啤酒酵母S5中的多拷貝表達進行了研究。
通過往市售啤酒中添加不同量的GSH,并測定不同GSH濃度下啤酒的抗氧化性能,結果表明,隨著啤酒
2、中GSH含量的提高,啤酒的二苯苦基肼基(DPPH)自由基清除率升高,硫代巴比妥酸(TBA)值下降,風味保鮮值(RSV)值升高。說明GSH在啤酒中是一種有效的抗氧化劑,且小含量的GSH就能提高啤酒的風味穩(wěn)定性。
以啤酒酵母S5為研究對象,經(jīng)紫外誘變和硫酸二乙酯(DES)誘變后,獲得突變株SC67,其GSH胞內生成量為15.238mg/L,胞內含量為11.292mg/g,較S5分別提高了91.4%和57.8%。SC67發(fā)酵所得
3、啤酒中胞外谷胱甘肽含量(6.43mg/L)較S5(1.35mg/L)顯著提高,且抗氧化性能也有所增強,其中DPPH自由基清除率提高13.2%;TBA值下降7.1%;RSV值提高了49.2%。
利用PCR的方法擴增啤酒酵母S5帶有自身500bp啟動子的MET4基因,并與附加型質粒YEp352相連接構建重組質粒Y-M,轉化實驗室酵母YS58;另外將YEp352與銅抗性基因CUP1相連接,在此基礎上再連接MET4,構建重組質粒Y
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