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文檔簡介
1、本研究以十年生露天和三年生盆栽‘曙光'油桃(Prunus persica var.Nectarine cv.Shuguang.)花芽為試材,主要研究了桃樹花芽RNA提取、碳水化合物代謝及其相關(guān)基因的季節(jié)性表達(dá)及低溫處理下相關(guān)基因的表達(dá)變化;利用抑制差減雜交技術(shù)(SSH),以休眠期花芽RNA為Tester,以休眠解除期花芽RNA為Driver,構(gòu)建花芽休眠相關(guān)基因的差減cDNA文庫。主要結(jié)論如下:
1、經(jīng)改良CTAB法提取的
2、油桃花芽RNA,電泳檢測條帶清晰,28S與18S亮度比約為2:1,說明RNA完整性較好;核酸分光光度計檢測A260/A280為2.0左右,說明無蛋白等雜質(zhì)殘留,能滿足基因表達(dá)分析等后續(xù)試驗的要求;而Trizol試劑盒法所提取的RNA,幾乎檢測不到條帶,難以達(dá)到進(jìn)一步試驗的要求。
2、休眠期間可溶性糖(主要是蔗糖)含量尤其是在內(nèi)休眠后期顯著增加,淀粉含量則呈相反趨勢,在內(nèi)休眠后期含量降低,預(yù)示著內(nèi)休眠的結(jié)束;葡萄糖和果糖含量
3、稍有降低,變化不大;糖代謝相關(guān)基因AGPase、HisH3、HK1、SuSy、UGPase表達(dá)明顯不同:AGPase無明顯變化;HisH3和HK1在進(jìn)入內(nèi)休眠前有明顯上升,SuSy則與之相反;UGPase含量總體上呈上調(diào)趨勢,只是在進(jìn)入內(nèi)休眠后稍有下調(diào)。表明進(jìn)入內(nèi)休眠后,依賴HK1的糖信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑起重要作用,UGPase在促進(jìn)蔗糖合成上起著重要作用;4 ℃低溫處理后發(fā)現(xiàn):與細(xì)胞分裂有關(guān)的基因HisH3含量急劇升高,而后下降,說明細(xì)胞分裂
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