一種快腐菌劑對堆肥制作效果及微生物群落的影響.pdf

1、為研究接種快腐菌劑對堆肥制作效果以及堆肥微生物群落變化的影響，本研究通過向豬糞堆肥中接種快腐菌劑，研究快腐菌劑對堆肥制作效果的影響，并采用PCR-DGGE技術(shù)研究堆肥微生物的群落變化，研究結(jié)果如下：
　　 1.接種快腐菌劑對堆肥制作的影響
　　 和未接種對照相比，接種快腐菌劑加快堆肥前期升溫速度，堆體達(dá)到65℃時間從第5d提前到第3d，堆體最高溫度從67.3℃提高到72.7℃。60℃以上溫度維持時間從17d延長到21d。

2、接種快腐菌劑一方面，在堆肥制作前期(前5d)促進(jìn)易分解物質(zhì)可溶性糖和淀粉的分解，可溶性糖的分解從對照的36.7％提高到54.2％、淀粉從39.4％提高到80.2％，另一方面，在高溫階段促進(jìn)難分解物質(zhì)粗纖維的分解速率，從而在整個堆肥制作過程中加快總有機(jī)質(zhì)分解，總有機(jī)質(zhì)穩(wěn)定時期從對照的第30d提前到第25d，最終加快堆肥腐熟進(jìn)程。
　　 2.PCR-DGGE技術(shù)研究接種快腐菌劑對堆肥微生物群落變化的影響
　　 (1)通過提取

3、不同時期堆肥細(xì)菌總DNA，PCR擴(kuò)增細(xì)菌16S rDNA V3區(qū)和DGGE電泳，進(jìn)行DGGE條帶多樣性的分析，結(jié)果表明：堆肥過程中兩組堆肥DGGE條帶數(shù)量呈現(xiàn)出高-低-高的動態(tài)變化。表現(xiàn)為堆肥初期，DGGE條帶數(shù)較多，為20。進(jìn)入高溫前期，堆肥溫度迅速上升，大量中溫微生物死亡，而新的嗜熱微生物尚未大量繁殖，導(dǎo)致DGGE條帶數(shù)下降，接種與對照DGGE條帶數(shù)分別為16，14。隨著高溫的繼續(xù)，嗜熱微生物不斷出現(xiàn)，使得高溫后期DGGE條帶數(shù)再次

4、增多，接種與對照條帶數(shù)分別上升到22，23。至堆肥腐熟期與后熟期，堆溫保持穩(wěn)定，接種處理DGGE條帶數(shù)略有所下降，但兩處理組DGGE條帶數(shù)在堆肥腐熟期基本維持在一個較高水平。
　　 (2)通過堆肥樣品的PCR-DGGE指紋圖譜可以看出，整個堆肥過程中，兩組堆肥樣品DGGE優(yōu)勢條帶均發(fā)生明顯的變化。表現(xiàn)為部分優(yōu)勢條帶存在于堆肥的整個過程；部分優(yōu)勢條帶在高溫前期出現(xiàn)，隨著堆肥進(jìn)程逐漸消失；還有部分優(yōu)勢條帶只存在于堆肥腐熟期與后熟期。

5、說明隨著堆肥的進(jìn)程，微生物群落結(jié)構(gòu)發(fā)生了相應(yīng)變化。
　　 (3)采用Quantity one軟件對兩種處理不同階段堆肥8個樣品的PCR-DGGE圖譜進(jìn)行聚類分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：隨著堆肥進(jìn)程，堆肥微生物群落結(jié)構(gòu)明顯分為三個區(qū)域。第一個區(qū)域只分布一個樣品，為對照高溫前期，第二個區(qū)域分別為對照高溫后期、接種高溫前期與后期的三個樣品，第三個區(qū)域分別為對照與接種處理的腐熟期與后熟期的四個樣品。比較不同階段堆肥樣品微生物群落，發(fā)現(xiàn)高溫前期對照與