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文檔簡介
1、轉座子(TransposableElement,TEs),又稱跳躍因子,是能夠改變自身位置的一段DNA序列。Mariner-like轉座子(簡稱MLE轉座子)是一類在動物和植物中廣泛存在的DNA轉座子。
本課題組在分離得到的具有完整轉座酶結構的毛竹MLE座子的基礎上,1)采用釀酒酵母菌(Saccharomycescereviszae)檢測系統(tǒng),鑒定其轉座活性:將轉座酶CDS序列,構建到酵母供體載體pAG413-gal上,將
2、非自主MLE座子,構建到酵母表達載體pWL89a上,然后將這兩個重組載體共同轉化酵母,經(jīng)過選擇性培養(yǎng)、誘導篩選后,對活性酵母菌液PCR檢測,發(fā)現(xiàn)竹亞科的MLE座子在酵母中也能轉座,通過序列比對,發(fā)現(xiàn)其轉座后并沒產(chǎn)生轉座足跡。2)采用植物擬南芥(Arabidopsisthaliana)轉基因表達系統(tǒng),鑒定其在植物中活性表達:將非自主MLE專座子和轉座酶全長構建到擬南芥表達載體PCAMBIA1304+上,然后轉化到擬南芥中,篩選和鑒定轉基因
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