玉米根際高效溶磷菌株的分離鑒定、室內(nèi)溶磷條件和溶磷效果研究.pdf

1、溶磷微生物是土壤中一類參與磷循環(huán)的重要微生物,它們能夠?qū)⑼寥乐须y溶性的磷轉(zhuǎn)化為有效態(tài)磷。本文從重慶不同農(nóng)耕地區(qū)的玉米根際土壤中初步篩選出高效的溶磷菌株10株,并進(jìn)行多種難溶磷源的再次篩選,得到4株兼溶多種難溶磷源的菌株,隨后對它們進(jìn)行了初步菌種鑒定、室內(nèi)培養(yǎng)條件、溶磷能力、溶磷特性研究,以及通過盆缽實驗確定它們對玉米的生長影響,得出如下結(jié)論:
　　 1.對重慶北碚、涪陵、云陽地區(qū)的玉米根際土壤采用改良pvk法和溶磷圈法篩選出相對

2、高效的溶磷菌株(D/d≥1.5)56株,其高效溶磷菌株數(shù)目,北碚＞云陽＞涪陵,近根區(qū)約等于遠(yuǎn)根區(qū)。并對其中的28株(D/d≥2.0)通過搖瓶培養(yǎng),利用鉬銻抗比色法確定溶磷量(有效磷和全磷),篩選出了10株高效的溶磷菌株。
　　 2.分析平板篩選(D/d)和搖瓶篩選(有效磷和全磷),它們之間存在顯著相關(guān)(r=0.402和0.531,p＜0.05),兩種篩選結(jié)果基本保持一致。平板篩選中的溶磷圈大小(D)更多的反應(yīng)溶磷菌株泌酸的能力;

3、還發(fā)現(xiàn)在大規(guī)模篩選菌株時不僅以平板篩選(D/d)作指標(biāo)同時還將菌落(d)也作為篩選指標(biāo),可以加快得到潛在的高效溶磷菌株。搖瓶篩選中各菌株溶磷量差異較大,其中有效磷量與全磷量之間的差異,主要體現(xiàn)在各菌株對磷素的吸收量。
　　 3.對10株菌兼容多種難溶磷源的再次篩選表明,各菌株對不同難溶磷源的溶解差異較大,表現(xiàn)出Ca3(PO4)2＞混合難溶磷源＞AlPO4、FePO4＞卵磷脂,其中各菌株之間對FePO4的差異較其余磷源小,對混合磷

4、源的溶解主要體現(xiàn)在菌株對Ca3(PO4)2的溶解。
　　 4.綜合兼容多種難溶磷源篩選分析得出,菌株P(guān)1、P17、P35、P21對Ca3(PO4)2的溶解能力相對較強,菌株P(guān)21、P17、P1和P35對AlPO4的溶解能力相對較強;P21、P17、P35、P22和Pl對FePO4的溶解能力相對較強,P21、P1、P35、P17對卵磷脂的溶解能力相對較強,P21、P35、P17和P1對于混合磷源的溶解能力相對較強;菌株P(guān)1、P17

5、、P21、P35共同作為搖瓶篩選所得的兼容多種難溶磷源的高效溶磷菌株,其中P21號菌株在各種難溶磷源篩選中均有較好的溶磷表現(xiàn)。
　　 5.對溶磷菌株P(guān)1、P17、P21、P35作22種生理生化方面的鑒定顯示,P1為蟑螂埃希氏菌(Escherichia.blattae)、P17為產(chǎn)酸克雷伯氏菌(Klebsiellaoxytoca)、P21為無花果沙雷氏菌(Serratiaficaria.plymuthiea)、P35為蟑螂埃希氏菌

6、(E.blattae)。
　　 6.溶磷菌室內(nèi)溶磷條件的研究表明:葡萄糖是最好的碳源,硫酸銨是相對較好的氮源,其中P1、P21較適合碳源為16g·L-1,P35為12g·L-1,P17為8g·L-1;P1較適合氮源為0.4g·L-1,P35、P21為0.2g·L-1,P17為0.6g·L-1。
　　 7.4株實驗菌株對NaCl濃度比較敏感,在NaCl濃度為0.1g·L-1時,各菌株溶磷量相對較小,為其余各濃度下的2/3左

7、右,較低NaCl濃度抑制菌株溶磷。4菌株均具有耐鹽性,相對較高的NaCl濃度菌株溶磷量依然較高,其中P17號菌株尤為突出,高于50ug·ml-1。各菌株選擇較適合NaCl濃度為0.5g·L-1。
　　 8.較高的供氧量是供試4菌株充分發(fā)揮溶磷能力的必要條件,其中P1號菌株為兼性好氧型細(xì)菌,在較高或者較低的供氧水平下都具有較好了溶磷量,P17對氧的需求相對較小,在一定范圍內(nèi)的供氧水平下,具有較高的溶磷能力。各菌株共同選擇較適合裝液

8、量為20ml。
　　 9.4株溶磷菌劑接種于實驗土壤中均能正常生長,隨著時間的增長,各菌劑在第21天左右時達(dá)到土壤的最大容菌量,隨后大規(guī)模死亡而菌數(shù)保持相對較低的水平,在此過程中伴隨著對磷素的活化作用。滅菌土壤中菌株生長相對較好,而未滅菌土壤對實驗菌株選擇較強,菌數(shù)目較小,兩組實驗土壤中菌株溶磷效果相似。
　　 10.不加肥料,菌劑接種于帶玉米苗的實驗土壤中培養(yǎng)41天后,玉米苗生物量、可溶性蛋白、可溶性糖含量增大,其顯著