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1、該論文采用改良的實(shí)驗(yàn)RNA組學(xué)的方法,按照分子大小,分級(jí)分離和純化水稻小分子量RNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增,構(gòu)建了一個(gè)水稻小分子RNA的cDNA文庫(kù),獲得236個(gè)小分子RNA的cDNA插入片段,代表217個(gè)單一的水稻小分RNA序列,經(jīng)Blastn軟件從水稻基因數(shù)據(jù)庫(kù)搜索和序列同源性分析,124個(gè)代表79個(gè)單一分子的cDNA序列,在水稻基因組中具有完全的堿基匹配的基因位點(diǎn);經(jīng)過(guò)mfold程序進(jìn)行折疊和二級(jí)結(jié)構(gòu)分析,79個(gè)分子中,40個(gè)小分
2、子RNA的基因位點(diǎn)及其兩端的側(cè)翼序列能夠形成典型的莖環(huán)狀前體結(jié)構(gòu),而且,通過(guò)RNA分子的Northern印跡濾膜雜交,檢測(cè)出這40個(gè)分子在水稻的不同發(fā)育階段或者特定組織中穩(wěn)定地表達(dá),根據(jù)miRNA鑒定和識(shí)別的生源論原則和表達(dá)論準(zhǔn)則,這些分子符合miRNA分子的相關(guān)規(guī)則,被鑒定為水稻中新的miRNAs,按照miRNA的命名原則,將它們命名為miR1~miR39,其中水稻miR39和擬南芥miR39(miR171)為同源分子.水稻中新的mi
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