Oct-4在結直腸癌中的表達及意義.pdf

1、背景和目的:結直腸癌(Colorectal Cancer,CRC)是常見的惡性腫瘤之一,大腸癌在中國的發(fā)病率近來有上升的趨勢,在惡性腫瘤中已排在第四位,占西方國家癌癥發(fā)病率的第二位,在男女性惡性腫瘤死因中都居于前列,復發(fā)轉移是患者死亡的主要原因,發(fā)病機制尚不完全清楚。很多研究者認為腫瘤組織中存在少部分腫瘤干細胞(cancer stem cells,CSC),CSC和胚胎干細胞(embroynic stem cells,ESC)一樣具有自

2、我更新,無限增殖,多向分化的潛能,是惡性腫瘤的起始細胞并維持腫瘤的生長,少數(shù)處于休眠狀態(tài)的腫瘤干細胞對放、化療不敏感,成為腫瘤復發(fā)轉移的根源。隨著腫瘤干細胞概念的提出,胚胎干細胞因子Oct-4、Sox-2等近年來在惡性腫瘤領域成為研究熱點。已有研究提出結直腸癌中存在腫瘤干細胞,這是結直腸癌發(fā)生及復發(fā)轉移的根源。Oct-4(Octamer binding factor4)是一個在全能性細胞或胚胎干細胞中特異性表達的轉錄因子,參與干細胞的自

3、我更新,在多能性細胞和生殖細胞正常發(fā)育過程的起始、維持和分化過程中均發(fā)揮作用,對胚胎發(fā)育早期階段有特異性作用。Oct-4在哺乳動物胚胎干細胞和胚胎生殖細胞中表達,在胚胎和生殖細胞腫瘤中Oct-4表達顯著增高,在分化的或成熟的組織中表達水平降低或消失。近期研究發(fā)現(xiàn),成體干細胞中也有Oct-4的表達,體細胞腫瘤中也有Oct-4陽性表達的報道,但細胞分化后Oct-4表達消失。所以,本研究在于通過對結直腸癌組織中Oct-4蛋白表達的免疫組織化學

4、的研究,探討其表達規(guī)律及其表達與結直腸癌臨床病理因素的相關性,及與結直腸癌化療療效、預后復發(fā)的關系,為臨床診治及預后評價提供依據(jù)。
　　方法:用免疫組化法測定山羊多克隆抗體Oct-4在結直腸癌組織中的表達,免疫組織化學采用鏈霉素抗生物素.過氧化物酶(SP)法,步驟簡述如下:活檢組織常規(guī)石蠟包埋、切片,所有石蠟切片按照4μm切片,切片常規(guī)脫蠟,抗原修復,3％H2O2孵育30min,再滴加山羊血清封閉非特異性抗原30min,滴加Oct

5、-4山羊多克隆抗體一抗,4℃過夜,再滴加二抗,37℃孵育30min,然后DAB顯色,固定。采用未免疫的相應血清取代一抗做陰性對照,采用已知陽性切片做陽性對照,陽性顯色為核棕色。應用SPSS10.0軟件進行統(tǒng)計學處理,采用χ2檢驗,取p<0.05為檢驗水準。
　　結果:1.Oct-4陽性表達在細胞核呈集中分布,呈深棕色,結直腸癌病人細胞核呈明顯的深棕色,Oct-4表達呈陽性,結直腸癌中Oct-4陽性表達率為30.63％(49/160

6、),在正常結直腸粘膜上皮組織未發(fā)現(xiàn)Oct-4陽性表達,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　2.低分化的結直腸癌Oct-4陽性表達率為44.12％(30/68),中分化組Oct-4陽性表達率27.98％(17/63),高分化的結直腸癌Oct-4陽性表達率6.89％(2/29)。低分化組Oct-4陽性表達率>中分化組>高分化組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　3.Dukes’D期的Oct-4陽性表達率最高,為61.9

7、％(13/21),Dukes’C期的Oct-4陽性表達率為41.67％(25/60),Dukes’B期Oct-4表達率20.41％(10/49),Dukes’A期Oct-4表達率3.33％(1/30),差異有統(tǒng)計學意義。
　　4.Oct-4的表達與年齡、性別、病理類型無明顯相關,差異無統(tǒng)計學意義。
　　5.Oct-4在結直腸癌有淋巴結轉移組的陽性率為43.38％(34/79),在無淋巴結轉移組的陽性表達率為18.52％(15

8、/81).兩者之間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　6.Dukes C期患者中Oct-4陽性表達組的2年內(nèi)有復發(fā)或轉移發(fā)生率(92％,23/25)明顯高于Oct-4陰性表達(65.71％,23/35)的患者,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　結論:1.Oct-4蛋白表達可能與結直腸癌的發(fā)生相關。
　　2.Oct-4蛋白表達和陽性表達程度可能與結直腸癌的惡性程度呈正相關,與結直腸癌Dukes分期、淋巴結轉移呈