極端溫度下桉樹枝癭姬小蜂的差異蛋白表達(dá)分析.pdf

1、本研究以不同季節(jié)來源的桉樹枝癭姬小蜂(Leptocybe invasa)成蟲為試驗對象,利用暴露和馴化試驗,研究了其對極端溫度的耐受能力;并采用二維液相色譜結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)分析了桉樹枝癭姬小蜂在極端溫度下蛋白質(zhì)表達(dá)的變化,利用生物信息學(xué)的研究方法,獲知了各種差異蛋白的生物學(xué)功能。為蟲害預(yù)測防治提供了理論依據(jù),并促進(jìn)了桉樹枝癭姬小蜂蛋白質(zhì)組學(xué)的研究進(jìn)展。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)通過暴露試驗,證明桉樹枝癭姬小蜂成蟲具有一定的對極端溫

2、度的基礎(chǔ)耐受性,且與秋季種群相比,夏季種群具有更強(qiáng)的耐熱性和較弱的耐寒性,秋季種群則相反。
　　(2)冷馴化試驗除了得出前述結(jié)論之外,還反映了桉樹枝癭姬小蜂對低溫的誘導(dǎo)耐受性,并驗證了長時間的非致死溫度處理可對昆蟲產(chǎn)生冷害作用。
　　(3)參考極端溫度暴露試驗的結(jié)果,選擇4℃2h和40℃2h作為差異蛋白表達(dá)的誘導(dǎo)條件。利用飽和酚抽提法提取蟲體總蛋白,并利用定量標(biāo)記,結(jié)合2D SCX/RP-HPLC和LTQ/Orbitrap-

3、MS技術(shù)對極端溫度誘導(dǎo)后桉樹枝癭姬小蜂成蟲的蛋白質(zhì)表達(dá)情況進(jìn)行分析。共鑒定出差異蛋白339個,與常溫對照組相比,高溫組有67個上調(diào)表達(dá),32個下調(diào)表達(dá),低溫組有28個上調(diào)表達(dá),57個下調(diào)表達(dá),兩組之間有53個重合。
　　(4)經(jīng)過數(shù)據(jù)庫檢索,確定出其中90個蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能,主要為熱激蛋白,如熱激蛋白68和熱激同源蛋白70-1等;與蛋白質(zhì)代謝有關(guān)的蛋白,如40S核糖體蛋白S2、延伸因子1-α1和蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶等;和能量代謝有