水通道蛋白1、4、5在實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性鼻炎鼻粘膜中的表達(dá)和意義.pdf

1、目的：1．成功建立大鼠變應(yīng)性鼻炎(Allergic rhinitis，AR)動(dòng)物模型;2．提供變應(yīng)性鼻炎模型的鼻粘膜組織形態(tài)學(xué)特征;3．確定水通道蛋白(Aquaporins，AQPs)在大鼠變應(yīng)性鼻炎時(shí)鼻粘膜上的表達(dá)情況;4．觀察地塞米松對(duì)水通道蛋白在變應(yīng)性鼻炎時(shí)表達(dá)的影響;5．探討水通道蛋白與變應(yīng)性鼻炎時(shí)水液分泌的關(guān)系. 方法：健康清潔級(jí)SD大鼠48只，體重250～300g，隨機(jī)分成空白組(C1)，假處理組(C2)，模型組(M

2、)，干預(yù)組(D1，D2)，模型組16只，其他每組8只。AR模型建立方法：以卵清蛋白(OVA)經(jīng)全身致敏，5天后強(qiáng)化致敏，自第14天開始以1mg/mloVA，20ul每天滴鼻，直至大鼠打噴嚏，搔鼻，鼻涕的癥狀評(píng)分達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)；干預(yù)組則在模型成功的基礎(chǔ)上，予地塞米松(DEX)lmg/kg，肌肉注射，每天一次，分別干預(yù)一周、兩周；假處理組則以生理鹽水代替OVA，其余與模型組相同；空白組不作任何處理。用組織化學(xué)方法觀察變應(yīng)性鼻炎的組織形態(tài)學(xué)特征，運(yùn)

3、用免疫組織化學(xué)方法(SP法)檢測(cè)各組動(dòng)物鼻粘膜AQPs的表達(dá)和變化。并與地塞米松干預(yù)后進(jìn)行比較。本實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，實(shí)驗(yàn)各組間的顯著性檢驗(yàn)采用方差分析及重復(fù)測(cè)量，以P<0.05作為有顯著性差異意義。 結(jié)果：AR模型時(shí)鼻分泌物涂片顯示大量中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞。粘膜中嗜酸性粒細(xì)胞在M組明顯增多，經(jīng)DEX作用后減少。形態(tài)學(xué)改變：HE染色見正常鼻粘膜上皮為假?gòu)?fù)層纖毛柱狀上皮和復(fù)層扁平上皮，由纖毛

4、柱狀上皮細(xì)胞，杯狀細(xì)胞、扁平細(xì)胞等組成，粘膜下纖維結(jié)締組織很薄，血管數(shù)量很少，無炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及血管改變；模型組較C1，C2組粘膜增厚顯著，小血管增生擴(kuò)張明顯，上皮分泌細(xì)胞增多，上皮下大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，粘膜下腺體數(shù)量明顯增加，腺體擴(kuò)張；經(jīng)DEX處理后，粘膜厚度逐漸降低，血管擴(kuò)張及腺體增生及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度減輕。免疫組化：AQP1，AQP4，AQP5在鼻粘膜中表達(dá)豐富，它們以不相互重疊的形式分布。AQPl在粘膜內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞、血竇內(nèi)皮細(xì)胞和

5、成纖維細(xì)胞中有較強(qiáng)的表達(dá)：AQP4表達(dá)于鼻粘膜上皮細(xì)胞和上皮內(nèi)腺上皮細(xì)胞的基側(cè)膜，且在上皮下層的部分腺上皮細(xì)胞中也有豐富的表達(dá)；AQP5在上皮下部分腺上皮細(xì)胞的腔側(cè)膜成簇表達(dá)。AR模型時(shí)，AQP1蛋白表達(dá)較C1，C2組減少，AQP4的表達(dá)較C1，C2組無明顯變化，AQP5蛋白表達(dá)增加；經(jīng)DEX干預(yù)1周后，AQPl蛋白表達(dá)較AR模型時(shí)有增加，AQP4及AQP5的表達(dá)較AR模型時(shí)均有減少；DEX干預(yù)2周與干預(yù)1周時(shí)比較，AQPl蛋白的表達(dá)有

6、增加，AQP4的表達(dá)并無明顯改變，AQP5蛋白的表達(dá)有減少。 結(jié)論：通過OVA多次致敏，局部激發(fā)能夠成功的建立大鼠變應(yīng)性鼻炎的動(dòng)物模型。病理形態(tài)學(xué)上的改變：變應(yīng)性鼻炎時(shí)，上皮分泌細(xì)胞明顯增多，粘膜增厚，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及嗜酸性粒細(xì)胞明顯增多，腺體擴(kuò)張?jiān)龆?，小血管的增加，充血。?jīng)DEX處理后，粘膜厚度逐漸降低，血管擴(kuò)張及腺體增生及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度減輕。免疫組組織化學(xué)結(jié)果顯示了：AQP1，4，5在大鼠鼻粘膜上有不重疊表達(dá)；變應(yīng)性鼻炎時(shí)，