栽培石斛和白木香的遺傳多樣性分析.pdf

1、石斛屬(Dendrobium)植物是蘭科附生植物,其中的許多種是我國傳統(tǒng)名貴中藥材,具有很高的藥用價(jià)值。石斛生長(zhǎng)對(duì)環(huán)境要求較高,自然繁殖率低,加上人為過度采挖,導(dǎo)致其野生資源大量減少,供需矛盾日益突出。近年來,浙江、貴州、四川、云南省的一些地區(qū)大量發(fā)展石斛種植產(chǎn)業(yè),在資源保護(hù)和產(chǎn)品供應(yīng)上發(fā)揮了重要作用。在規(guī)?；茝V栽培過程中,由于種苗來源混雜,同時(shí)組培苗也出現(xiàn)多種類型分化等問題,導(dǎo)致石斛藥材的產(chǎn)量和質(zhì)量參差不齊,石斛優(yōu)良品種的選育勢(shì)在必

2、行。對(duì)栽培石斛遺傳多樣性進(jìn)行研究,是石斛種質(zhì)資源的保護(hù)與新品種的選育的前期基礎(chǔ)工作。
　　 本研究選擇石斛屬9個(gè)種的30份組培石斛種質(zhì)和栽培于云南西雙版納地區(qū)16個(gè)種的17份野生馴化石斛,采用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)其進(jìn)行遺傳多樣性和親緣關(guān)系研究。主要結(jié)果如下:
　　 30份組培石斛種質(zhì)的多態(tài)性位點(diǎn)比率(PPB)為94.71％。擴(kuò)增位點(diǎn)的有效等位基因數(shù)(Ne)為1.6230,Nei’s基因多樣性指數(shù)(H)為0.3612,S

3、hannon信息指數(shù)(Ⅰ)為0.5338。聚類分析結(jié)果將30份石斛分為石斛組和頂葉組兩個(gè)部分,這與形態(tài)學(xué)分類結(jié)果一致,9種石斛之間的聚類沒有出現(xiàn)交叉的情況。在Jaccard相似性指數(shù)分析結(jié)果表明,種間水平上,束花石斛與短棒石斛的相似度最高,為0.371；鐵皮石斛與兜唇石斛平均相似度最低,為0.173。聚類結(jié)果表明,多數(shù)種質(zhì)的種內(nèi)相似性和其采集地點(diǎn)一致。17份野生馴化石斛種質(zhì)的多態(tài)性位點(diǎn)比率(PPB)為94.76％。擴(kuò)增位點(diǎn)的有效等位基因

4、數(shù)(Ne)為1.6658,Nei’s基因多樣性指數(shù)(H)為0.3805,Shannon信息指數(shù)(Ⅰ)為0.5568。聚類結(jié)果大致可以分為石斛組、黑毛組、草葉組和項(xiàng)葉組4個(gè)部分,除石斛組的滇桂石斛和黑毛組的長(zhǎng)距石斛聚類到一起外,其他聚類的結(jié)果基本與形態(tài)學(xué)按組分類的結(jié)果一致。
　　 白木香(Aquilaria sinensis)是瑞香科沉香屬植物,其含樹脂的木材被稱為沉香,是我國傳統(tǒng)名貴藥材和名貴天然香料。白木香是我國生產(chǎn)藥材沉香的

5、唯一植物資源,由于野生資源銳減,1999年被列為國家二級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生植物野生及各地引種的白木香居群內(nèi)表型性狀存在一定的差異,分子標(biāo)記及DNA條形碼等分子技術(shù)在苗期不同種的區(qū)分以及種內(nèi)種質(zhì)的遺傳多樣性分析方面具有優(yōu)勢(shì),可在引種栽培和品種選育過程中發(fā)揮輔助作用。
　　 本研究以用ISSR、AFLP兩種分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)16份白木香種質(zhì)和1份云南沉香(Ayunnanensis)種質(zhì)進(jìn)行分析,目的在于了解白木香居群的遺傳多樣性水平、為白木香

6、資源的保護(hù)與開發(fā)利用提供理論依據(jù)。
　　 16份白木香和1份云南沉香種質(zhì),ISSR標(biāo)記檢測(cè)到的多態(tài)性位點(diǎn)比率(PPB)為73.95％,擴(kuò)增位點(diǎn)的有效等位基因數(shù)(Ne)為1.3269,Nei’s基因多樣性指數(shù)(H)為0.2059,Shannon信息指數(shù)(Ⅰ)為0.3237;AFLP標(biāo)記檢測(cè)到的多態(tài)性位點(diǎn)比率(PPB)為86.94％,擴(kuò)增位點(diǎn)的有效等位基因數(shù)(Ne)為1.4357,Nei's基因多樣性指數(shù)(H)為0.2647,Sha

7、nnon信息指數(shù)(Ⅰ)為0.4076。
　　 從結(jié)果來看,兩種分子標(biāo)記方法都能對(duì)供試樣本進(jìn)行有效的多樣性檢測(cè),均等得到遺傳多樣性水平較高的結(jié)論。
　　 兩種分子標(biāo)記的結(jié)果存在著一些共同的特征,首先,大多數(shù)聚類結(jié)果不能與采集地點(diǎn)相對(duì)應(yīng),這可能是種苗在不同地區(qū)遷移造成的；其次,白木香種內(nèi)的遺傳距離低于種間水平,說明之白木香和云南沉香間有較大的遺傳差異,從而在分子水平上證明了它們種的地位是明確的。通過Mantel檢驗(yàn),兩種標(biāo)記