2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、本試驗以大白菜“北京80號”、“油青矮腳45天菜心”、“四季菜心王”為試材,以帶柄子葉為外植體,研究了不同基因型、苗齡、激素組合、預處理條件及瓊脂濃度對白菜類作物不定芽再生的影響,建立了白菜類作物較高再生頻率的再生體系。采用農(nóng)桿菌介導法將質(zhì)粒pBⅠBast-gus-intro分別導入“油青矮腳45天菜心”、“四季菜心王”,利用GUS組織染色分析法研究了根癌農(nóng)桿菌菌液濃度、侵染時間、預培養(yǎng)時間和共培養(yǎng)時間等因素對菜心帶柄子葉遺傳轉(zhuǎn)化的影響

2、,探討了適宜菜心遺傳轉(zhuǎn)化的膦化麥黃酮、卡那霉素和抑菌抗生素的使用濃度,優(yōu)化了農(nóng)桿菌介導的遺傳轉(zhuǎn)化體系。以建立的遺傳轉(zhuǎn)化體系為基礎,采用農(nóng)桿菌介導法將不育基因orf138和orf222導入菜心。主要研究結果如下:
   1.建立了白菜類作物子葉高頻再生體系:‘北京80號’的最佳培養(yǎng)基為MS+5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+2mg/LAgNO3,再生頻率為84.1%;“油青矮腳45天菜心”和“四季菜心王”的最佳培養(yǎng)基為MS

3、+0.2mg/LTDZ+1mg/LNAA+2mg/LAgNO3,再生頻率分別為73.1%和83.2%。三個基因型的帶柄子葉在0.5~1mg/L2,4-D中預處理3d,再生頻率達84%以上。4~5d苗齡的外植體誘導不定芽效果較好。瓊脂的濃度以12g/L為宜。
   2.優(yōu)化了農(nóng)桿菌介導的遺傳轉(zhuǎn)化體系:菜心轉(zhuǎn)化過程中以膦化麥黃酮和卡那霉素為篩選劑,最適濃度分別為10mg/L和8mg/L;抑菌劑選用500mg/L的羧芐青霉素;用OD6

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