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1、分類號(hào)Q75學(xué)校代碼10129UDC577學(xué)號(hào)08210032兩個(gè)野大麥CBLs基因家族成員的研究StudiesofTwoMembersofCBLsGeneFamilyfromHdeumbrevisubulatum申請(qǐng)人:吳廣宇學(xué)科門類:理學(xué)學(xué)科專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向:植物生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:李國(guó)婧教授李瑞芬研究員論文提交日期:二〇一一年六月StudiesofTwoMembersofCBLsGeneFamilyfr
2、omHdeumbrevisubulatumAbstractCBLs(calcineurinBlikeproteins)aclassofplantspecificCa2senswhichwereiginallyidentifiedinA.thalianawerenamedastheyaresimilartoCNBNCSinanimals.CBLsplayimptantrolesinplant’sspecificgrowthdevelopm
3、entprocessesstressresponseswithitsinteractionproteinCIPK(CBLinteractingproteinkinase).ResearchontheCBLsiscurrentlyfocusedinArabidopsisricebuttherewasverylittlestudyontheotherplants.Shtsubulatebarley(Hdeumbrevisubulatum(T
4、rin.)Link)isoneofthemostsalttoleranthalophytesinTriticeaewhichhasevolvedthemechanismofadaptationtosalinityduringlongtermofevolution.Itisvaluablefresearchapplication.CloningCBLsinShtsubulatebarleynotonlyshowstheeticalmean
5、ingsbutalsobenefitstopracticalapplicationprovidingpotentialcidategenesfimprovingstressestlerancebygeictransfmationinplant.HereweisolatedtwogenesinShtsubulatebarleynamethemHbCBL1HbCBL2.Weanalyzedtheresponseofthegenestodro
6、ughtstressessubcellularlocationtheirfunctionthemainprogressesareasfollows:1.ClonesequenceanalysisofHbCBLs:RTPCRwasusedtoclonefulllengthofHbCBL1HbCBL2.UsingsoftwareanalysisweknowthatbothHbCBL1HbCBL2hasCBLspeicificCa2bindi
7、ngsiteEFhsHbCBL1hasaNmyristoylationsiteatitsNterminaldomain.2.Fussionexpressvectswereconstructedtransfmedintoonionepidermalcellsbyparticlebombardmentrespectively.ThesevectswerealsotransfmedintoArabidopsisbyflaldip.Confoc
8、alobservationsshowedthatHbCBL1accumulatedinplasmamembraneaswellasinnucleusHbCBL2wasaccumulatedintonoplast.3.UsingNouthernblottoanalysistheexpressionofHbCBLswhileunderdroughtstess.WithoutanystressHbCBL1HbCBL2haveasmallamo
9、utofbackgroundespressionexpressioninrootsismestrongthanintheleaf.BythetreatmentofPEG6000mannitolespressionsofHbCBL1HbCBL2startedtodiminishastheprocessingtimewentby.4.IndertoexplethebiologicalfunctionofHbCBLsseveraloverex
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