三倍體紫錐菊花藥培養(yǎng)與非整倍體植株再生.pdf

1、紫錐菊（Echinacea purpureaL.）是原產(chǎn)北美的多年生草本植物，因具有抗菌消炎，增強機體免疫力的作用而在西方國家受到普遍重視，在中國則已被用作獸藥原料。新近的研究表明，多倍化是提高紫錐菊藥用成分含量的有效途徑，而非整倍體由于特定染色體的附加或減少，會使該染色體上的基因劑量增加或減少，從而有可能獲得藥用成分含量較高的株系。多倍體與二倍體的雜交是獲得非整倍體的常用方法，而通過多倍體的花藥培養(yǎng)也是獲得非整倍體的一種方式。本研究的

2、主要目的，是探索提高三倍體紫錐菊花藥培養(yǎng)獲得非整倍植株效率的可行方法。
　　減數(shù)分裂是形成染色體數(shù)目減半的小孢子的必要過程，而花藥培養(yǎng)實質(zhì)上就是培養(yǎng)花藥中的小孢子。在對三倍體紫錐菊減數(shù)分裂過程進行細胞學觀察時發(fā)現(xiàn)，其減數(shù)分裂中的染色體行為十分紊亂，導致在終變期形成包括單價體，二價體，三價體以及多價體的異常情況。染色體的平均配對構(gòu)型為9.73Ⅰ+7.54Ⅱ+2.61Ⅲ+0.07Ⅳ+0.01Ⅴ，在減數(shù)分裂Ⅰ中期大量染色體提前分離；分裂

3、過程中出現(xiàn)染色體不均等分離、染色體移動滯后、染色體橋、核融合等異?，F(xiàn)象；四分體時期出現(xiàn)三分體以及大量微核；減數(shù)分裂Ⅱ中期赤道板平面的排列方式有相互垂直，相互平行以及同處一平面，導致減數(shù)分裂Ⅱ末期染色體分離方向多樣化。
　　在確定三倍體紫錐菊花藥培養(yǎng)取材適期的試驗中，取位于頭狀花序由外及里2～8輪之間的小花進行觀察，發(fā)現(xiàn)小孢子發(fā)育與花蕾外觀，管狀花瓣萼長度比及雄蕊外觀之間具有密切的相關(guān)性。處于單核后期的小孢子具有較好的離體培養(yǎng)反應(yīng)，

4、此時期的花蕾外觀為舌狀花未完全展開，管狀花瓣萼比為0.54～0.68之間，管狀花和花藥外觀呈現(xiàn)黃色。
　　對三倍體紫錐菊花藥培養(yǎng)的培養(yǎng)基激素種類和濃度進行了比較細致的探討，確定MS+0.5mg/L BA+0.1mg/L NAA+0.03mg/L TDZ+50g/L蔗糖為最合適的誘導花藥形成愈傷組織的培養(yǎng)基配方，并且培養(yǎng)基中添加一定濃度的TDZ對改善愈傷組織的質(zhì)量，提高后續(xù)培養(yǎng)的植株再生效率具有重要作用。
　　本研究還對其他方