毛蕊鐵線蓮組織培養(yǎng)與植株再生研究.pdf

1、本研究以毛蕊鐵線蓮(Clematis lasiandra Maxim.)當年生幼嫩枝條的帶芽莖段、節(jié)間、葉片為試驗材料，通過正交試驗設計結合方差分析，探討了毛蕊鐵線蓮離體培養(yǎng)的關鍵影響因素，存在問題及解決方法，對毛蕊鐵線蓮無菌苗誘導、愈傷組織誘導及分化、愈傷組織防褐化方法、壯苗生根、煉苗與移栽等方面進行了研究，以得到最佳培養(yǎng)配方及培養(yǎng)程序，從而為建立毛蕊鐵線蓮的快繁體系、工廠化生產提供理論與技術依據(jù)。
　　 通過組織培養(yǎng)技術研究

2、得出：
　　 ①毛蕊鐵線蓮外植體組織培養(yǎng)最佳取材時間為3月，啟動率高，污染率低。帶芽莖段、節(jié)間和葉片啟動率分別為81.67％、66.67％和75.00％，污染率分別為15.00％、22.03％和13.33％。
　　 ②毛蕊鐵線蓮用0.1％的Hgcl2滅菌時間帶芽莖段為5min，節(jié)間為5min，葉片為3min。
　　 ③初代培養(yǎng)：帶芽莖段培養(yǎng)基以MS+6-BA1.00mg·L-1+NAA0.10mg·L-1為最適培

3、養(yǎng)基配方，啟動率高達90.56％，出芽指數(shù)1.75;節(jié)間愈傷誘導培養(yǎng)以MS+6-BA2.00mg·L-1+NAA0.10mg·L-1為最適宜培養(yǎng)基配方，出愈率83.30％;葉片愈傷誘導培養(yǎng)以MS+6-BA0.50mg·L-1+NAA0.10mg·L-1+2，4-D0.10mg·L-1為最適宜培養(yǎng)基配方，出愈率80.30％。
　　 ④繼代培養(yǎng)：適宜于帶芽莖段不定芽增殖培養(yǎng)的最優(yōu)組合是MS+6-BA1.00mg·L-1+NAA0.1

4、0mg·L-1，30d后增殖倍數(shù)達3.2;適宜于愈傷組織繼代增殖培養(yǎng)的最優(yōu)組合是MS+6-BA2.00mg·L-1+NAA0.10mg·L-1+2，4-D0.01mg·L-1，增殖率為24.45％;適宜于愈傷組織分化培養(yǎng)的最優(yōu)組合是MS+6-BA2.00mg·L-1+NAA0.05mg·L-1，分化率為36.67％。
　　 ⑤愈傷組織防褐化：MS+6-BA2.00mg·L-1+NAA0.10mg·L-1+2，4-D0.01mg·

5、L-1+PVP2g·L-1較好，褐化率僅為30.43％。
　　 ⑥有效苗的培養(yǎng)：以MS+蔗糖40g·L-1為最適宜培養(yǎng)基配方組合，植株生長健壯，有效苗率為65.21％。
　　 ⑦生根培養(yǎng)：以1/4MS+NAA0.50mg·L-1+AC1.00g·L-1+蔗糖15g·L-1為最適宜培養(yǎng)基配方組合，植株生長健壯，生根率最高，達86.10％，平均根數(shù)4.3條。
　　 ⑧煉苗與移栽：移栽基質以珍珠巖、蛭石、腐殖土以1：1