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1、摘要本試驗(yàn)主要研究了石蒜野外材料鱗莖、葉、根、花、花葶與組織培養(yǎng)材料不定芽、組培根、愈傷組織生物堿含量的差異,優(yōu)化了石蒜不定芽液體培養(yǎng)的條件,建立了石蒜不定芽液體震蕩培養(yǎng)體系,研究了前體化合物和誘導(dǎo)子及二者協(xié)同作用對(duì)石蒜不定芽生長(zhǎng)和生物堿積累的影響;研究了在不同的培養(yǎng)時(shí)間添加前體和誘導(dǎo)子對(duì)石蒜不定芽生長(zhǎng)和生物堿積累的影響。獲得以下試驗(yàn)結(jié)果:1.石蒜組織生物堿分析。試驗(yàn)結(jié)果表明石蒜堿、力可拉敏、加蘭他敏三種生物堿含量高低順序在石蒜不同組織
2、中不一致,石蒜堿含量從高到低依次為:花鱗莖花葶葉根不定芽組培根愈傷組織;力可拉敏含量從高到低依次為:花鱗莖葉花葶根不定芽組培根愈傷組織;加蘭他敏含量從高到低為:花葉根不定芽鱗莖花葶組培根愈傷組織。不定芽中三種生物堿含量高于愈傷組織和組培根,加蘭他敏含量為230.197μg?g1DW,僅低于花,葉和根,是愈傷組織中加蘭他敏含量的21.79倍。由于石蒜花期較短,因此花不宜用作研究材料;且與葉、根和愈傷相比,石蒜不定芽具有容易誘導(dǎo),容易培養(yǎng),
3、不受季節(jié)限制的特點(diǎn),因此石蒜不定芽是研究生物堿合成最適宜的試驗(yàn)材料。并用氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)從石蒜鱗莖樣品中鑒定出5個(gè)生物堿成分,分別為石蒜堿、力可拉敏、加蘭他敏、多花水仙堿、普魯維因。2.石蒜不定芽的液體培養(yǎng)。試驗(yàn)結(jié)果表明培養(yǎng)基形態(tài)、激素配比、蔗糖濃度、光照時(shí)間影響石蒜不定芽的生長(zhǎng)和石蒜堿,力可拉敏,加蘭他敏三種生物堿的積累。有利于石蒜不定芽生物堿積累的最佳培養(yǎng)條件分別為:液體培養(yǎng)、6BA和NAA濃度分別為2mg?L1和0.2mg?L1、蔗糖
4、濃度為40g?L1、光照時(shí)間為16h?d1。3.前體化合物對(duì)石蒜不定芽的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明酪胺對(duì)石蒜不定芽的生長(zhǎng)和石蒜堿、力可拉敏、加蘭他敏含量的影響不一致。添加高濃度酪胺有利于石蒜生物堿的積累,低濃度的酪胺促進(jìn)石蒜不定芽的生長(zhǎng)。綜合酪胺對(duì)石蒜不定芽的生長(zhǎng)和生物堿含量的影響,酪胺濃度為250μmol?L1時(shí)石蒜堿,力可拉敏,加蘭他敏的含量增加最為明顯。原兒茶醛對(duì)石蒜不定芽的生長(zhǎng)和三種生物堿積累的影響一致。低濃度的原兒茶醛能夠促進(jìn)石蒜不定
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