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1、植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)可定向改良植物性狀,獲得有突破性的特殊創(chuàng)新材料。將轉(zhuǎn)基因技術(shù)與常規(guī)育種技術(shù)相結(jié)合將是今后棉花育種的發(fā)展方向之一。本研究選用源于同一轉(zhuǎn)基因受體(華抗棉1號(hào))的13個(gè)不同的棉花轉(zhuǎn)基因系為親本,即4個(gè)rolB轉(zhuǎn)基因系,3個(gè)甘露糖基轉(zhuǎn)移酶基因(mant)轉(zhuǎn)基因系,3個(gè)單加氧酶基因(mnx)轉(zhuǎn)基因系,3個(gè)轉(zhuǎn)座活化標(biāo)簽的轉(zhuǎn)基因系,采用頂交法配制了12個(gè)組合。這12個(gè)組合加上5個(gè)親本和1個(gè)生產(chǎn)對(duì)照品種鄂雜23號(hào)共18個(gè)材料按隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)
2、進(jìn)行了品系比較試驗(yàn),評(píng)價(jià)多轉(zhuǎn)基因堆積效應(yīng)和探討應(yīng)用轉(zhuǎn)基因堆積技術(shù)培育棉花新品種的可行性。
主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:
1.通過(guò)提取轉(zhuǎn)基因及對(duì)照植株葉片總DNA,進(jìn)行了PCR檢測(cè),實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,各高世代轉(zhuǎn)基因系的植株葉片總DNA都擴(kuò)增出特異性條帶,與質(zhì)粒DNA陽(yáng)性對(duì)照擴(kuò)增出的特異條帶一致,而對(duì)照植株葉片DNA沒(méi)有擴(kuò)增出相應(yīng)的條帶,證明各個(gè)轉(zhuǎn)基因系經(jīng)過(guò)多代繁殖后,外源目的基因能夠在棉花基因組中穩(wěn)定遺傳。
3、 2.轉(zhuǎn)基因堆積效應(yīng)分析結(jié)果:(1)4個(gè)轉(zhuǎn)基因堆積組合棉花產(chǎn)量增幅17%-31%,F(xiàn)1代與其對(duì)應(yīng)轉(zhuǎn)基因親本方差分析均達(dá)到顯著,多轉(zhuǎn)基因堆積能顯著提高棉花產(chǎn)量。(2)多轉(zhuǎn)基因堆積F1代的單鈴重最大為6.8g,4個(gè)F1代單鈴重與父本相比達(dá)到極顯著,與母本不顯著。(3)4個(gè)轉(zhuǎn)基因堆積組合中有3個(gè)衣分增大了,分別達(dá)到43.2%、42.2%、41.4%。(4)單株結(jié)鈴數(shù)以7020×7021(轉(zhuǎn)4en-ms2P-mant-gus品系×轉(zhuǎn)ms2P-
4、mant-gus&Bt品系)增加最為明顯,相對(duì)其親本平均值增幅20.8%,單株結(jié)鈴性獲得極大的提高。(5)株高均介于兩親本間,有效果枝數(shù)在多轉(zhuǎn)基因堆積下無(wú)差異。(6)纖維品質(zhì)中上半部平均長(zhǎng)度在28.55-30.10mm之間,都獲得了增長(zhǎng)但差異不顯著。纖維整齊度表現(xiàn)為84.90%-86.10%,整齊度指數(shù)得到提高。馬克隆值、伸長(zhǎng)率和斷裂比強(qiáng)度的多轉(zhuǎn)基因堆積效應(yīng)不明顯。
3.除了轉(zhuǎn)ms2P-mant-gus品系與轉(zhuǎn)ms2P-m
5、ant-gus&Bt品系的轉(zhuǎn)基因堆積組合的籽棉產(chǎn)量略低于對(duì)照品種“鄂雜棉23號(hào)”,且差異不顯著,其余11個(gè)參試材料均高于生產(chǎn)對(duì)照品種。轉(zhuǎn)En-Ds結(jié)構(gòu)和轉(zhuǎn)ms2P-mant-gus&Bt的轉(zhuǎn)基因堆積組合的產(chǎn)量比生產(chǎn)對(duì)照品種增幅23.2%,差異達(dá)到極顯著,居第2,3,4位的都是轉(zhuǎn)35S-rolB品系與轉(zhuǎn)ms2P-mant-gus&Bt品系的雜交堆積組合,增幅分別為18%、17.3%和13.8%。纖維品質(zhì)各個(gè)指標(biāo)與對(duì)照鄂雜棉23號(hào)相當(dāng),部分
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