苦豆子總堿的毒性及HPLC法測定綿羊血漿四種苦豆子堿的研究.pdf

1、苦豆子總堿的毒性試驗通過對小白鼠灌胃苦豆子總堿得到急性中毒的癥狀、主要靶器官、苦豆子總生物堿的半數(shù)致死量以及苦豆子總堿主要靶器官的毒性恢復(fù)性實驗。其中以Bliss法計算其半數(shù)致死量為301.75mg·kg-1。實驗結(jié)果顯示，苦豆子總堿的靶器官為肺臟、肝臟、腎臟、心臟和神經(jīng)系統(tǒng)。高劑量苦豆子總堿對肺臟造成損害的恢復(fù)情況較差，腦組織、肝臟和腎臟對其造成的損害恢復(fù)情況較為理想。刺激性試驗包括苦豆子總生物堿的皮膚刺激性和眼刺激性試驗兩部分，皮膚

2、刺激性試驗包括了單次刺激性試驗和多次刺激性試驗，分為兩組:苦豆子總堿制劑組和苦豆子總堿透皮制劑組。添加的透皮促進劑為氮酮和丙二醇。實驗結(jié)果顯示低濃度苦豆子總堿對皮膚和眼睛無刺激性。添加了透皮促進劑的實驗組對皮膚刺激性強度中等，主要刺激皮膚角質(zhì)層的角化不全，皮膚真皮層的纖維水腫斷裂，刺激小血管充血、出血。
　　使用島津LC-2010C液相色譜儀，建立了血漿中槐定堿、苦參堿、氧化苦參堿和槐果堿的HPLC檢測方法。血漿前處理以乙腈為蛋白

3、沉淀劑，通過紫外檢測器進行檢測。液相色譜的流動相為0.05moL/L的磷酸二氫鉀（磷酸氫二鉀調(diào)pH到6.45）和乙腈(A/B)，梯度洗脫。梯度洗脫程序:0.01 min-5.00min，A/B=95/5～95/5;5.00min-25.00min, A/B=95/5～88/12;25.00min-45.00min, A/B=88/12～75/25;45.00min-50.00min，A/B=75/25-95/5。檢測波長225nm，流速

4、1.0mL·min-1，檢測波長225nm。對苦豆子總堿的各主要組成成分獲得了良好的基線分離效果，建立了在羊血漿內(nèi)檢測苦豆子總堿的“高效液相色譜方法”，槐定堿、氧化苦參堿、苦參堿和槐果堿的保留時間分別為:14.904min，20.641min，28.612min，32.318min，目標(biāo)生物堿色譜峰分離良好。四種生物堿線性關(guān)系良好R2＞0.99，經(jīng)檢測四個實驗組僅有苦豆子總堿透皮制劑組檢測得到了有效藥物濃度。本實驗建立了在羊血漿內(nèi)檢測苦