紅樹(shù)莓組培快繁體系與試管苗褐化控制技術(shù)研究.pdf

1、本文通過(guò)對(duì)紅樹(shù)苺哈瑞太茲(Heritage)篩選不同外植體，研究不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)紅樹(shù)苺芽誘導(dǎo)、繼代增殖和生根誘導(dǎo)的影響，得出最佳培養(yǎng)基配方，最后成功的馴化移栽，建立紅樹(shù)苺組培快繁體系。同時(shí)進(jìn)行紅樹(shù)苺試管苗褐化控制技術(shù)的研究，試圖找到控制紅樹(shù)苺組織培養(yǎng)各個(gè)階段褐化的有效措施。主要試驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1.紅樹(shù)苺組培快繁體系的建立
　　通過(guò)對(duì)外植體采集時(shí)間、芽類型和滅菌時(shí)間進(jìn)行完全隨機(jī)試驗(yàn)。試驗(yàn)得出非裸芽為最佳的外植體，而最適

2、合非裸芽的滅菌時(shí)間為8min。在初代芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基試驗(yàn)中通過(guò)6-BA、NAA和GA3進(jìn)行正交試驗(yàn)，得出最適合紅樹(shù)苺芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1 mg/L。在芽誘導(dǎo)中6-BA為主導(dǎo)因素。
　　在繼代增殖培養(yǎng)時(shí)通過(guò)6-BA、NAA和TDZ的正交試驗(yàn)，得出最適合紅樹(shù)苺試管苗繼代增殖的培養(yǎng)基為MS+6-BA0.5mg/L+ NAA0.1 mg/L+TDZ0.5mg/L，起主導(dǎo)作用的仍為6-BA，與試驗(yàn)結(jié)果一致。

3、
　　生根培養(yǎng)中通過(guò)對(duì)基本培養(yǎng)基類型、是否活性炭和IBA質(zhì)量濃度進(jìn)行研究，得出最適合紅樹(shù)苺試管苗生根的培養(yǎng)基為1/2MS+活性炭0.5 g/L+IBA0.2mg/L。
　　本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)馴化天數(shù)的研究，表明移栽前的馴化對(duì)紅樹(shù)苺試管苗至關(guān)重要，極大的提高了移栽成活率。最佳馴化時(shí)間為3-5d，移栽成活率達(dá)到93％。
　　2.紅樹(shù)苺試管苗褐化控制技術(shù)的研究
　　通過(guò)研究不同外植體和滅菌方法對(duì)紅樹(shù)苺褐化的影響。試驗(yàn)結(jié)果顯示

4、，分段式滅菌具有明顯優(yōu)勢(shì)，而非裸芽的褐化率低于裸芽和頂芽。因此，進(jìn)行紅樹(shù)苺組織培養(yǎng)的最佳外植體為非裸芽，滅菌時(shí)間為4min+3min。暗培養(yǎng)對(duì)褐化的影響不顯著，可以降低褐化程度，同時(shí)暗培養(yǎng)會(huì)導(dǎo)致紅樹(shù)苺芽誘導(dǎo)的時(shí)間變長(zhǎng)。
　　在繼代增殖中，本試驗(yàn)通過(guò)在培養(yǎng)基中添加不同濃度的活性炭、EDTA、檸檬酸和Na2S2O3，得出活性炭和檸檬酸對(duì)控制紅樹(shù)苺試管苗褐化有積極作用。隨著活性炭含量的增加，褐化程度在不斷降低，但是增殖倍數(shù)也在不斷降低，

5、認(rèn)為在控制紅樹(shù)苺褐化時(shí)，添加活性炭含量不宜超過(guò)2g/L。檸檬酸質(zhì)量濃度為6g/L時(shí)，褐化率達(dá)到最低，增殖倍數(shù)為7.17。添加EDTA不僅不會(huì)減輕褐化，反而增加了褐化率和褐化程度。添加Na2S2O3雖然會(huì)降低褐化率，但會(huì)加重褐化程度，使嚴(yán)重褐化的比例大幅增加。
　　當(dāng)培養(yǎng)基中的Mg、 Fe含量為MS的1/2時(shí)，植株葉片會(huì)變黃，當(dāng)Mg、 Fe含量提升為MS的2倍時(shí)，植株濃綠，無(wú)發(fā)黃現(xiàn)象。但Mg、 Fe加倍后會(huì)使褐化率升高為79.78％