大鼠三叉神經(jīng)下頜支離斷后神經(jīng)生長因子對三叉神經(jīng)感覺核神經(jīng)元凋亡的影響的實驗研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文大鼠三叉神經(jīng)下頜支離斷后神經(jīng)生長因子對三叉神經(jīng)感覺核神經(jīng)元凋亡的影響的實驗研究姓名：許波申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：頜面外科指導(dǎo)教師：楊軍2001.6.1常組(對照組)，左側(cè)三叉神經(jīng)下頜支離斷后吻合生理鹽水(Ns)組(實驗組1)、左側(cè)三叉神經(jīng)下頜支離斷后吻合神經(jīng)生長因子(NGF)組(實驗組2)。實驗組又以離斷后不同時問吻合進行分組，分為0天、3天、7天吻合組。根據(jù)吻合后飼養(yǎng)的時相點不同，又分為吻合后3，7，15，2l

2、，30天組。每組6只動物，大鼠經(jīng)l％戊巴比妥鈉(5060mg／kg)腹腔注射麻醉后，備皮、消毒，切開左側(cè)下頜下緣下皮膚、肌肉、骨膜分離、掀起頰側(cè)軟組織瓣，顯鼴下頜骨，找出頦孔及出頦孔之下齒槽神經(jīng)血管束。用小骨鑿去除左下頜骨下113頰側(cè)骨板，暴露出下齒槽神經(jīng)管，顯露下齒槽神經(jīng)血管束。在手術(shù)顯微鏡下，仔細(xì)分離左下齒槽神經(jīng)。自頦孔向后約6mm處切去下齒槽神經(jīng)6mm，任其回縮。取用|4ram長的硅膠管(內(nèi)徑I5ram，外徑2。0mm)，用9個0

3、無損傷尼龍線穿過神經(jīng)斷端外膜，兩端分別套入管內(nèi)2mm并固定于管壁上，使兩神經(jīng)斷端間距為10ram，對左側(cè)下齒槽神經(jīng)造成10mm缺損。在離斷后0天、3天、7天進行吻合并立即用微量注射器將25sNGF(中國軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所提供)溶液(1mg／L)30l_d注入實驗組2橋接硅膠管內(nèi)，實驗組I橋接硅膠管內(nèi)注入等量的生理鹽水。分別飼養(yǎng)3天、7天、15天、2l天、30天。各組動物飼養(yǎng)至所需時間后用4％的多聚甲醛灌注取材。取所需時相點的術(shù)

4、后動物，1％戊巴比妥鈉(5060mg／kg)腹腔注射麻醉后，開胸，經(jīng)左心室升主動脈插管快速灌注溫生理鹽水150ml后，先快后慢灌注4℃4％多聚甲醛01mol／L磷酸鹽緩沖液(pH73)固定液約200ml，灌注后將剝出大腦組織放入4℃4％多聚甲醛0Imol／L磷酸鹽緩沖液液后固定4小時，入20％蔗糖液中直至下沉。沿大腦腳蓋中部靠外側(cè)(前囟后968ram，中線旁O(shè)68mm)，行冰凍冠狀連續(xù)切片(10mm)，每兩片取一片，用做免疫細(xì)胞化學(xué)。(