干旱誘導(dǎo)TaNAC基因的克隆表達(dá)及轉(zhuǎn)TPSP基因小麥材料的鑒定.pdf

1、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文干旱誘導(dǎo)TaNAC基因的克隆表達(dá)及轉(zhuǎn)TPSP基因小麥材料的鑒定姓名：王瀟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種學(xué)指導(dǎo)教師：李永春;尹鈞200906012 0 0 9 年河南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文C l o n i n g a n d E x p r e s s i o n o f D r o u g h t I n d u c e d 死玎、W C G e n e s a n dI d e n t i f i c a

2、 t i o no f T r a n s g e n i c W h e a t M a t e r i a l s w i t h aF u s i o n G e n e T P S PS u p e r v i s o r ：A s s o c i a t e P r o f ．Y o n g c h u nL i a n d P r o f ．J u n 扔勿M a s t e r C a n d i d a t e ：W a

3、 n g X i a oA b s t r a c t ：D r o u g h ti so n e o f m a j o r a b i o t i cs t r e s s e sw h i c hg r e a t l y a f f e c t e dt h eh i 曲a n ds t a b l e y i e l d s o fw h e a t ．T h c r e s e a r c h e s f o c u s

4、e do nt h em o l e c u l e m e c h a n i s m sa n dt r a n s g e n i cb r e e d i n gf o rd r o u g h tt o l e r a n c eo f w h e a t i sv e r ys i g n i f i c a n tt oe n h a n c e t h ed r o u g h t t o l e r a n c ea

5、n d w a t e r u s i n ge f f i c i e n c y ．I n t h i s a r t i c l e ，b a s e do nt h es y s t e m a t i ca n a l y s i s o f g e n e e x p r e s s i o n p r o f i l e s o f u n d e r t h e w a t e r - s t r e s s i n w

6、 h e a t ，f i v ed r o u g h t - s t r e s si n d u c e d g e n e s ，w h i c he n c o d i n g N A C t r a n s c r i p t i o nf a c t o r s ，w e r ec l o n e da n d t h e i re x p r e s s i o n p a t t e r n sw e r ec h a

7、 r a c t e r i z e d ．T r e h a l o s e i sa 虹I l d o f o l i g o s ew h i c hp l a y a ni m p o r t a n t r o l ei nc e l l u l a rp r o t e c t i o nu n d e r d e h y d r a t i o n c o n d i t i o n sa n d t r y i n gt

8、 oa c c u m u l a t e p r o p e r t r e h a l o s e b yg e n e t i ce n g i n e e r i n g i sa ne f f e c t i v em e t h o d t oe n h a n c et h ea b i l i t yo f d r o u g h tt o l e r a n c ei nc r o pp l a n t s ．I nt

9、 h ep r e v i o u sr e s e a r c ho f o u rg r o u p ，s o m et r a n s g e n i cw h e a t m a t e r i a l sw i t ha f u s i o n g e n e T P s P ( f u s e db y t h eo t s Aa n d o t s Bg e n e w h i c h e n c o d e s t r

10、e h a l o s e ·- 6 - - p h o s p h a t e s y n t h a s e a n d t r e h a l o s e ··6 ·- p h o s p h a t ep h o s p h a t a s er e s p e c t i v e l y ) w e r eo b t a i n e d ．I nt h i s a r t i c l e

11、 ，T 2t r a n s g e n i c l i n e s o ft h et r a n s g e n i cw h e a t w e r ep l a n t e da n di d e n t i f i e d ．T 1 1 cm a j o rr e s u l t so ft h i s a r t i c l ea r es u m m a r i z e d a sf o l l o w s ：1 、w a

12、 t e r - s t r e s s i n d u c e d g e n e s T a N A C l 2 ，T a N A C 3 4 ，T a N A C 5 6 , T o N A C 7 8 a n dT a N A C 4 7 8 ，w h i c h e n c o d i n g N A C t r a n s c r i p t i o n a lf a c t o r s ，w e r ec l o n e

13、d b y R T - P C R f r o mw h e a t a n dt h es e q u e n c ea n a l y s i so f t h e m s h o w e d t h a ta N A M d o m a i n ，w h i c h b e l o n g e dt ot h eN A C g e n e f a m i l y , W a sc o n t a i n e di n t h ed

14、 e d u c e d a m i n oa c i ds e q u e n c e sc o d e db yt h ef i v e c l o n e dg e n e s ．T h eh o m o l o g yo fT a N A C 12 ，億I N A C 3 4 ，T a N A C 5 6 ，a n dT a N A C 7 8 p r o t e i n sW a su p t o 9 6 ．9 ％b e t

15、w e e n t h e ma n d t h eg e n o m i c a n a l y s i si n d i c a t e dt h a tt w ot y p i c a li n t r o n s ( 9 4 b pa n d19 0 b pi nl o n gr e s p e c t i v e l y ) w e r e i n c l u d e di nt h e s ef o u r g e n e

16、s ．2 、T h e e x p r e s s i o np a t t e r n so fT a N A C l 2 ，T a N A C 3 4 ，T a N A C 5 6 a n d T a N A C 7 8 u n d e r t h ew a t e r - a n ds a l t - s t r e s sa n d A B A t r e a t m e n tw e r es t u d i e d ．T h

17、 er e s u l t s s h o w e dt h a tt h ee x p r e s s i o no f a l lt e s t e dg e n e s ，e x c e p tT a N A C 3 4 w h i c h i sw e a k l y e x p r e s s e d ，w e r ei n d u c e dw i t ht h e w a t e r - a n ds a l t - s

18、t r e s s e sa n d A B A t r e a t m e n ti nr o o t s ， a n d m o s t o ft h e s e g e n e sw e r es i m i l a r l yi n d u c e du n d e rt h e d i f f e r e n tt r e a t m e n t si n l e a v e sc o m p a r e d t ot h o