調(diào)補(bǔ)肺腎三法對(duì)COPD大鼠肺血管和右心室重塑的療效及遠(yuǎn)后效應(yīng)機(jī)制.pdf

1、　　目的
　　1 評(píng)價(jià)補(bǔ)肺健脾法、補(bǔ)肺益腎法和益氣滋腎法對(duì)COPD肺血管和右心室重塑的療效及其遠(yuǎn)后效應(yīng)。
　　2 探討補(bǔ)肺健脾法、補(bǔ)肺益腎法和益氣滋腎法改善COPD肺血管和右心室重塑的機(jī)制及其遠(yuǎn)后效應(yīng)機(jī)制。
　　方法
　　大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、補(bǔ)肺健脾組、補(bǔ)肺益腎組、益氣滋腎組和氨茶堿組,每組20只。采用香煙熏吸聯(lián)合反復(fù)細(xì)菌感染的方法制作穩(wěn)定期COPD大鼠模型。于第9周開(kāi)始分別給予相應(yīng)的藥物治療

2、至第20周,半數(shù)取材,其余動(dòng)物正常飼養(yǎng)至第32周,取材。檢測(cè)大鼠肺功能(TV、PEF、EF50)；肺組織病理,肺臟超微結(jié)構(gòu)變化,右心肥大指數(shù),心臟組織臟超微結(jié)構(gòu)變化；采用熒光定量PCR法測(cè)定肺臟組織MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TGF-β的基因表達(dá),采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)心臟組織ET-1、TGF-β、VEGF、bFGF、MMP-9和TIMP-1的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果
　　1 一般情況
　　模型組大鼠形

3、體消瘦,精神倦怠,活動(dòng)減少,進(jìn)食量、飲水量減少,大便溏,墊料潮濕等,3個(gè)中藥組(補(bǔ)肺健脾組、補(bǔ)肺益腎組和益氣滋腎組,下同)和氨茶堿組可以改善上述變化,其中以補(bǔ)肺健脾組和補(bǔ)肺益腎組效果尤為明顯。模型組大鼠體重增長(zhǎng)趨勢(shì)較對(duì)照組緩慢(P>0.05)。3個(gè)中藥組和氨茶堿組體重自第12周增長(zhǎng)趨勢(shì)較模型組有所加快(P>0.05)。
　　2 肺功能
　　模型組TV、PEF、EF50從第4周開(kāi)始與照組比較明顯降低(P<0.05,P<0.

4、01),3個(gè)中藥組從16周起與模型組相比PEF 和EF50水平明顯升高(P<0.05,P<0.01),TV值從第20周起顯著升高(P<0.05,P<0.01)；氨茶堿組在20、、28周時(shí)PEF值明顯升高(P<0.05)。在32周的觀察期間,3個(gè)中藥組與氨茶堿組比較TV、PEF、EF50水平無(wú)顯著差異(P>0.05)。
　　3 肺臟、心臟組織病理
　　第20、32周結(jié)束時(shí),模型組肺小血管壁厚度和右心室肥大指數(shù)較對(duì)照組明顯升

5、高(P<0.01),3個(gè)中藥組和氨茶堿組肺血管壁增厚程度、右心室肥大指數(shù)較模型組顯著降低(P<0.01)；3個(gè)中藥組與氨茶堿組比較右心室肥大指數(shù)顯著降低(P<0.05,P<0.01)；模型組肺動(dòng)脈、心肌細(xì)胞、心血管線粒體體密度較對(duì)照組明顯減少(P<0.01),3個(gè)中藥組較模型組肺動(dòng)脈線粒體體密度顯著增多(P<0.01),3個(gè)中藥組與氨茶堿組心肌細(xì)胞、心血管線粒體體密度較模型組顯著增多(P<0.01)；模型組肌節(jié)長(zhǎng)度較對(duì)照組減少(P<0.

6、05)。第20周時(shí),補(bǔ)肺健脾組肺小血管壁厚度較補(bǔ)肺益腎組和益氣滋腎組明顯降低(P<0.05, P<0.01)；第20周時(shí),補(bǔ)肺健脾組、補(bǔ)肺益腎組與益氣滋腎組比較右心室肥大指數(shù)降低(P<0.05)；補(bǔ)肺健脾組肌節(jié)長(zhǎng)度較模型組增長(zhǎng)(P<0.01)。第32周時(shí),補(bǔ)肺健脾組與補(bǔ)肺益腎組肌節(jié)長(zhǎng)度較模型組增長(zhǎng)(P<0.05,P<0.01)。與第20周比較,模型組、氨茶堿組肺小血管壁厚度比第32周時(shí)增厚(P<0.05,P<0.01),3個(gè)中藥組肺小血

7、管壁厚度比第32周時(shí)降低(P<0.05,P<0.01)； 3個(gè)中藥組第32周右心室肥大指數(shù)降低(P<0.01)。
　　4 肺臟組織MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TGF-β
　　第20、32周時(shí),模型組肺組織MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TGF-β的表達(dá)較對(duì)照組明顯升高(P<0.01)；與模型組相比,補(bǔ)肺健脾組肺組織MMP-2的表達(dá)明顯降低(P<0.01)；3個(gè)中藥組和氨茶堿組MMP-9、TIMP-1和TG

