擬南芥耐硒突變體的篩選和鑒定.pdf

1、以擬南芥(Arabidopsisthaliana)為材料，對其野生型植株進(jìn)行了不同濃度Na2SeO3的試驗(yàn)，分析了硒鹽對植株生長的影響。通過用EMS進(jìn)行誘變，對收獲的M2代種子應(yīng)用根彎曲法和發(fā)芽法篩選耐Na2SeO3的突變體，獲得了以下結(jié)果： 適量Na2SeO3可促進(jìn)擬南芥植株的生長，1mg/LNa2SeO3處理時植株的根長、下胚軸長和鮮重指標(biāo)均比對照高；但過量硒則抑制植株生長，10mg/L以上濃度Na2SeO3處理時植株的有關(guān)

2、生長指標(biāo)均比對照顯著降低，生長狀況較差。 擬南芥植株不同部位吸收硒的能力存在較大差別，在一定濃度的硒鹽(≤15mg/LNa2SeO3)條件下，其不同部位的含硒量隨濃度的升高而升高，且硒含量分布為根＞葉＞莖。一定濃度的硒鹽可顯著提高植株體內(nèi)的GSH-Px的活性，并使SOD的活性得到一定程度的增強(qiáng)，兩者的分布均表現(xiàn)為根＞葉＞莖。從各部位累積硒的情況來看，10mg/LNa2SeO3培養(yǎng)時最有利于其體內(nèi)硒含量的積累，根、葉和莖的含硒量均

3、達(dá)到最大值，分別為183.52μg/gDW、163.35tg/gDW和127.62μg/gDW。此時，植株的GSH-Px和SOD的活性也有較大值。 在不同濃度Na2SeO3下進(jìn)行擬南芥的根彎曲和發(fā)芽試驗(yàn)，找到了野生型擬南芥生長的臨界硒鹽濃度，并建立了耐硒突變體的篩選體系：在40mg/LNa2SeO3的選擇壓力下采用根彎曲法篩選，篩選時間確定為6d。 對106萬粒M2代種子在40mg/LNa2SeO3的選擇壓力下進(jìn)行了篩選

4、，得到77株可能的突變體。其中，采用根彎曲法從25萬粒M2代種子中篩選得到22株，采用發(fā)芽法從80萬粒M2代種子中篩得55株。再在同樣的選擇壓力下對M3代進(jìn)行根彎曲法的篩選，發(fā)現(xiàn)了2株的M3代幼苗根仍表現(xiàn)出明顯的彎曲，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了初步鑒定。 通過對突變體(15A)的M4代和野生型進(jìn)行的硒鹽耐性試驗(yàn)，進(jìn)一步證實(shí)了突變體有較強(qiáng)的耐硒能力。測定了20d生長后植株的硒含量，發(fā)現(xiàn)突變體(15A)的硒含量比野生型高，15mg/LNa2S