楔葉鐵線蕨低溫逆境生理性質(zhì)的研究與組培快繁體系建立.pdf

1、楔葉鐵線蕨(A．raddianum)屬鐵線蕨科(A.diantaceae)鐵線蕨屬(Adiantum L．)植物，多年生小型常綠草本，植株矮小，非常適合室內(nèi)盆栽或制作盆景，近些年來越來越受到人們的喜愛和青睞。 本試驗以楔葉鐵線蕨為試材，一方面研究低溫脅迫下楔葉鐵線蕨的基礎代謝，探討其生理生化指標與抗冷性的關系，并使用酚類化合物水楊酸(SA)提高其在逆境條件下的抗性；另一方面研究以孢子為外植體的組織培養(yǎng)，篩選出孢子萌發(fā)、原葉體增殖

2、和孢子體誘導的最佳培養(yǎng)條件，建立完整的楔葉鐵線蕨快繁體系，從而為楔葉鐵線蕨在北方的擴大繁殖及觀賞價值的提高提供理論依據(jù)和資料積累。 (一)楔葉鐵線蕨低溫逆境生理性質(zhì)研究部分的方法和結果如下： 1．選取長勢旺盛的楔葉鐵線蕨盆栽置于4±0.5℃下低溫脅迫，在第0.5、1、1.5、2、3、4、5、6天采摘新鮮葉片；再用0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L四個梯度濃度的水楊酸(SA)水溶液進行噴葉與灌根相結合的方法處理后

3、置于4±0.5℃下低溫脅迫，在第3天和第6天采摘新鮮葉片。 2．楔葉鐵線蕨本身可對冷害作出“適應性”反應，低溫脅迫下植株脯氨酸含量增加，可溶性糖含量增加，保護酶SOD活性提高，細胞膜透性增大后有所降低，MDA含量上升又略有下降，內(nèi)源激素ABA含量上升。這些變化只是在脅迫初期的48小時內(nèi)，隨著脅迫時間的延長，脯氨酸含量降低，可溶性糖含量降低，保護酶SOD活性下降，細胞膜透性繼續(xù)增大，MDA含量再次上升，內(nèi)源激素ABA含量降低。

4、 3．水楊酸能降低細胞電解質(zhì)外滲率，減輕膜脂過氧化作用，保護SOD和其它蛋白質(zhì)，保持膜結構和功能的完整性等等，從而緩解逆境脅迫的造成的傷害，增強對低溫的抗性。以2mmol/L濃度的水楊酸處理為提高楔葉鐵線蕨抗冷性的最適濃度。 (二)楔葉鐵線蕨組培快繁體系建立研究部分的方法和結果如下： 1．以楔葉鐵線蕨孢子為外植體，在孢子初代培養(yǎng)的探索階段設計不同基本培養(yǎng)基、添加活性炭和不同水平赤霉素的單因素試驗；孢子初代培養(yǎng)的確定階

5、段設計3因素3水平的正交實驗；原葉體增殖培養(yǎng)階段也是設計3因素3水平的正交實驗；孢子體誘導階段安排完全組織培養(yǎng)和不完全組織培養(yǎng)兩種方式；最后是移栽。 2．以孢子為外植體途徑主要是對孢子萌發(fā)和孢子體誘導兩個步驟進行研究。單因素的試驗設計結果是：無機鹽含量較低的基本培養(yǎng)基適于孢子萌發(fā)，赤霉素和活性炭的使用都有促進楔葉鐵線蕨孢子萌發(fā)的作用，經(jīng)正交實驗得到的孢子萌發(fā)最適培養(yǎng)基是：1/2MS培養(yǎng)基+3.0mg/L GA+0.3％活性炭+3