宣木瓜中三萜酸的提取分享及其體外抑菌特性研究.pdf

1、宣木瓜為藥食兩用果品，含有豐富的營養(yǎng)和多種生理活性物質(zhì)，尤其是其所含的齊墩果酸和熊果酸（五環(huán)三萜酸，皂甙類物質(zhì)）,具有顯著的藥理作用和生物活性。
　　 為了充分有效的利用宣木瓜資源，本研究對安徽宣城地區(qū)宣木瓜果實成分進行探討，研究了宣木瓜中五環(huán)三萜酸皂甙類物質(zhì)的提取、分離和純化工藝，并在此基礎(chǔ)上運用新型分離純化技術(shù)，制得高純度的齊墩果酸和熊果酸單體；另外，對齊墩果酸和熊果酸皂甙混合物的體外抑菌作用進行了研究，為宣木瓜的深加工及生

2、理活性成分的綜合利用提供了理論依據(jù)。
　　 本研究主要結(jié)果包括：
　　 1.宣木瓜果實成分研究結(jié)果表明，宣木瓜中化學(xué)成分包括水份、、總糖、有機酸、粗纖維、蛋白質(zhì)、齊墩果酸、熊果酸和果膠物質(zhì)，含量分別為85.031％、2.582％、2.924％、1.752％、1.264％、0.086％、0.040％、1.321％。
　　 2.建立了分析型HPLC 對宣木瓜中齊墩果酸和熊果酸同時定性定量分析的方法，即：色譜條件為：色

3、譜柱：Phenomenex C18(250mm×4.6mm I.d.，5μm)；流動相：V(乙腈)：V(純凈水)=95:5；柱溫：25℃；流速：0.5mL/min；檢測波長：210nm；進樣量：5μL。
　　 3.采用超聲波輔助提取法提取宣木瓜中五環(huán)三萜酸皂甙，正交結(jié)果得出最佳工藝組合為乙醇濃度85％，提取溫度55℃，提取時間20min，液料比1：20。對提取物進行多次純化，分析型HPLC 進行測定，結(jié)果表明：正丁醇水飽和溶液萃

4、取所得五環(huán)三萜酸純度為41.41％，經(jīng)大孔吸附樹脂層析法純化后五環(huán)三萜酸純度為71.98％，在此基礎(chǔ)上，采用反相硅膠柱法進行純化，得到樣品純度為 93.56％％的三萜酸。另外，經(jīng)同時測定宣木瓜中齊墩果酸和熊果酸含量，計算得知二者比例為 2.14～～2.22:1，RSD 值為1.39％。
　　 4.利用制備型HPLC 對反相硅膠柱法所得五環(huán)三萜皂甙混合物進行處理，通過分段收集的方法對皂甙混合物中的齊墩果酸和熊果酸進行分離，經(jīng)分析型

5、HPLC 檢測，結(jié)果表明制備型HPLC分離皂甙混合物的方法可行，制備后分別得到97.50％的齊墩果酸和 97.27％％熊果酸單體。建立的制備型 HPLC 最優(yōu)色譜條件為：流動相：色譜柱為pursuit XRs C18 (250 mm×212 mm，5μm)；甲醇：水=80∶20（V:V）；體積流量：20mL/min；檢測波長：210nm ；柱溫：25℃；進樣量：2.0mL。
　　 5.宣木瓜中五環(huán)三萜酸的體外抑菌結(jié)果表明，五環(huán)三

6、萜酸具有廣譜抗菌作用，對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均有抑制效果，其中對金黃色葡萄球菌的抑制效果最好；不同純度的五環(huán)三萜酸對枯草芽孢桿菌均有抑制作用，且純度越高抑菌效果越明顯；經(jīng)實驗測定，反相硅膠柱法純化后的宣木瓜五環(huán)三萜酸對枯草芽孢桿菌的最低抑菌濃度為6.25％，即1.56mg/mL。通過比較不同pH 值條件下純度為41.41％宣木瓜粗提物原液對枯草芽孢桿菌抑制效果的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：宣木瓜五環(huán)三萜酸在酸性條件下（pH3 左右）抑菌效果最