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1、目的:腎小管間質(zhì)纖維化(tubulointerstitial fibrosis,TIF)是幾乎所有腎臟疾病發(fā)展至終末期腎衰的共同病理表現(xiàn)。研究證實(shí),基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和金屬蛋白酶組織抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1) 的表達(dá)與活性異常在小管間質(zhì)損傷過程中發(fā)揮重要作用。近年來發(fā)現(xiàn)桂枝茯苓丸在部分腎臟
2、損傷中起保護(hù)作用,其機(jī)制尚待進(jìn)一步證實(shí)。本實(shí)驗(yàn)旨在通過單側(cè)輸尿管梗阻誘導(dǎo)TIF動(dòng)物模型,觀察MMP-9、TIMP-1在TIF過程中的表達(dá)以及桂枝茯苓膠囊(其成分同桂枝茯苓丸,主要由桂枝、茯苓、芍藥、牡丹皮、桃仁等組成)對(duì)MMP-9、TIMP-1表達(dá)的影響,并初步探討桂枝茯苓膠囊腎臟保護(hù)作用的可能機(jī)制。 方法:雄性3月齡SD大鼠72只,隨機(jī)分為:假手術(shù)組(24只),模型組(24只),預(yù)防組(24只)。行單側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)建立單側(cè)輸尿
3、管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UU0)誘導(dǎo)腎小管間質(zhì)纖維化模型。預(yù)防組大鼠加以125mg/kg桂枝茯苓膠囊溶于生理鹽水灌胃,日兩次,模型組及假手術(shù)組大鼠每天以等體積生理鹽水灌胃。分別于實(shí)驗(yàn)第7天、14天、21天時(shí)各組隨機(jī)處死8只大鼠,行功能學(xué)檢測(cè)、光鏡下觀察腎臟組織病理學(xué)改變、免疫組織化學(xué)法(SABC法)評(píng)價(jià)腎臟MMP-9、TIMP-1的表達(dá)變化。結(jié)果①7天及14天時(shí)模型組、預(yù)防組大鼠血BUN、
4、Cr與同時(shí)間點(diǎn)假手術(shù)組比較無顯著差異。21天時(shí),模型組、預(yù)防組血BUN、Cr均較假手術(shù)組明顯升高(P<0.01),模型組、預(yù)防組大鼠血BUN、Cr較前一時(shí)間點(diǎn)明顯升高(P<0.01),且模型組較預(yù)防組升高(P<0.05,P<0.01)。各時(shí)間點(diǎn)假手術(shù)組大鼠血BUN、Cr無明顯變化。②7天時(shí)模型組、預(yù)防組即有腎小管間質(zhì)損害;模型組、預(yù)防組自身對(duì)照腎小管間質(zhì)損害均較前一時(shí)間點(diǎn)加重(P<0.01), 7天、14天、21天時(shí)預(yù)防組腎小管間質(zhì)損害
5、均較模型組為輕(P<0.01)。③7天時(shí)模型組、預(yù)防組大鼠腎臟MMP-9表達(dá)量升高,至14天時(shí)達(dá)高峰,之后下降,但21天時(shí)模型組、預(yù)防組大鼠腎臟MMP-9表達(dá)仍高于假手術(shù)組(P<0.01),14天、21天時(shí)預(yù)防組均高于模型組(P<0.01),而7天時(shí)預(yù)防組MMP-9表達(dá)低于模型組(P<0.01)。④各時(shí)間點(diǎn)模型組、預(yù)防組大鼠腎臟TIMP-1的表達(dá)均高于假手術(shù)組(P<0.01),且預(yù)防組均低于模型組(P<0.01),模型組、預(yù)防組自身對(duì)照
6、均較前一時(shí)間點(diǎn)升高(P<0.01),21天時(shí)表達(dá)量最高。⑤腎小管間質(zhì)損害與TIMP-1表達(dá)量呈正相關(guān)(r=0.901,P<0.01),與MMP-9/TIMP-1比值呈負(fù)相關(guān)(r=-0.937,P<0.01)。 結(jié)論:桂枝茯苓膠囊能減輕梗阻腎組織的病理損害,延緩腎小管間質(zhì)纖維化的進(jìn)程。TIMP-1可能是腎間質(zhì)纖維化形成的促進(jìn)因素之一并參與了纖維化形成的全過程。MMP-9/TIMP-1比值的下降參與了TIF的發(fā)生機(jī)理。桂枝茯苓膠囊可
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