肌球蛋白活化T細胞轉輸誘導心肌炎癥反應和心肌重塑研究.pdf

1、第一部分 肌球蛋白活化T細胞誘導轉輸大鼠心肌自身免疫性炎癥反應 目的:心肌肌球蛋白是啟動免疫應答的自身抗原。心肌梗死后釋放肌球蛋白，機體可以產(chǎn)生針對該蛋白的自身抗體，通過過繼轉輸探討心肌肌球蛋白活化T淋巴細胞誘導的心肌炎癥反應。 方法:分離、提純大鼠脾臟樹突狀細胞和T淋巴細胞，分為兩組在體外混合培養(yǎng)：活化組加入大鼠心肌肌球蛋白；未活化組不加大鼠心肌肌球蛋白。將活化或未活化的T淋巴細胞分別經(jīng)鼠尾靜脈轉輸入同源大鼠體

2、內(nèi)。分別在轉輸后3天、1周末、4周末和8周末處死大鼠，觀察心肌的病理改變和超聲心動圖變化。 結論:心肌肌球蛋白活化的T淋巴細胞介導心肌梗死后心肌自身免疫性炎癥反應。 第二部分 肌球蛋白活化T細胞誘導轉輸大鼠心肌細胞因子的表達 目的:心肌肌球蛋白是啟動免疫應答的自身抗原。心肌梗死后釋放肌球蛋白，機體可以產(chǎn)生針對該蛋白的自身抗體，通過過繼轉輸探討心肌肌球蛋白活化T淋巴細胞轉輸大鼠心肌組織細胞因子表達。

3、 方法:體外分離同源大鼠T細胞和樹突狀細胞，按是否與大鼠心肌肌球蛋白共培養(yǎng)而分為兩組(活化組和未活化組)。然后將活化的和未活化的T細胞分別經(jīng)鼠尾靜脈過繼轉輸給同源大鼠，觀察3天、1周末、4周末和8周末的心肌病理改變和血流動力學指標的變化；分別采用免疫組織化學和逆轉錄聚合酶鏈(RT-PCR)的方法檢測心肌組織白細胞介素(IL)-1β、IL-6、腫瘤壞死因子(TNF)-α及IL-10蛋白和mRNA的表達。 結論:肌球蛋白活化的T細胞

4、介導心肌梗死后炎癥反應，同時也促使心肌細胞致炎因子表達，共同導致AMI后心肌細胞的損傷。 第三部分 肌球蛋白活化T細胞誘導轉輸大鼠心肌重塑相關基因的表達 目的:心肌肌球蛋白是啟動免疫應答的自身抗原。心肌梗死后釋放肌球蛋白，機體可以產(chǎn)生針對該蛋白的自身抗體，通過過繼轉輸探討心肌肌球蛋白活化T淋巴細胞轉輸大鼠心肌重塑相關基因的表達。 方法:體外分離、提純同源大鼠脾臟樹突狀細胞和T淋巴細胞，分為兩組在體外混合培

5、養(yǎng)：活化組加入大鼠心肌肌球蛋白；未活化組不加大鼠心肌肌球蛋白。將活化或未活化的T淋巴細胞分別經(jīng)鼠尾靜脈轉輸入健康同源大鼠體內(nèi)。分別在轉輸后3天、1周末、4周末和8周末處死大鼠，觀察心肌的病理改變，通過TUNEL法檢測大鼠心肌細胞凋亡；逆轉錄聚合酶鏈(RT-PCR)的方法檢測心肌組織胚胎基因(α、β-MHC)和基質金屬蛋白酶(MMP)-2及其抑制劑(TIMP-2)mRNA的表達。 結論:肌球蛋白活化的T淋巴細胞介導心肌重塑相關基因