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1、背景和目的: 齲病(Dental Caries)是在以細(xì)菌為主的多因素影響下,牙體硬組織發(fā)生慢性進(jìn)行性破壞的一種疾病,是最為常見(jiàn)的一種口腔疾病。世界衛(wèi)生組織已將其與癌癥和心血管疾病并列為危害人類(lèi)健康的三大疾病。牙菌斑是齲病發(fā)生過(guò)程中不可缺少的微生態(tài)環(huán)境。菌斑中細(xì)菌代謝碳水化合物產(chǎn)生的酸性代謝產(chǎn)物,可導(dǎo)致牙釉質(zhì)脫礦、溶解,進(jìn)而形成齲病。因此,只要能有效控制菌斑,就可以有效控制齲病的發(fā)生和發(fā)展。藥物牙膏作為控制菌斑的方法之一,已在口
2、腔自我保健措施中廣泛應(yīng)用,在牙膏中添加適宜的抗齲藥物可以作為一種較為理想的防齲途徑。 近年來(lái),天然藥物作為醫(yī)療保健的一種替代選擇,已經(jīng)成為新藥開(kāi)發(fā)中的一種重要策略。蜂膠作為一種具有廣泛藥理作用的天然產(chǎn)物,能夠抑制主要致齲菌的生長(zhǎng)和粘附,并能有效控制菌斑形成,降低齲病發(fā)生。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道蜂膠無(wú)毒副作用,使用安全,不產(chǎn)生耐藥性。目前關(guān)于蜂膠的研究中,蜂膠牙膏的報(bào)道少見(jiàn)。將天然蜂膠加入牙膏中,通過(guò)日常刷牙控制菌斑,同時(shí)具備化學(xué)和機(jī)械控制的
3、雙重作用,有著廣闊的開(kāi)發(fā)前景。 本研究用國(guó)產(chǎn)蜂膠醇提取物(EEP)進(jìn)行體外抑菌實(shí)驗(yàn),在此基礎(chǔ)上研制一種蜂膠牙膏,通過(guò)體外抑菌實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)臨床試驗(yàn),觀(guān)察其抑菌效果和對(duì)菌斑形成及菌斑pH變化的影響,探討蜂膠防齲機(jī)制,為蜂膠的臨床開(kāi)發(fā)提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 材料與方法 1、將蜂膠醇溶液用95%乙醇,按1:2倍比稀釋法,配成8種濃度的藥液,厭氧條件下用輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)培養(yǎng)變形鏈球菌和遠(yuǎn)緣鏈球菌。采用紙片擴(kuò)散法,測(cè)量抑
4、菌環(huán)大小,以確定蜂膠對(duì)兩種鏈球菌的最小抑菌濃度(MIC)。 2、采用紙片擴(kuò)散法,以空白牙膏為陰性對(duì)照,0.2%洗必泰溶液為陽(yáng)性對(duì)照,觀(guān)測(cè)并比較5%、2.5%、1%和0.5%的蜂膠牙膏對(duì)變形鏈球菌和遠(yuǎn)緣鏈球菌的抑菌作用。 3、采用完全隨機(jī)對(duì)照的方法,選擇健康志愿者40名,隨機(jī)分為兩組,實(shí)驗(yàn)前檢測(cè)基線(xiàn)菌斑指數(shù)(PI<,0>),分別使用空白牙膏(不含蜂膠)和1%蜂膠牙膏刷牙,每天2次,在使用1周和4周后復(fù)查,分別檢測(cè)菌斑指數(shù)P
5、I<,1>和PI<,4>,評(píng)價(jià)蜂膠牙膏抑制菌斑形成的臨床效果。 4、選擇10名健康青年志愿者,選取右側(cè)上下頜第一、二雙尖牙鄰面菌斑作為測(cè)試部位,要求此部位為健康牙面。采用自身前后對(duì)照研究方法,用自制微型pH電極原位檢測(cè)含漱10%蔗糖溶液前后1小時(shí)內(nèi)(0、2、5、10、15、20、30、40、50、60min十個(gè)時(shí)間點(diǎn))牙菌斑pH的動(dòng)態(tài)變化,并對(duì)比觀(guān)察使用含蜂膠牙膏和不含蜂膠牙膏4周后,對(duì)漱糖前后1小時(shí)牙菌斑pH變化的影響。
6、 結(jié)果 1、蜂膠醇溶液對(duì)變形鏈球菌和遠(yuǎn)緣鏈球菌均有良好的抑菌作用,其最小抑菌濃度分別為0.3125%(3.125mg/ml)和0.625%(6.25mg/ml),抑制作用隨蜂膠濃度的升高而增強(qiáng)。 2、各濃度蜂膠牙膏均能有效抑制變形鏈球菌和遠(yuǎn)緣鏈球菌的生長(zhǎng),其抑制作用具有明顯的濃度依賴(lài)性;其中5%蜂膠牙膏對(duì)變形鏈球菌的抑菌作用與洗必泰的抑菌作用相同(P>0.05),對(duì)遠(yuǎn)緣鏈球菌的抑菌作用也與洗必泰接近。 3、使用
7、牙膏4周后,兩組PI值較第1周都有所下降,組間比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05);兩組自身前后比較,是實(shí)驗(yàn)組第4周PI變化幅度(△PI<,4>)與第1周PI變化幅度(△PI<,1>)比較,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。 4、先后使用兩種牙膏刷牙4周后,菌斑pH在漱糖后的變化規(guī)律與基線(xiàn)Stephan曲線(xiàn)相似,均呈先下降后上升的變化趨勢(shì)。用蜂膠牙膏刷牙4周后漱糖,菌斑pH值始終未低于臨界pH值5.5以下,且5和10min時(shí)間點(diǎn)pH
8、值及相關(guān)參數(shù)(pH<,min>和ApH)與基線(xiàn)Stephan曲線(xiàn)之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。 結(jié)論 1、蜂膠對(duì)變形鏈球菌和遠(yuǎn)緣鏈球菌生長(zhǎng)具有良好的抑制作用,顯示了蜂膠良好的抑菌防齲性能。 2、蜂膠牙膏能夠有效抑制變形鏈球菌和遠(yuǎn)緣鏈球菌的生長(zhǎng),并具有明顯濃度依賴(lài)性;5%蜂膠牙膏的抑菌作用與洗必泰接近。 3、蜂膠牙膏控制菌斑形成效果明顯優(yōu)于不含蜂膠的空白對(duì)照牙膏;提示使用蜂膠牙膏刷牙,能有效控制齦上菌斑
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