轉(zhuǎn)PEPCK-1基因豬的生物安全評(píng)價(jià).pdf

1、隨著動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)在育種新材料創(chuàng)制、生物反應(yīng)器、醫(yī)藥、食品以及生物學(xué)基礎(chǔ)研究等方面的應(yīng)用日益廣泛,轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的生物安全問題也越來越為人們所關(guān)注。然而,由于對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的科學(xué)普及等工作開展不足、科學(xué)家與媒體以及大眾的溝通存在問題等原因,尤其是相關(guān)評(píng)價(jià)體系、內(nèi)容、方法的建立等還不健全,使得人們對(duì)這一嶄新領(lǐng)域知之相對(duì)甚少。在轉(zhuǎn)基因家畜中,水平基因轉(zhuǎn)移或轉(zhuǎn)基因的無意釋放對(duì)生物多樣性有何影響,以及基因修飾對(duì)健康動(dòng)物的潛在威脅、產(chǎn)品安全性等都是人們

2、非常關(guān)心的問題。
　　本研究以轉(zhuǎn)磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)-1基因的體細(xì)胞克隆母豬為研究對(duì)象,通過檢測(cè)其糞便、接觸的土壤以及血液中DNA是否發(fā)生了水平基因轉(zhuǎn)移評(píng)估其環(huán)境安全性;通過檢測(cè)血液生理生化指標(biāo)來評(píng)估自身健康狀況,以及轉(zhuǎn)基因豬母乳(PEPCK-1母乳)飼喂普通仔豬健康狀況,來評(píng)估轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的產(chǎn)品對(duì)其他動(dòng)物的影響。
　　為了評(píng)估轉(zhuǎn)基因豬的環(huán)境安全性,采取了三種方法:
　　1)利用PCR技術(shù)檢測(cè)水平基因轉(zhuǎn)移

3、,即考察是否有外源基因轉(zhuǎn)移到了普通豬血液、腸道菌或土壤微生物中。結(jié)果顯示,血液、腸道菌和土壤微生物的基因組中均未檢測(cè)到外源基因。
　　2)利用PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)基因陽性豬進(jìn)行本交過的公豬和飼喂轉(zhuǎn)基因豬母乳的仔豬是否發(fā)生水平基因轉(zhuǎn)移。結(jié)果表明,進(jìn)行本交的公豬和飼喂轉(zhuǎn)基因豬母乳的仔豬同樣沒有發(fā)生水平基因轉(zhuǎn)移。
　　3)利用生理生化的方法測(cè)定糞便和土壤中的營(yíng)養(yǎng)元素,進(jìn)而評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)基因陽性豬代謝變化和土壤營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn),土壤和糞便中

4、營(yíng)養(yǎng)元素的變化很可能是由土壤空間距離上差異和豬個(gè)體之間差異的引起的,而與外源基因無相關(guān)性。以上結(jié)果表明所研究的轉(zhuǎn)基因陽性豬對(duì)環(huán)境安全可能無影響。
　　為了考察轉(zhuǎn)基因陽性豬的健康狀況,開展了生長(zhǎng)性能測(cè)定、血常規(guī)、血清生理生化分析、免疫指標(biāo)測(cè)定、生殖激素水平監(jiān)測(cè)。結(jié)果如下:
　　1)在測(cè)定的生長(zhǎng)性能指標(biāo)中,轉(zhuǎn)基因陽性豬在2、3月齡時(shí)體重、日增重明顯高于普通豬,與對(duì)照組比較差異顯著。雖然4、5月齡差異不顯著,但其平均體重、日增重仍

5、然優(yōu)于對(duì)照組。
　　2)在測(cè)定的7項(xiàng)血常規(guī)指標(biāo)中,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組比較,在6月齡時(shí)白細(xì)胞(WBC)測(cè)定值差異顯著。其他未見顯著差異。
　　3)在測(cè)定的14項(xiàng)血清生理生化指標(biāo)中,6月齡甘油三酯(TG)含量實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異顯著,在3、7月齡總蛋白(TP)含量實(shí)驗(yàn)組顯著低于對(duì)照組,并且在整個(gè)試驗(yàn)階段TG含量均偏低。其他生化指標(biāo)轉(zhuǎn)基因陽性豬與對(duì)照組之間沒有顯著性差異。
　　4)免疫指標(biāo)中,IgG含量在6月齡實(shí)驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組

6、。
　　5)生殖激素水平檢測(cè)結(jié)果表明,A1轉(zhuǎn)基因母豬基本符合母畜在發(fā)情期內(nèi)生殖激素變化的規(guī)律,A2轉(zhuǎn)基因母豬可能受外界因素的影響出現(xiàn)了生殖機(jī)能紊亂,但其生殖激素水平處于正常范圍。由以上結(jié)果可初步推測(cè),除去繁殖性能方面,外源基因(PEPCK-1)對(duì)轉(zhuǎn)基因豬的身體健康未見明顯的影響。
　　最后,為了研究轉(zhuǎn)基因豬母乳對(duì)普通仔豬健康的影響,通過給仔豬飼喂轉(zhuǎn)基因豬母乳的試驗(yàn)組與飼喂普通乳的對(duì)照組來比較其差異,實(shí)驗(yàn)開始后每周稱量一次豬的