油桐花芽分化期Tunglfy基因時(shí)空表達(dá)及內(nèi)源激素含量的動態(tài)變化.pdf

1、油桐(Vernicia fordii(Hemsl.)是我國特有經(jīng)濟(jì)林木,栽培歷史悠久,桐油是重要工業(yè)用油。而花芽分化是植物生殖過程的基礎(chǔ),直接關(guān)系到果實(shí)的產(chǎn)量和質(zhì)量。本文在油桐花芽形態(tài)分化期的顯微結(jié)構(gòu)觀察的基礎(chǔ)上,研究了其花芽分化期內(nèi)Tunglfy基因時(shí)空表達(dá)規(guī)律和葉片中內(nèi)源激素的動態(tài)變化,探討內(nèi)源激素變化與成花的關(guān)系花芽分化的化學(xué)調(diào)控提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
　　 1、分析植物鈣調(diào)素基因的保守區(qū)序列,設(shè)計(jì)引物。以油桐花

2、芽總RNA反轉(zhuǎn)錄的cDNA第一鏈為模板,利用RT-PCR擴(kuò)增出長為300bp左右的cDNA片段,克隆入PCR2.1vector載體。測序和序列分析表明,獲得了大小為293bp的cDNA片段,命名為VeCam,該片段與獼猴桃等有較高的核苷酸同源性,達(dá)到了96％。
　　 2、分析油桐Tunglfy基因的3’端序列,設(shè)計(jì)特異引物。以油桐花芽分化期不同階段的嫩芽、嫩葉、嫩莖的總RNA反轉(zhuǎn)錄的cDNA第一鏈為模板,分別用該引物和VeCam

3、基因引物進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增,電泳檢測。PCR產(chǎn)物,發(fā)現(xiàn)嫩芽、嫩葉、嫩莖在油桐花芽分化的不同時(shí)期都有表達(dá),嫩芽的表達(dá)相對強(qiáng)烈。
　　 3、在油桐花芽分化期組織學(xué)觀察的基礎(chǔ)上,研究該期葉片內(nèi)源激素ZR(玉米素核苷)、IAA(生長素)、GA(赤霉素)、ABA(脫落酸)含量變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn):花芽生理分化期,ZR(玉米素核苷)、IAA(生長素)、GA(赤霉素)、ABA(脫落酸)含量迅速下降,到花芽形態(tài)分化開始前降到較低的水平；花芽形態(tài)分化