8、F-β表達(dá)顯著降低(P<0.05,P<0.01)；補(bǔ)肺健脾組MMP-2表達(dá)較補(bǔ)肺益腎組、益氣滋腎組及氨茶堿組明顯降低(P<0.01)。其中第20周時(shí),補(bǔ)肺健脾組與補(bǔ)肺益腎組MMP-9表達(dá)較氨茶堿組明顯降低(P<0.05,P<0.01)；3個(gè)中藥組TIMP-1表達(dá)較氨茶堿表達(dá)明顯降低(P<0.01)。第32周時(shí),補(bǔ)肺健脾組MMP-9、TGF-β表達(dá)較補(bǔ)肺益腎組、益氣滋腎組及氨茶堿組表達(dá)明顯降低(P<0.05,P<0.01),益氣滋腎組與氨

9、茶堿組比較TGF-β表達(dá)降低(P<0.05)。與20周比較,模型肺組織MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TGF-βmRNA的表達(dá)第32周時(shí)降低(P<0.01),3個(gè)中藥組和氨茶堿組MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TGF-βmRNA的表達(dá)第32周時(shí)降低(P<0.01)。
　　5 心臟組織ET-1、TGF-β、VEGF、bFGF、MMP-9和TIMP-1
　　第20、32周結(jié)束時(shí),模型組心臟組織ET-1、TGF-β

10、、VEGF、bFGF、MMP-9和TIMP-1表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P<0.01)；3個(gè)中藥組ET-1、TGF-β、VEGF、bFGF、MMP-9和TIMP-1表達(dá)均較模型組顯著降低(P<0.05,P<0.01)；3個(gè)中藥組ET-1表達(dá)較氨茶堿組明顯降低(P<0.01)。其中第20周時(shí),3個(gè)中藥組心臟組織TGF-β表達(dá)較氨茶堿組明顯降低(P<0.01)；補(bǔ)肺健脾組心臟組織VEGF表達(dá)較補(bǔ)肺益腎組、益氣滋腎組與氨茶堿組明顯降低(P<0.01

11、),補(bǔ)肺益腎組VEGF的表達(dá)較益氣滋腎組與氨茶堿組明顯降低(P<0.01)；補(bǔ)肺健脾組與補(bǔ)肺益腎組bFGF的表達(dá)較氨茶堿組明顯降低(P<0.01)。第32周時(shí),補(bǔ)肺健脾組與補(bǔ)肺益腎組TGF-β的表達(dá)較氨茶堿組明顯降低(P<0.01)；3個(gè)中藥組心臟組織VEGF的表達(dá)較氨茶堿組明顯降低(P<0.05,P<0.01)。與20周比較,模型心臟組織ET-1、TGF-β、VEGF、MMP-9和TIMP-1的表達(dá)第32周時(shí)降低(P<0.01),3個(gè)

12、中藥組和氨茶堿組ET-1、TGF-β、VEGF、MMP-9和TIMP-1的表達(dá)第32周時(shí)降低(P<0.01)。
　　6 相關(guān)分析
　　相關(guān)分析表明,肺小血管壁厚度與肺組織中MMP-2(r=0.630,P=0.001)、MMP-9 (r=0.796,P=0.000)、TIMP-1(r=0.588,P=0.003)、TGF-β(r=0.651,P=0.001)顯著 正相關(guān)(P<0.01)；肺動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞線粒體體密度肺組織

13、中MMP-2(r=-0.715,P=0.001)、MMP-9(r=-0.762,P=0.000)、TIMP-1(r=-0.725,P=0.003)、TGF-β(r=-0.601,P=0.001)顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01)。右心室肥大指數(shù)與心臟組織中ET-1(r=-0.854,P=0.000)、TGF-β(r=-0.879,P=0.000)、VEGF(r=-0.868,P=0.0030)、bFGF(r=-0.850,P=0.000)、MM

14、P-9(r=-0.865,P=0.000)、TIMP-1(r=-0.798,P=0.000)顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01)；心肌細(xì)胞線粒體體密度與心臟組織中ET-1(r=0.465,P=0.004)、VEGF(r=0.446,P=0.0030)、bFGF(r=0.379,P=0.023)、MMP-9(r=0.485,P=0.003)、TIMP-1(r=0.549,P=0.001)顯著正相關(guān)(P<0.05,P<0.01)。
　　結(jié)論

15、
　　1 補(bǔ)肺健脾方、補(bǔ)肺益腎方和益氣滋腎方可以明顯改善COPD大鼠一般狀況及肺功能、減輕肺臟、心臟組織病理?yè)p害,具有顯著療效和遠(yuǎn)后效應(yīng)。
　　2 補(bǔ)肺健脾方、補(bǔ)肺益腎方和益氣滋腎方對(duì)COPD大鼠肺血管重塑、右心室重構(gòu)具有良好的療效和遠(yuǎn)后效應(yīng),其機(jī)制可能與調(diào)控相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)及基質(zhì)金屬蛋白酶代謝有關(guān),在降低肺小血管壁厚度,右心肥大指數(shù),ET-1、TGF-β、VEGF、MMP-2、MMP-9及TIMP-1表達(dá)等方面尤為突出