蝴蝶蘭組織培養(yǎng)及體胚發(fā)生技術(shù)研究.pdf

1、以人工授粉方式獲得了蝴蝶蘭種胚，研究了種胚發(fā)育程度及培養(yǎng)基類型對蝴蝶蘭種胚無菌播種成苗的影響，摸索出一條有效的蝴蝶蘭種胚無菌成苗技術(shù)；以蝴蝶蘭花梗腋芽為外植體，通過對外植體消毒方法、培養(yǎng)基種類、激素濃度、褐化控制等的系列研究，建立了一套通過誘導(dǎo)叢生芽進行蝴蝶蘭快繁的有效途徑；以蝴蝶蘭無菌苗莖段為材料，對蝴蝶蘭體胚發(fā)生過程進行了初步探索，成功誘導(dǎo)出體胚并誘導(dǎo)其發(fā)育成完整植株，完成了通過體胚誘導(dǎo)植株再生的過程，并對蝴蝶蘭體胚發(fā)生過程進行了組

2、織細胞學(xué)觀察。主要試驗結(jié)果如下：
　　 1.蝴蝶蘭種胚無菌苗培養(yǎng)。
　　 種莢最佳采集時間為授粉后110～120d。無菌萌發(fā)最適培養(yǎng)基：1/2MS++AC1.0g.L-1。壯苗生根培養(yǎng)基：1/2MS+AC1.0g·L-1+香蕉泥60ml·L-1。
　　 2.叢生芽快繁技術(shù)。
　　 花梗切為2-3cm帶腋芽段，預(yù)處理后用0.1％升汞滅菌15min，滅菌成功率達90％；花梗腋芽最適誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS或1/2MS

3、+6-BA3.0mg·L-1；叢生芽誘導(dǎo)最適培養(yǎng)基：1/2MS+6-BA7.5mg·L-1+NAA1.0mg·L-1；生根最適培養(yǎng)基：1/2MS+NAA1.0mg·L-1+AC1.0g·L-1+香蕉泥60ml·L-1。煉苗7d移栽，成活率達90％。
　　 3.體細胞胚胎發(fā)生。
　　 以無菌苗莖段為外植體，使用TDZ或6-BA與NAA的組合能直接或間接誘導(dǎo)出體胚，以間接發(fā)生方式為主。體胚均為單細胞起源，經(jīng)球形胚，心形胚，魚