亞低溫對大鼠全腦缺血再灌注海馬糖原合成酶激酶3β表達的影響.pdf

1、目的：大鼠全腦缺血再灌注后，觀察糖原合成酶激酶3 β(Glycogen SynthaseKinase-3β，GSK3β)與缺血性神經(jīng)元凋亡的關系，及亞低溫(mild hypothermia)腦保護對缺血性神經(jīng)元凋亡和GSK3β表達的影響，探討亞低溫對腦缺血再灌注損傷的可能保護機制。 方法：采用四血管阻斷法建立大鼠全腦缺血模型。雄性成年SD大鼠80只，隨機分為假手術組，亞低溫組和常溫組，每組設缺血再灌注后3h、6h、1d、3d 4

2、個時間點，亞低溫組和常溫組每一時間點各8只(n=8)，假手術組各4只(n=4)。蘇木素.伊紅(HE)染色觀察各時間點海馬CA1區(qū)細胞形態(tài)學變化， TUNEL法檢測海馬CA1區(qū)神經(jīng)元凋亡，免疫組織化學染色方法檢測海馬CA1區(qū)GSK3β的表達。 結(jié)果： 1. HE染色結(jié)果：常溫組和亞低溫組于全腦缺血再灌注后3h和6h，HE染色均未見明顯改變，再灌注1d后，CA1區(qū)出現(xiàn)嚴重改變，再灌注3d后損傷最嚴重，出現(xiàn)細胞數(shù)目減少，細胞胞

3、體縮小、胞核固縮深染，損傷嚴重，排列紊亂，核膜不清，核仁消失。而亞低溫組海馬存活的錐體細胞數(shù)較之常溫組1d、3d時間點均明顯增加(P<0.05)。 2.TUNEL標記：假手術組各個時間點未發(fā)現(xiàn)有陽性細胞。在海馬CA1區(qū)，常溫組于再灌注6h后出現(xiàn)陽性細胞，1d后陽性細胞數(shù)最多，再灌注3d后陽性細胞數(shù)減少。而亞低溫組在6h點僅有少量表達，于24h點陽性細胞數(shù)增多，該兩個時間點陽性細胞數(shù)均較常溫組少(P<0.01)，再灌注3d后陽性細

4、胞數(shù)最多且高于常溫組(P<0.01)。 3.免疫組化結(jié)果：常溫組于缺血再灌注6h后出現(xiàn)免疫反應增強，隨著再灌注時間的延長，GSK-3β表達逐漸增高，于1d時達到高峰，而后下降；亞低溫組較假手術組比，于缺血再灌注6h時間點無明顯免疫反應改變，24h時間點出現(xiàn)免疫表達增強(P<0.01)，但較常溫組比,GSK-3β的免疫表達明顯降低(P<0.01)，再灌注3d時其表達較常溫組和假手術組均明顯降低(P<0.01)。 結(jié)論：