球孢白僵菌孢子粉生產(chǎn)、制劑和貯存技術(shù)的改進(jìn)及其淀粉酶特性測(cè)定.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文球孢白僵菌孢子粉生產(chǎn)、制劑和貯存技術(shù)的改進(jìn)及其淀粉酶特性測(cè)定姓名：張麗靖申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：馮明光20030401摘要球孢白僵菌(BP?！皏Pr蛔6哪5脅Hd(Bals鋤o)Vuillemin)是一種經(jīng)典的絲孢類(lèi)昆蟲(chóng)病原真菌，在農(nóng)林害蟲(chóng)的微生物防治中廣受注目，國(guó)外已有多種商品制劑注冊(cè)生產(chǎn)。然而，球孢白僵菌的孢子粉生產(chǎn)、制劑及保存方面的技術(shù)問(wèn)題從未獲得圓滿解決，成為影響其深度開(kāi)發(fā)和應(yīng)用的基本因素。

2、在本實(shí)驗(yàn)室對(duì)一殺蚜球孢白僵菌株(sG8702)的前期工作基礎(chǔ)之上，本研究探索了改進(jìn)該菌高純度孢子粉生產(chǎn)、孢子乳懸劑配方及常溫貯存的技術(shù)途徑，并首次測(cè)定了其產(chǎn)淀粉酶的特性，以期有助于推動(dòng)我國(guó)真菌殺蟲(chóng)劑技術(shù)的不斷進(jìn)步。固體培養(yǎng)與產(chǎn)孢條件優(yōu)化以熟化度適中的大米作為固相產(chǎn)孢基質(zhì)，研究了米料厚度、氮源營(yíng)養(yǎng)添加劑及其濃度對(duì)球孢白僵菌氣生分生孢子的產(chǎn)量、含水量及活孢率的影響。結(jié)果表明，在直徑15cm的培養(yǎng)皿中用50g大米生產(chǎn)的孢子粉含水量最低。在大米

3、中添加蛋白胨、硝酸鉀及硝酸銨，3種氮源都能提高孢子粉產(chǎn)量及活孢率，但相互間差異不顯著。濃度試驗(yàn)表明，在大米中添加O1％的KN03最有利于產(chǎn)孢。大米連續(xù)二次發(fā)酵利用，產(chǎn)粉量達(dá)到573～679mg幢，可大幅提高大米的利用率。在擴(kuò)大培養(yǎng)中，大米最大產(chǎn)粉量達(dá)555m∥g，產(chǎn)孢數(shù)為583x109個(gè)孢子值；所獲孢子粉的含孢量達(dá)1481011個(gè)孢子幢含水量?jī)H525％，活孢率達(dá)9872％。這些指標(biāo)說(shuō)明，用此法生產(chǎn)球孢白僵菌分生孢子粉，具有產(chǎn)量高、粉質(zhì)優(yōu)

4、、活力強(qiáng)、含水量低及經(jīng)濟(jì)實(shí)用等優(yōu)點(diǎn)，為合理利用庫(kù)存低值陳米生產(chǎn)殺蟲(chóng)真菌高純度孢予粉開(kāi)辟了新的途徑。胞外淀粉酶的產(chǎn)生及其特性為探索該菌產(chǎn)淀粉酶的特性及條件，從二次旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)的13種培養(yǎng)液中，篩選出適合該菌產(chǎn)淀粉酶的培養(yǎng)液配方，其主要成分為可溶性淀粉O3％，葡萄糖、蛋白胨和酵母粉各05％。將含106個(gè)分生孢子／mL的該培養(yǎng)液恒溫(251℃)振蕩(120r／min)培養(yǎng)35d，菌絲生物量為167m∥mL，胞外淀粉酶產(chǎn)量達(dá)5271U／mg菌絲