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文檔簡(jiǎn)介
1、基因打靶技術(shù)是指外源DNA分子與受體生物基因組中的預(yù)定位點(diǎn)發(fā)生同源重組,從而改變生物體遺傳學(xué)特性的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。在基因打靶過(guò)程中,打靶載體同源序列的長(zhǎng)度是影響打靶效率的一個(gè)重要因素。水稻Bel是細(xì)胞色素P450家族中的單加氧酶基因,該基因所編碼的蛋白質(zhì)CYP81A6使水稻對(duì)除草劑苯達(dá)松產(chǎn)生抗性。
本研究使用兩種打靶載體pRB2、pRB4對(duì)粳稻保持系世錦B的Bel進(jìn)行基因打靶,使其成為苯達(dá)松敏感致死基因(bel)。這樣,一方面可
2、以研究同源序列長(zhǎng)度對(duì)打靶效率的影響,篩選出效率高的打靶載體。另一方面可以通過(guò)雜交的方法將保持系世錦B苯達(dá)松敏感致死基因(bel)引入兩系法和三系法雜交水稻不育系,用于水稻育種研究。
主要結(jié)果如下:
1、pRB2打靶載體總共使用了128.9g的水稻愈傷組織,共獲得255株轉(zhuǎn)化植株;pRB4打靶載體總共使用了163.2g的水稻愈傷組織,共獲得104株轉(zhuǎn)化植株。
2、pRB2打靶載體的分化率為17.6
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