30242.非洲爪蟾眼發(fā)育和晶狀體再生過(guò)程中pax6基因表達(dá)熒光定量pcr和免疫組化分析

1、蘭州大學(xué)研究生學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。學(xué)位論文中凡引用他人已經(jīng)發(fā)表或未發(fā)表的成果、數(shù)據(jù)、觀點(diǎn)等，均已明確注明出處。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的科研成果。對(duì)本文的研究成果做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。論文作者簽名：皋到盜日期：竺：工：三：竺工’蘭州大學(xué)研究生學(xué)位論文中文摘要以無(wú)

2、尾兩棲類(Anuran)非洲爪蟾(XenopusLaevis)胚胎及后肢芽期為實(shí)驗(yàn)材料，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RealTimePCRl法，SP免疫組織化分別測(cè)定非洲爪蟾胚胎期眼睛發(fā)育過(guò)程中及后肢芽期蝌蚪晶狀體再生過(guò)Pax6的表達(dá)。免疫組化結(jié)果顯示：非洲爪蟾蝌蚪晶狀體再生來(lái)源于外角膜層細(xì)胞；與對(duì)照組相比，晶狀體再生過(guò)程中Pax6蛋白在眼睛、角膜及晶狀的表達(dá)有明顯的變化：隨著晶狀體再生，外角膜Pax6蛋白表達(dá)由高到低，趨于穩(wěn)定；隨著晶狀體

3、再生，晶狀體內(nèi)Pax6蛋白由整個(gè)晶狀體表達(dá)，最后狀體上皮表達(dá)Pax6蛋白；Pax6蛋白表達(dá)免疫組化光密度分析結(jié)果顯示，體摘除后第1天，Pax6蛋白在外角膜中的表達(dá)量即顯著升高，Pax6蛋白累密度與對(duì)照組相比達(dá)到極顯著水平(PO01)；在晶狀體再生過(guò)程中Pax6蛋白存在兩個(gè)明顯的表達(dá)高峰，晶狀體再生第3天、7天。Pax6蛋白累積光密度測(cè)量結(jié)果顯示，晶狀體再生第3天累積光密度值是Pax6在眼睛內(nèi)表達(dá)的第一個(gè)高峰，與再生第1天、5天相比，達(dá)到

4、顯著水平(001P005)；再生第7天眼睛內(nèi)Pax6蛋白表達(dá)累積光密度值是Pax6在眼睛內(nèi)表達(dá)的第二個(gè)高峰，與再生第5天、9天相比，達(dá)到顯著水平(001P005)。熒光定量PCR結(jié)果顯示：在非洲爪蟾眼睛發(fā)育及晶狀體再生過(guò)程中Pax6基因mRNA分別存在兩個(gè)明顯的表達(dá)高峰，它們是胚胎20期、34期，晶狀體再生第3天、7天。以上研究結(jié)果表明，Pax6基因在非洲爪蟾眼睛發(fā)育和晶狀體再生過(guò)程中發(fā)揮晶狀體誘導(dǎo)、調(diào)控細(xì)胞增殖和晶狀體纖維分化的作用；