我國主要葡萄產(chǎn)區(qū)霜霉菌對烯酰嗎啉和嘧菌酯的抗藥性分析.pdf

1、由葡萄單軸霜霉[Plasmopara viticola(Berk dt Curtis) Berl.Et de Toni]引起的葡萄霜霉病(Grapedowny mildew)是葡萄種植業(yè)中危害最嚴(yán)重的病害之一;葡萄霜霉病是流行性病害，嚴(yán)重時(shí)可對葡萄產(chǎn)業(yè)造成毀滅性影響。目前，田間采用抗性品種、栽培技術(shù)、生物防治以及化學(xué)防治等手段來防治葡萄霜霉病，其中化學(xué)防治為最重要的防治手段，而羧酸酰胺類殺菌劑和甲氧基丙烯酸酯類是最近幾年我國使用最廣泛的

2、殺菌劑?；瘜W(xué)藥劑的頻繁使用可能導(dǎo)致葡萄霜霉菌逐漸產(chǎn)生抗藥性，檢測和了解葡萄霜霉病菌株抗性頻率是指導(dǎo)田間化學(xué)藥劑科學(xué)使用的依據(jù)。本研究建立了檢測羧酸酰胺類殺菌劑和甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑抗性的分子方法—Taqman-MGB技術(shù)，并應(yīng)用該方法對遼寧省、山西省、云南省、河北省、湖北省、山東省及湖南省7個(gè)省行政區(qū)的重要葡萄產(chǎn)區(qū)的葡萄霜霉菌進(jìn)行了烯酰嗎啉和嘧菌酯的抗性頻率檢測，為該地區(qū)烯酰嗎啉和嘧菌酯的使用提供科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
　

3、　1.葡萄霜霉菌對烯酰嗎啉和嘧菌酯抗藥性分子檢測方法(Taqman-MGB)的建立
　　根據(jù)葡萄霜霉病菌對烯酰嗎啉抗性的基因突變位點(diǎn)（纖維素合酶3基因1105位密碼子）及葡萄霜霉菌對嘧菌酯抗性的基因突變位點(diǎn)（細(xì)胞色素氧化酶b基因的143位點(diǎn)），開發(fā)了Taqman-MGB抗藥性檢測技術(shù)。使用該技術(shù)，可檢測出DNA含量為0.00126 ng的樣本。相較于Tetra-primers ARMSPCR檢測技術(shù)，該方法特異性強(qiáng)、假陽性低。

4、r>　　2.2016年中國主要葡萄產(chǎn)區(qū)霜霉菌對烯酰嗎啉的抗性頻率檢測
　　利用研發(fā)的霜霉菌對烯酰嗎啉抗性Taqman-MGB檢測技術(shù)，對來自遼寧省北鎮(zhèn)市、山西省清徐縣、河北省威縣、山東省蓬萊市、湖北省公安縣、湖南省懷化市、云南省賓川縣、云南省永仁縣八個(gè)我國主要葡萄生產(chǎn)區(qū)域采集2127個(gè)葡萄霜霉病標(biāo)本進(jìn)行了檢測，結(jié)果顯示，抗性菌株有1087株，敏感菌株共1040株，總抗性頻率為51.1％，其中，北鎮(zhèn)、蓬萊、威縣的葡萄霜霉菌對烯酰嗎啉

5、的抗性頻率較高，高于80％，而清徐、賓川、懷化的菌株對烯酰嗎啉的抗性頻率較低，低于20％。
　　3.2016年中國主要葡萄產(chǎn)區(qū)葡萄霜霉菌對嘧菌酯抗性頻率檢測
　　利用研發(fā)霜霉菌對嘧菌酯抗性的Taqman-MGB檢測技術(shù)，對來自遼寧省北鎮(zhèn)市、山西省清徐縣、河北省威縣、山東省蓬萊市、湖北省公安縣、湖南省懷化市、云南省賓川縣、云南省永仁縣八個(gè)我國主要葡萄生產(chǎn)區(qū)域采集2373個(gè)葡萄霜霉菌標(biāo)本進(jìn)行了檢測，結(jié)果顯示，抗性菌株共1567株