真姬菇低溫脅迫下菌絲體酶活變化及差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、真姬菇(Hypsizigus marmoreus)是一種具有良好的食用和藥用價(jià)值的珍稀食用菌，在內(nèi)銷和外貿(mào)上有很大的潛力。真姬菇需要在低溫刺激下才能出菇，溫度是影響其生長和品質(zhì)的重要因素。本研究應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法和技術(shù)，通過比較最適溫度和低溫脅迫條件下菌絲體蛋白質(zhì)組的變化，尋找與低溫脅迫緊密相關(guān)的差異蛋自．并探討其功能：同時(shí)對(duì)兩種條件下的菌絲體保護(hù)酶的活性加以測(cè)定，以期對(duì)食用菌低溫誘導(dǎo)出菇的適應(yīng)性機(jī)制有所了解，為今后克隆低溫誘導(dǎo)相關(guān)基因

2、奠定基礎(chǔ)。 本研究以最適溫(25℃)為對(duì)照，低溫14℃為處理，通過雙向電泳技術(shù)比較了處理不同時(shí)間對(duì)照和處理之間的蛋白質(zhì)組差異。比較分析2-DE圖譜后發(fā)現(xiàn)26個(gè)上調(diào)或下調(diào)的差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，經(jīng)過MALDI-TOF-MS/MS初步鑒定和數(shù)據(jù)庫檢索，有14個(gè)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)得到鑒定。 在14個(gè)鑒定到的差異蛋白中，肌動(dòng)蛋白、微管蛋白是細(xì)胞骨架的重要成分；蛋白酶體和乙酰乳酸合酶參與蛋白質(zhì)的合成與分解：ATP合成酶、轉(zhuǎn)醛醇酶、甲酸脫

3、氫酶、1，5-二磷酸羧化酶參與細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)與能量代謝：鳥苷酸結(jié)合蛋白、14-3-3蛋白參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控；新生多肽相關(guān)復(fù)合物可能參與細(xì)胞分化、發(fā)育的調(diào)控。說明真姬菇在低溫脅迫下的調(diào)控可能是一個(gè)比較復(fù)雜的多蛋白和酶參與的過程。 通過酶活測(cè)定發(fā)現(xiàn)，低溫脅迫下CAT、POD、SOD的活性都在最初的9個(gè)小時(shí)內(nèi)上升較快，且均高于對(duì)照，之后開始逐漸下降，MDA含量也在12h內(nèi)保持上升，之后略有下降，說明低溫脅迫下真姬菇細(xì)胞膜受到一定傷害，但真