紅三葉新品系種質(zhì)鑒定及無性繁殖特性的研究.pdf

1、紅三葉新品系（Trifolium pratense L.）是內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)以內(nèi)蒙古牙克石地區(qū)自然分布的紅三葉種質(zhì)為材料，經(jīng)過多年的栽培馴化和系統(tǒng)選育，而培育出的抗寒新種質(zhì)。本文對(duì)紅三葉新品系以及部分國內(nèi)外種質(zhì)的形態(tài)學(xué)特征、染色體、SSR標(biāo)記以及無性繁殖做了較為系統(tǒng)的鑒定評(píng)價(jià)和研究，并首次對(duì)內(nèi)蒙古牙克石自然分布的紅三葉遺傳起源進(jìn)行了探討，為我國紅三葉優(yōu)異種質(zhì)的利用和創(chuàng)新奠定了基礎(chǔ)。研究獲得以下主要結(jié)果：
　　1、70份紅三葉材料中早

2、花型、中間型和晚花型，分別占22.86％、68.57%和8.57%。根據(jù)第二年生育期長短可分為早熟型、中熟型和晚熟型，生育期分別64d，71.96d和84.17d。紅三葉新品系屬晚花型，生育期74d，中熟型，平均日增長速率為0.44cm/d，接近紅三葉群體平均水平。試驗(yàn)材料在呼和浩特越冬率變化范圍為0%~88.89%，紅三葉新品系越冬率88.89%，抗寒性突出。
　　2、形態(tài)特征研究表明，紅三葉葉斑強(qiáng)度、分枝數(shù)、花序數(shù)/莖、種子顏

3、色、第三莖節(jié)長、二級(jí)側(cè)枝數(shù)、葉面積、自然高度等形態(tài)特征變異較大。遺傳多樣性由大到小依次為枝形＞葉形＞種子＞花部＞根部。冠幅、自然高度和分枝數(shù)是劃分紅三葉形態(tài)類型的主要指標(biāo)。紅三葉新品系根系以黃褐色為主，多為綠色莖，半直立，株叢大小為紅三葉群體中等水平，葉斑以中斑和無斑為主，葉面積較大，葉片形狀較為寬短。花色主要為紫紅色，淺紫紅色次之，淺粉色出現(xiàn)比例約為10%，偶見白花的變異。種子顏色相對(duì)較淺，黃色種子數(shù)量較多，種子大小居中，千粒重偏小，

4、紅三葉新品系與29，35，3，41，5，19，2，67號(hào)等材料形態(tài)特征比較相似。
　　3、43份紅三葉均為二倍體，染色體數(shù)目為2n=14，基數(shù)為7，共檢測(cè)出 m、sm、st和t4種染色體類型，其中6份材料出現(xiàn)隨體，有1A、2A、1B、2B和3B5種核型，8種核型公式。紅三葉新品系核型公式為2n=2x=14=8m+6sm（2SAT），染色體內(nèi)部不對(duì)稱性大于染色體之間的不對(duì)稱性，不對(duì)稱性在紅三葉群體中相對(duì)較高。根據(jù)Langlet染色體

5、形態(tài)劃分標(biāo)準(zhǔn)，紅三葉新品系染色體類型屬于相對(duì)原始的T型。
　　4、32份紅三葉材料，8對(duì)引物擴(kuò)增共獲得多態(tài)性條帶219條，多態(tài)性百分率為100%，有效等位基因數(shù)Ne為1.1636。Nei多樣性指數(shù)H為0.1229，Shannon信息指數(shù)I為0.2241，材料間的總變異Ht為0.1218，種群間遺傳變異Hs0.0387，遺傳分化系數(shù)Gst為0.3179，基因流Nm1.0727，31.79%的遺傳變異存在于種群之間，68.21%的存在

6、于種群內(nèi)。本試驗(yàn)獲得紅三葉新品系的指紋圖譜，可有效區(qū)分2份國內(nèi)已登記紅三葉品種。紅三葉新品系Nei多樣性指數(shù)0.0665，Shannon信息指數(shù)為0.1065，均低于平均水平，種群多樣性相對(duì)較低。遺傳距離表明紅三葉新品系親緣最近的3份材料依次為來自俄羅斯的60號(hào)＞西班牙的22號(hào)＞俄羅斯的53號(hào)。
　　5、紅三葉新品系分株繁殖適宜切塊6~7個(gè)，最高增殖系數(shù)為6.38，分枝期整枝扦插效率較高，最高增殖系數(shù)為6.40。組織培養(yǎng)研究表明：

7、紅三葉新品系種子消毒的最佳方法為75%酒精預(yù)處理，0.1% HgCl2消毒10min；最適無菌苗培養(yǎng)基為不添加激素的1/4MS+1.5%蔗糖；子葉、下胚軸、葉柄、葉片及根段在 MS+0.5 mg·L-16-BA+1~2 mg·L-12,4-D培養(yǎng)基上都極易誘導(dǎo)出愈傷組織；最佳繼代培養(yǎng)基為 MS+0.5 mg.L-16-BA+1.0 mg·L-12,4-D；最佳分化培養(yǎng)基為 MS+0.75 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1 NA