姜黃根莖內(nèi)生真菌多樣性及其對(duì)姜黃素的微生物轉(zhuǎn)化.pdf

1、內(nèi)生真菌指那些在其生活史中的某一定階段或全部階段生活在植物組織內(nèi)部，對(duì)宿主沒(méi)有造成明顯病害癥狀的真菌。內(nèi)生真菌在植物組織中普遍存在，并具有豐富的物種多樣性。研究表明藥用植物內(nèi)生真菌能產(chǎn)生與宿主植物相同或相似的抗菌、抗癌、抗氧化、抗糖尿病和免疫抑制作用等代謝產(chǎn)物，也可以產(chǎn)生其他新類型化合物，因此，內(nèi)生真菌成為一類重要的活性物質(zhì)篩選的微生物資源。姜黃是一種傳統(tǒng)藥用植物，其內(nèi)生真菌的研究還未見(jiàn)報(bào)道。本研究從姜黃植物根莖中分離內(nèi)生真菌、解析其物

2、種多樣性和生態(tài)分布規(guī)律，同時(shí)篩選能轉(zhuǎn)化姜黃素的內(nèi)生真菌及對(duì)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析。本研究結(jié)果將為探討姜黃與其內(nèi)生真菌的共生關(guān)系、內(nèi)生真菌的演替規(guī)律及為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用姜黃素類活性物質(zhì)奠定基礎(chǔ)。
　　采用表面消毒法分別于春、冬季從姜黃植物根莖中分離獲得51株內(nèi)生真菌，其中，春季33株、冬季18株；通過(guò)形態(tài)特征和基于 ITS序列的系統(tǒng)發(fā)育分析初步確定其分類地位。結(jié)果表明51株內(nèi)生真菌分別歸屬于5個(gè)綱(Hyphomycetes, Coelo

3、mycetes, Pyrenomycetes, Loculoascomycetes, Zygomycetes)、7個(gè)目(Tuberculariales, Hyphomycetales, Sphaeropsidales, Diaporthales, Hypocreales, Pleospor-ales, Mucorales)、8個(gè)科(Tuberculariaceae, Dematiaceae, Sphaeropsidaceae, Diap

4、orthaceae, Nectriaceae, Hypocreaceae, Botryosphaeriaceae, Mucoraceae)、8個(gè)屬(Fusarium, Gibberella, Alternaria, Phomopsis, Diaporthe, Nectria, Botryosphaeria, Mucor)。其中鐮刀菌屬 Fusarium(51.0％)和赤霉屬 Gibberella(17.6％)為優(yōu)勢(shì)菌群；春季分離的內(nèi)生真

5、菌分屬于7個(gè)屬(分離率82.5％)，而冬季的內(nèi)生真菌僅歸入4個(gè)屬(分離率45.0％)。結(jié)果表明姜黃植物中內(nèi)生真菌具有較豐富的物種和遺傳多樣性，在類群組成和分布上存在季節(jié)性差異，某些內(nèi)生真菌(Fusarium sp.)具有宿主偏好性。
　　采用薄層層析(TLC)和高效液相色譜(HPLC)技術(shù)篩選轉(zhuǎn)化姜黃素的內(nèi)生真菌，發(fā)現(xiàn)絲狀真菌 CLS23(Diaporthe sp.)能將姜黃素轉(zhuǎn)化成兩種姜黃素類似物；利用硅膠柱層析和制備型 HPL