小麥-偃麥草新種質(zhì)的分子細胞學研究.pdf

1、本文采用遠緣雜交和染色體工程方法將茸毛偃麥草遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到小麥，創(chuàng)制了一個部分雙二倍體TE-3以及轉(zhuǎn)移了偃麥草抗病性Y176株系材料。綜合利用醇溶蛋白和谷蛋白、RAPD、SCAR(sequencecharacterizedamplifiedregoin)、根尖染色體計數(shù)觀察、C-分帶和基因組原位雜交(GISH)分析，對這些小偃麥新種質(zhì)進行了鑒定，結(jié)果如下： 1.醇溶蛋白和谷蛋白分析表明，TE-3和部分Y176株系導入了源自茸毛偃

2、麥草特異蛋白帶。 2.用80個RAPD引物(H、M、P和O組)進行PCR擴增，得到3個(H18，H20，M04)偃麥草特異引物。對其中一個引物OPM041430擴增的特異片段分析，初步表明該片段是偃麥St基因組區(qū)域的特異標記，將該特異片段分離回收、克隆、測序，其序列為1423bp(序列登錄號：AY618664)，根據(jù)測序結(jié)果重新設(shè)計引物一對引物，成功地轉(zhuǎn)化RAPD標記為SCAR標記，并利用SACR標記對我們選育的小偃麥新種質(zhì)進行

3、了鑒定。 3.對具有茸毛偃麥草特異蛋白帶和SCAR標記的株系的抗條銹病材料Y176-3系進行細胞學分析，染色體計數(shù)及花粉母細胞減數(shù)分裂表明，Y176-3有44條染色體，有2對隨體，在減數(shù)分裂中期能觀察到22Ⅱ。利用C帶分析，觀察到Y(jié)176-3中具有一對來自偃麥草的端部有強帶的短染色體。 4.進一步用小麥的總基因組DNA做封組，擬鵝觀草(Pseudoroegneriaspicata)DNA作探針，對Y176-3系進行了原位