油菜素內(nèi)酯對(duì)棉花纖維分化發(fā)育的影響及其調(diào)控基因bzr1的轉(zhuǎn)化.pdf

1、油菜素內(nèi)酯是一種廣泛存在于植物體內(nèi)的激素,它對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育具有十分重要的作用,其主要的生理功能是:促進(jìn)植物細(xì)胞的分裂、分化,促進(jìn)植物莖的伸長(zhǎng),促進(jìn)花粉管的分化,增強(qiáng)植物的抗逆性,參與光形態(tài)建成.該實(shí)驗(yàn)通過(guò)棉花胚珠體外培養(yǎng)的方法探討了油菜素內(nèi)酯對(duì)棉花纖維細(xì)胞分化發(fā)育的影響,并利用基因槍的方法把bzr1-CFP融合基因轉(zhuǎn)入棉花胚珠,探討了報(bào)告基因CFP在棉花纖維研究中的應(yīng)用.所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果主要為:(1)在BT培養(yǎng)基中加入不同濃度的油菜素內(nèi)酯

2、,分別為0、0.005、0.05、0.5、5、50μM,研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)油菜素內(nèi)酯的濃度在0與0.5μM之間時(shí),棉花纖維的長(zhǎng)度對(duì)濃度的升高而增長(zhǎng),隨后逐漸變短,當(dāng)油菜素內(nèi)酯的濃度為50μM時(shí)棉花胚珠不能長(zhǎng)出纖維.通過(guò)生物統(tǒng)計(jì)的方法知,在此濃度下生長(zhǎng)的棉花纖維的長(zhǎng)度與對(duì)照相比為顯著差異,可見(jiàn)當(dāng)油菜素內(nèi)酯的濃度為0.5μM時(shí),能有效的促進(jìn)棉花纖維的伸長(zhǎng),在上述六種BR濃度的BT培養(yǎng)基中分別培養(yǎng)花前一天和花后一天的棉花胚珠,結(jié)果發(fā)現(xiàn)花后一天的棉花胚

3、珠可以正常的分化發(fā)育出棉花纖維,而花前一天的棉花胚珠在所有濃度的培養(yǎng)基中均不能分化發(fā)育出纖維.通過(guò)掃描電鏡觀(guān)察可知,花前一天的棉花胚珠表皮細(xì)胞還沒(méi)有完全分化成纖維細(xì)胞,而花后一天的胚珠表皮細(xì)胞已分化出明顯的纖維突起,雖然油菜素內(nèi)酯能夠有效地促進(jìn)棉花纖維的伸長(zhǎng),但是當(dāng)棉花纖維細(xì)胞尚未分化完全時(shí),它不能促進(jìn)棉花纖維細(xì)胞的分化.(2)在BT培養(yǎng)基中同時(shí)加入0.5μM的油菜素內(nèi)酯和5μM的赤霉素,培養(yǎng)花后一天的棉花胚珠,另設(shè)三個(gè)對(duì)照,分別為:加

4、有0.5μM的油菜素內(nèi)酯、5μM的赤霉和不加任何激素的BT培養(yǎng)基,發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中同時(shí)加入兩種激素時(shí),棉花纖維的長(zhǎng)度比其它三個(gè)對(duì)照中生長(zhǎng)的棉花纖維的長(zhǎng)度均長(zhǎng),可見(jiàn)油菜素內(nèi)酯與赤霉素在棉花纖維生長(zhǎng)的過(guò)程中是相互促進(jìn)的作用,其共同作用能更有效的促進(jìn)棉花纖維的伸長(zhǎng).(3)利用基因槍的轉(zhuǎn)化方法把CFP與油菜素內(nèi)酯的調(diào)控基因bzr1的融合基因轉(zhuǎn)入了棉花胚珠,探索CFP報(bào)告基因在棉花纖維中的應(yīng)用.7天時(shí)可以檢測(cè)到報(bào)告基因CFP表達(dá)的蛋白質(zhì),而在9天時(shí)