乙型肝炎病毒與DNAJB4轉錄調節(jié)作用機制的體外研究.pdf

1、目的：
　　 探討體外培養(yǎng)條件下HBV與DNAJB4基因轉錄水平表達的關系，揭示HBV誘發(fā)肝癌發(fā)生的新機制，為HBV感染的治療提供新的思路，為深入理解DNAJB4的轉錄調節(jié)機制提供新的知識。
　　 方法：
　　 1.用RT-PCR和Real-time PCR檢測DNAJB4在HepG2細胞和HepG2.2.15細胞中轉錄水平的表達。
　　 2.構建DNAJB4啟動子蟲熒光素酶報告質粒，分別與HBV表達質粒

2、、對照質粒共轉染HepG2細胞，利用雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)，檢測熒光素酶活性。
　　 3.構建HBs、HBp、HBc及HBx表達質粒，分別與DNAJB4啟動子蟲熒光素酶報告質粒共轉染HepG2細胞，利用雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)，檢測熒光素酶活性。
　　 結果：
　　 1.RT-PCR結果顯示DNAJB4在HepG2.2.15細胞中的表達量是其在HepG2細胞中表達量的3倍，Real-time PCR結果顯示

3、DNAJB4在HepG2.2.15細胞中的表達量是其在HepG2細胞中表達量的2.59倍。
　　 2.成功構建了DNAJB4啟動子蟲熒光素酶報告質粒，且DNAJB4啟動子蟲熒光素酶報告質粒與HBV表達質粒共轉染組的相對熒光素酶活性是其對照組的2.28倍。
　　 3.轉染HBs和HBc表達質粒組的相對熒光素酶活性分別是其對照組的2.11倍和1.77倍，而HBx、HBp表達質粒對熒光素酶活性沒有影響。
　　 結論：<