白腐菌提高油菜秸稈飼用價(jià)值的研究及其漆酶基因的異源表達(dá).pdf

1、本研究旨在研究油菜秸稈飼料化利用的方法。一是通過篩選提高油菜秸稈飼用價(jià)值的白腐菌，探討其對(duì)油菜秸稈的品質(zhì)及其瘤胃降解的影響;二是通過運(yùn)用分子技術(shù)構(gòu)建降解木質(zhì)素能力強(qiáng)的酵母菌株，將香菇漆酶基因在酵母重組、表達(dá)，為油菜秸稈開發(fā)利用提供技術(shù)支撐。
　　試驗(yàn)一:本試驗(yàn)旨在研究白腐菌發(fā)酵油菜秸稈對(duì)其化學(xué)成分及產(chǎn)酶活性的影響。試驗(yàn)采用白腐菌發(fā)酵油菜秸稈，測(cè)定其發(fā)酵10d、20 d、30 d后油菜秸稈的養(yǎng)分含量變化及木質(zhì)降解酶活性的變化。結(jié)果表

2、明:同對(duì)照組相比，經(jīng)過30 d的發(fā)酵，黃孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium，P.chrysosporium）和香菇菌(Lentinula edodes，L.edodes)降解了油菜秸稈約45％的木質(zhì)素（lignin），損失了約55％的纖維素(Cellulose);蟲擬蠟菌(Ceriporiopsis subvermispora，C.subvermispora)和槭射脈革菌（Phlebia acerina

3、，P.acerina）降解了油菜秸稈部分木質(zhì)素和纖維素(＜30％);P.chrysosporium、L.edodes和C.subvermispora蛋白含量較對(duì)照組顯著提高(P＜0.001)所有白腐菌發(fā)酵的油菜秸稈中甲殼素(chitin)含量顯著提高(P＜0.001)。因此，P.chrysosporium和L.edodes發(fā)酵能夠明顯改善油菜秸稈的營(yíng)養(yǎng)成分。
　　試驗(yàn)二:本試驗(yàn)旨在研究不同白腐菌發(fā)酵油菜秸稈對(duì)體外瘤胃發(fā)酵的影響。試

4、驗(yàn)采用體外批次培養(yǎng)法，利用四種白腐菌進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵30 d及對(duì)照組的油菜秸稈，體外培養(yǎng)48 h后看對(duì)體外瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響。結(jié)果表明:同對(duì)照組相比，P.chry.sosporium組TVFA含量顯著提高(P=0.020)，乙酸顯著提高(P＜0.001);L.edodes和P.chrysosporium組的IVOMD較對(duì)照組增大，而C.subvermispora和P.acerina顯著降低。P.chrysosporium和L.edodes的

5、Enzymatic OMD較其他組更高(P.＜0.01）。因此，P.chrysosporium和L.edodes提高了瘤胃體外發(fā)酵，C.subvermispora和P.acerina瘤胃發(fā)酵受到抑制。
　　試驗(yàn)三:本試驗(yàn)旨在研究不同白腐菌發(fā)酵的油菜秸稈對(duì)瘤胃降解動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響。試驗(yàn)采用瘤胃尼龍袋法在三頭瘺管錦江黃牛上進(jìn)行。結(jié)果表明:與對(duì)照組相比，L.edodes組油菜秸稈的NDF的快速降解部分增大(P=0.068）;P.chry

6、sospomum在所有發(fā)酵組中慢速降解部分(B)最大(P=0.004)，Kd最小(P=0.004);同對(duì)照組相比，L.edodes和P.chrysosporium的不可降解部分(C)分別降低了7.9％和12.7％(P＜0.001)。兩個(gè)發(fā)酵組的滯留時(shí)間(Lag)不受影響;L.edode和P.chrysosporium發(fā)酵的油菜秸稈的NDF的有效消化率(ED)顯著提高(P.＜0.001)。
　　試驗(yàn)四:本試驗(yàn)旨在研究白腐菌的木質(zhì)素降